สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาวิธีเตรียมตัวอย่างเลือดเพื่อจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงด้วย MALDI-TOF MS Development of blood sample preparation method for direct bacterial identification using MALDI-TOF MS
ฉัตรทิพย์ เครือหงส์ - สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาวิธีเตรียมตัวอย่างเลือดเพื่อจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงด้วย MALDI-TOF MS Development of blood sample preparation method for direct bacterial identification using MALDI-TOF MS
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ฉัตรทิพย์ เครือหงส์
บทคัดย่อ: คนไทยติดเชื้อในกระแสเลือดปีละกว่า 50,000 คนและอัตราการเสียชีวิตสูงถึงร้อยละ 30 การประยุกต์ใช้เทคนิค Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) ในการจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงจากตัวอย่างเลือดจะช่วยหาเชื้อสาเหตุได้รวดเร็ว ส่งผลดีต่อการรักษา และลดอัตราการเสียชีวิต การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีเตรียมตัวอย่างเลือดให้เหมาะสมสำหรับการจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงด้วย MALDI-TOF MS โดยทดสอบกับ hemoculture 10 มิลลิลิตร ที่ spike เชื้อแบคทีเรีย 0.5 McFarland ปริมาตร 200 ไมโครลิตร บ่มที่ 35 องศาเซลเซียส และตรวจติดตามเป็นเวลา 0, 1, 2, 3 วัน จากนั้นนำเลือดที่บ่มแล้ว 1 มิลลิลิตรผสมกับ lysis buffer ที่เตรียมขึ้น บ่มที่อุณหภูมิห้องปั่นล้าง แล้วผสมกับ CHCA matrix ก่อนนำไปวิเคราะห์ด้วย MALDI-TOF MS โดยเทียบสเปคตรัมที่ได้กับฐานข้อมูล SARAMIS จากผลการทดสอบตัวอย่างเลือดที่ spike ด้วยแบคทีเรียแกรมลบ 8 ตัวอย่าง และแกรมบวก 7 ตัวอย่าง แสดงรูปแบบสเปคตรัมเปปไทด์ที่จำเพาะ มีความถูกต้องร้อยละ 100 โดยมีค่าระดับความเชื่อมั่นจาก SARAMIS database สูงสุดเมื่อใช้ lysis buffer 3 ชนิดร่วมกัน คือ saponin, Triton X-100 และ SDS (p value < 0.05) วิธีเตรียมตัวอย่างที่พัฒนาขึ้นสามารถจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงจากตัวอย่างเลือดด้วย MALDI-TOF MS ภายใน 1 ชั่วโมง โดยให้ผลไม่แตกต่างจากการวิเคราะห์โคโลนีที่เพาะแยกได้ นอกจากนี้ยังลดภาระงานและค่าใช้จ่ายสามารถนำมาประยุกต์ใช้ในงานประจำวัน Sepsis annually affects approximately 50,000 individuals in Thailand with high mortality rate up to 30%. Here, we developed a blood sample preparation method for direct bacterial identification using Matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) to accelerate diagnostic time. The 10-mL sterile blood and 200 µL of 0.5 McFarland bacterial suspensions were transferred into hemoculture bottles and incubated for 0, 1, 2, 3 days, at 35°C. Blood samples (1 mL) were incubated with lysis buffer at room temperature, washed and mixed with CHCA matrix, prior to MALDI-TOF MS analysis. Microbial identification of 15 spiked hemocultures (7 Gram-positive and 8 Gram-negative bacteria) revealed 100% of the accurately-identified samples at species level. The confidence level obtained from SARAMIS database was highest when using combination of lysis buffers i.e. saponin, Triton X-100 and SDS (p value < 0.05). The MALDI-TOF MS identification results from direct preparation were consistent with that of the culture method. This technique was inexpensive, reduced hand-on time and could be an alternative identification method for blood cultures.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://nih.dmsc.moph.go.th/research/showimgdetil.php?id=720
เผยแพร่โดย: สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science
คำสำคัญ: MALDI-TOF Mass spectrometry
เจ้าของลิขสิทธิ์: สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุขกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การพัฒนาวิธีเตรียมตัวอย่างเลือดเพื่อจำแนกเชื้อแบคทีเรียโดยตรงด้วย MALDI-TOF MS Development of blood sample preparation method for direct bacterial identification using MALDI-TOF MS
สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science
2563
ปัจจัยที่มีผลต่อการพัฒนาข้าราชการกรมประมง Development of Mayaro virus detection by real-time RT-PCR and retrospective surveillance of incident in Thailand during 2016-2019 จำแนก และคัดเลือกโปรโมเตอร์จากพืชโดยเฉพาะตระกูล Poaceae เพื่อใช้ในการเพิ่มประสิทธิภาพการแสดงออกของยีนเป้าหมายในระบบท่อลำเลียงของอ้อย การพัฒนาชุดตรวจแบบแถบสีสำหรับเชื้อ Vibrio parahaemolyticus และ V. vulnificus ผลของสภาวะการเพาะเลี้ยงต่อการจำแนกเชื้อบาซิลลัสแอนทราซิสด้วยเทคนิค MALDI-TOF MS Effects of culture conditions for Bacillus anthracis identification based on MALDI-TOF MS การพัฒนาวิธีตรวจหาเชื้อ Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis ในสัตว์เคี้ยวเอื้อง ด้วยเทคนิคอณูชีวโมเลกุล การรักษาและป้องกันโรคที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรียดื้อยาด้วยฟาจ การวิจัยและพัฒนาผลิตภัณฑ์แบคทีเรีย Xenorhabdus nematophila เพื่อควบคุมไรศัตรูเห็ด การยับยั้งเชื้อแบคทีเรียของกระดาษผสมสารสกัดใบฝรั่ง เพื่องานบรรจุภัณฑ์อาหาร การผลิตแบคทีเรียให้สร้างอาร์เอ็นเอสายคู่มีฤทธิ์ยับยั้งการติดเชื้อไวรัสหัวเหลือง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก