สืบค้นงานวิจัย
การศึกษาลักษณะและหน้าที่ของโปรตีน Argonaute ในการเจริญของเซลล์สืบพันธุ์และการพัฒนาตัวอ่อนของกุ้งกุลาดำ
อภินันท์ อุดมกิจ - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การศึกษาลักษณะและหน้าที่ของโปรตีน Argonaute ในการเจริญของเซลล์สืบพันธุ์และการพัฒนาตัวอ่อนของกุ้งกุลาดำ
ชื่อเรื่อง (EN): Molecular and functional studies of Argonaute protein involved in gametogenesis and embryonic development in black tiger shrimp
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: อภินันท์ อุดมกิจ
บทคัดย่อ: ไปรตีน Argonaute เป็นไปรตีนที่ทำหนำที่สำคัญในกระบวนการยับยั้งการแสดงออกของยืนใน เซลล์ แบ่งเป็นสองกลุ่มตามลักษณะ โครงสร้าง การแสดงออกและหน้าที่ ได้แก่ไปรตีนในกล่ม AGO ซึ่งมี การแสดงออกในทุกอวัยวะและทำหน้าที่ควบคุมการแสดงออกของยืนที่ระดับ โปรตีนในกลุ่ม PIWI ซึ่งมีการแสดงออกอย่างจำพาะในเซลล์สืบพันข์ และทำหน้าที่หลักในการควบคุมการ post-transcription และ พัฒนาเซลล์สืบพันธุ์และขับยั้งการเคลื่อนที่ของ tansposon ในเซลล์สืบพันธุ์ งานวิจัยนี้เป็นการศึกษา CDNA ที่สร้างโปรตีน Argonaute ตัวหนึ่ง ที่พบในห้องสมุด CDNA ของ testis ของกังกุลาดำ เมื่อทำการโคลนชิ้น CDNA ที่สมบูรณ์ด้วยเทคนิค Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) แล้ววิเคราะห์ลำดับนิวคลีไอ ไทด์ของ CDNA ที่ไคลบได้ พบว่ามีลำดับบิวคดี ไอไทด์ที่สามารถแปลรหัสเป็นโปรตีนที่อยู่ในกลุ่มของ โปรตีน Argoanute โดยมีโดเมนที่จำเพาะของโปรตีน Argonaute ได้แก่ โดเมน PAZ และ PIWI เมื่อ วิเคราะห์ทาง phylogeneic พบว่าโปรตีนนี้อยู่ในกลุ่มของ AGO จึงเรียกชื่อว่า Pem-AG02 อย่างไรก็ตามเมื่อ ตรวจวัดการแสดงออกของ Pem-AG02 ใบอวัยวะต่างๆของกุ้งกุลาคำ พบว่ามีการแสดงออกเฉพาะในรังไข่ และ tซstis ของกุ้งเท่านั้น แต่ไม่พบการแสดงออกในอวัยวะอื่นๆ ซึ่งเป็นลักษณะการแสดงออกที่จำเพาะของ โปรตีนในกลุ่ม PIW1 จึงนับว่า Pem-4G02 เป็นโปรตีนชนิดใหม่ และเมื่อตรวจวัดการแสดงออกใบรังไข่ที่ ระยะต่างๆของการพัฒนาพบว่าระดับการแสดงอออกไม่มีความแตกต่างกันแต่พบว่า Pem-AG02 มีการ แสดงออกในระดับสูงใน แesis ซึ่งเป็นบรอเวณที่มีการพัฒนาเซลล์สืบพันชุเพศผู้ แต่มีการแมขสดงออกน้อย มากใน vas deferens และ spermatophore ซึ่งเป็นบริเวณที่มีเซลล์สืบพันธุ์ที่เจริญเต็มที่แล้ว จึงเป็นไปได้ว่า Pem-AG02 ทำหน้าที่สำคัญในกระบวนการพัฒนาเซลล์สืบพันธุ์ในกุ้งเพศผู้ บอกจากนี้การตรวจหาดำแหน่ง ของโปรตีน Pem-AG02 รรังไข่ และ tesis ด้วย alinity-puriied antibody ต่อ Pem-AG02 ก็พบว่าตรวจ พบ Pem-AG02 ใบบริเวณ follicular cells และในไซตพลาสซึมของเซลล์ไข่ในระยะ early vitellogenoic ป็นต้นไป ส่วนใน testis ตรวจพบโปรตีน Pem-AG02 ใน spermatocytes โดยพบทั้งในนิวเคลี่ยสและใบไซ โตพลาสซึม แต่ไม่พบใบ spermatoz0a ซึ่งสอดคล้องกับผลของการตรวจวัดการแสดงออกในระดับ mRNA ผลงานวิจัยนี้บ่งขี้ว่า Pem-AG02 เป็นโปรตีนที่มีบทบาทสำคัญในกระบวนการ spermatogenesis และอาจ ขับยั้ง tzansposon ใน testis ของกั๋งอีกด้วย ซึ่งจะต้องทำการศึกษาหน้าที่ โดขละเอียดต่อไป
บทคัดย่อ (EN): Argonaute proteins are proteins that play an important role in the inhibition of gene expression in the cells. Argonautes are divided into two subfamilies based on their structural characteristics, expression pattem and functions. The AGO subfamily is ubiquitously expressed in every organs and functions in controlling gene expression at post-transcriptional level whereas the PIWI subfamily is specifically expressed in germ cells and serves mainly to regulate the development of germ cells and inhibit the movement of the transposons. This project is aimed to study the cDNA encdoing Argonaute protein that was initially found in the testis cDNA library of the black tiger shrimp. Penaeus monodon. The complete cDNA was obtained by Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) technique. Nucleotide sequence analysis of this cDNA clone revealed a deduced amino acid sequences similar to Argoanute with specific domains; PAZ and PIWI. Phylogenetic analysis showed that this protein is in the AGO subfamily, and thus was called Pem-AGO2. However, when the expression of Pem-AGO2 in various shrimp organs was determined, it only expressed in the ovary and testis of shrimp, which similar to the expression characteristic of proteins in the PIWI subfamily. Therefore Pem-AGO2 might be a member of a new subgroup of shrimp Argounute proteins. Determination of the expression in the ovary at various stages of development showed no difference in expression levels. In contrast, in the male shrimp Pem-AGO2 are expressed at high levels only in the testis composing of the developing male gamete, but the expression was much less in vas deferens and spermatophore where the mature sperm was deposited. It is therefore possible that the Pem-AGO2 functions in the development of male germ cells in shrimp. In addition, the localization of the Pem-AG02 protien in shrimp ovary and testis by affinity-purified antibody against Pem-AG02 revelaed detectable Pem-AGO2 in follicular cells and cytoplasm of oocytes in early vitellogenoic stage onwards. The Pem-AGO2 protein in testis was detected in both the nucleus and the cytoplasm of spermatocutes but not in spermatozoa, which was consistent with the results of mRNA expression. The results form this study suggested that Pem-AG02 is a protein that plays an important role in spermatogenesis and may help protect shrimp germ cells form transposon as well.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ: การพัฒนาของตัวอ่อน
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การศึกษาลักษณะและหน้าที่ของโปรตีน Argonaute ในการเจริญของเซลล์สืบพันธุ์และการพัฒนาตัวอ่อนของกุ้งกุลาดำ
มหาวิทยาลัยมหิดล
30 กันยายน 2556
การพัฒนาอาหารสำเร็จรูปเพื่อกระตุ้นการเจริญพันธุ์ของกุ้งกุลาดำเพศผู้ การสืบค้นยีน และศึกษาการแสดงออกของโปรตีนในช่องเก็บเซลล์อสุจิของ กุ้งกุลาดำเพศเมียที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาความสามารถในการปฏิสนธิของเซลล์อสุจิ การพัฒนาเทคนิคเพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างสนิปในยีนตัวแทนลักษณะการเจริญเติบโตสำหรับกุ้งกุลาดำที่ทำการปรับปรุงพันธุ์ การศึกษาการแสดงออกและหน้าที่ของยีนพัฒนาเซลล์อสุจิที่แยกได้จากช่องเก็บอสุจิของกุ้งกุลาดำแม่พันธุ์และแนวทางการประยุกต์ใช้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการปฏิสนธิ การหาลักษณะเฉพาะของชุมชนแบคทีเรียในลำไส้ในกุ้งกุลาดำและกุ้งขาวแปซิฟิกเมื่อได้รับเชื้อ Vibrio harveyi การศึกษายีนของไวรัสตัวแดงดวงขาวและกุ้งกุลาดำที่เกี่ยวข้องกับกลไกการตายของเซลล์ การใช้ Aurantiochytrium limacinum BCC52274 เป็นอาหารสำหรับลูกกุ้งวัยอ่อนของกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) เพื่อเป็นแหล่งสารอาหารกรดไขมันไม่อิ่มตัวสูง การศึกษากลไกที่เกี่ยวข้องกับการรอดตายจากการติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวของกุ้งกุลาดำ การพัฒนาเทคโนโลยีการเก็บรักษาถุงน้ำเชื้อกุ้งกุลาดำที่อุณหภูมิต่ำเพื่อการเพาะเลี้ยงและการอนุรักษ์ ผลของการเพาะเลี้ยงกุ้งกุลาดำที่เพาะเลี้ยงด้วยลูกกุ้งที่ผ่านการพัฒนาสายพันธุ์ของ สวทช. ในบ่อเลี้ยงของเกษตรกร
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก