สืบค้นงานวิจัย
การทำบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไลเปสทนอุณหภูมิสูงที่โคลนจากเมตาจีโนมิกไลบราลี่ย์เพื่อประยุกต์ใช้ในการผลิตไบโอดีเซล
ทิพรัตน์ หงภัทรคีรี - มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
ชื่อเรื่อง: การทำบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไลเปสทนอุณหภูมิสูงที่โคลนจากเมตาจีโนมิกไลบราลี่ย์เพื่อประยุกต์ใช้ในการผลิตไบโอดีเซล
ชื่อเรื่อง (EN): Purification and Characterization of Thermotolerant Lipase Cloned from MetagenomicLibraries for the Application in Biodiesel Production
บทคัดย่อ: บทคัดย่อ เอนไซม์ไลเปสเป็นเอนไซม์ที่มีความสาคัญมากที่สุดในกลุ่มของเอนไซม์ย่อยไขมันที่นามาใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพในระดับอุตสาหกรรมเพื่อการประยุกต์ใช้ทางเทคโนโลยีชีวภาพที่หลากหลาย การศึกษาในครั้งนี้ได้นายีนสร้างเอนไซม์ไลเปส (lip52) ที่โคลนได้จาก Bacillus thermoamylovorans BHK52 มาศึกษาการแสดงออกใน Escherichia coli สายพันธุ์ต่างๆ (BL21, HB101, JM109, SURE) พบว่า E. coli BL21 ที่มีพลาสมิด pColdLip52 มีการแสดงออกของยีน lip52 สูงสุดเมื่อเลี้ยงในสภาวะที่กระตุ้นการแสดงออกของยีน lip52 ด้วยสาร IPTG ระดับความเข้มข้น 0.1 มิลลิโมลาร์ ในระยะ mid-log phase (OD660 0.5) ที่อุณหภูมิ 15 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง บนเครื่องเขย่าความเร็ว 200 รอบต่อนาที โดยมีค่ากิจกรรมไลเปส 1.79 ยูนิตต่อมิลลิลิตร จากนั้นนาสารละลายเอนไซม์ที่ได้มาผ่านการทาบริสุทธิ์ขั้นตอนเดียวด้วยเรซิน Ni-NTA พบว่าเอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์จาก E. coli BL21 (pColdLip52) มีค่าพีเอชและอุณหภูมิที่เหมาะสมต่อการทางานคือ 9.0 และ 60 องศาเซลเซียส ตามลาดับ เอนไซม์มีความคงตัวสูงในช่วงพีเอช 5.0-11.0 และในช่วงอุณหภูมิ 30-80 องศาเซลเซียส อีกทั้งไอออนโลหะรวมถึงสารเคมีทุกชนิดที่นามาทดสอบไม่มีผลต่อกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปส เอนไซม์ไลเปส Lip52 สามารถจัดอยู่ในประเภทของ alkali-thermostable lipase สาหรับการสังเคราะห์ fatty acid methyl ester (FAME) หรือไบโอดีเซลด้วยปฏิกิริยา ทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นของน้ามันเมล็ดในปาล์มและเมทานอลในระบบแบบกะโดยใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาเป็นเอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์ 2 ชนิด คือ เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์จาก E. coli BL21 (pColdLip52) และเอนไซม์ไลเปสจาก Burkholderia sp. PSU-POW2 พบว่าเอนไซม์ไลเปสจาก Burkholderia sp. PSU-POW2 มีความเหมาะสมในการเร่งปฏิกิริยา โดยมีผลผลิต FAME ประมาณร้อยละ 16.34 ในขณะที่เอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์จาก E. coli BL21 (pColdLip52) ไม่มีคุณสมบัติในการเร่งปฏิกิริยา ทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่น สาหรับสภาวะที่เหมาะสมในการสังเคราะห์ FAME คือ การใช้น้ามัน เมล็ดในปาล์มต่อเมทานอลในอัตราส่วนโดยโมลเท่ากับ 1 ต่อ 4 ปริมาณน้า 10 เปอร์เซ็นต์ และเร่งปฏิกิริยาด้วยเอนไซม์ไลเปสบริสุทธิ์ที่ผลิตจาก Burkholderia sp. PSU-POW2 ปริมาณ 15 ยูนิต บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส บนเครื่องเขย่าที่ความเร็ว 1,200 รอบต่อนาที เป็นเวลา 72 ชั่วโมง โดยพบว่าสามารถสังเคราะห์ FAME ได้สูงสุดเท่ากับ 40.56 เปอร์เซ็นต์ i
บทคัดย่อ (EN): Lipases are the most important lipolytic enzymes used as industrial biocatalysts for a variety of biotechnological applications. In this study, the lipase gene (lip52) cloned from Bacillus thermoamylovorans BHK52 was expressed in different Escherichia coli host strains (BL21, HB101, JM109, SURE). The optimal lipase production (1.79 U/ml) was accomplished when E. coli BL21 (pColdILip52) cells were induced (0.1 mM IPTG) during the mid-log phase (OD660 0.5) of cells cultivation at 15 ?C for 24 h with shaking (200 rpm). A one step purification of recombinant lipase was achieved using Ni-NTA resin. The purified lipase had an optimum pH of 9.0 and showed maximal activity at 60 ?C. It was highly stable within a pH range of 5.0-11.0 and a temperature range of 30-80 ?C. The effect of metal ions on the enzyme activity was that there are no metal ions that can activate the activity of purified lipase. In addition, the presence of tested chemicals did not affect the activity of purified lipase. The Lip52 lipase is an alkali-thermostable lipase. Fatty acid methyl ester (biodiesel) was produced by transesterification reaction of palm kernel oil and methanol in batch system using two sources of purified lipases including lipase form E. coli BL21 (pColdILip52) and lipase from Burkholderia sp. PSU-POW2. The results showed that lipase from Burkholderia sp. PSU-POW2 was suitable for methyl ester synthesis yielding 16.34% fatty acid methyl ester (FAME) whereas no transesterification reaction was observed when E. coli BL21 (pColdILip52) lipase was applied. The maximum production of FAME (40.56%) was achieved when transesterification reaction was carried out under the optimum condition: 15 Units of purified lipase from Burkholderia sp. PSU-POW2, molar ratio of plam kernel oil to methanol at 1:4 and 10% of water content under vigorous shaking (1,200 rpm) at 37 ?C for 72 h.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
คำสำคัญ: ไบโอดีเซล
เจ้าของลิขสิทธิ์: ฐานข้อมูล NRMS
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ทิพรัตน์ หงภัทรคีรี. "การทำบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไลเปสทนอุณหภูมิสูงที่โคลนจากเมตาจีโนมิกไลบราลี่ย์เพื่อประยุกต์ใช้ในการผลิตไบโอดีเซลPurification and Characterization of Thermotolerant Lipase Cloned from MetagenomicLibraries for the Application in Biodiesel Production". มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์. 2551

ทิพรัตน์ หงภัทรคีรี. "การทำบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไลเปสทนอุณหภูมิสูงที่โคลนจากเมตาจีโนมิกไลบราลี่ย์เพื่อประยุกต์ใช้ในการผลิตไบโอดีเซลPurification and Characterization of Thermotolerant Lipase Cloned from MetagenomicLibraries for the Application in Biodiesel Production". มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์. 2551. Print.



TARR Wordcloud:
การทำบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไลเปสทนอุณหภูมิสูงที่โคลนจากเมตาจีโนมิกไลบราลี่ย์เพื่อประยุกต์ใช้ในการผลิตไบโอดีเซล
ทิพรัตน์ หงภัทรคีรี
มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
30 กันยายน 2551
การศึกษาและวิจัยวิธีการและมาตรฐานในการตรวจวิเคราะห์คุณสมบัติของไบโอดีเซล รอบรู้...เรื่องราว ไบโอดีเซล การคัดเลือกยีสต์ที่ผลิตเอนไซม์ไลเปส และการประยุกต์ใช้ยีสต์ในการผลิตไบโอดีเซลจากน้ำมันปาล์ม การผลิต Inulin และ Oligofructose จากกล้วยเพื่อใช้เป็นสารเสริมอาหาร การผลิตไบโอดีเซลจากน้ำมันปาล์มที่ใช้แล้วโดยเอนไซม์ไลเปสตรึงรูปที่มีความจำเพาะต่างกัน การคัดเลือกเชื้อแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์ไลเปสจากดินในเขตพื้นที่อุบลรัตน์เพื่อใช้ประโยชน์ในการผลิตไบโอดีเซล การศึกษาฤทธิ์ต้านการอักเสบและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของยาตารับริดสีดวงมหากาฬ การผลิตไบโอดีเซลจากเมล็ดสำโรง การศึกษาศักยภาพของสาหร่ายขนาดเล็กเพื่อการผลิตไบโอดีเซล การผลิตเอนไซม์ไลเปสจากยีสต์เพื่ออุตสาหกรรม
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair