สืบค้นงานวิจัย
การแสดงออกของโปรตีน organic anion transporter 1 ของหนูในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae
Suphansa Sawamiphak - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การแสดงออกของโปรตีน organic anion transporter 1 ของหนูในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae
ชื่อเรื่อง (EN): Expression of the rat organic anion transporter 1 (rOAT1) in the yeast saccharomyces cerevisiae
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Suphansa Sawamiphak
บทคัดย่อ: C เมื่อทำ Western blot ของสารสกัดเยื่อหุ้มเซลล์โดยใช้แอนติบอดีจำเพาะต่อ OAT1 และ HA พบว่าสามารถตรวจพบ โปรตีนที่มีขนาดใกล้เคียงกันตั้งแต่ 60 ถึง 77 kDa ซึ่งสอดคล้องกับขนาดของ rOAT1 ที่ไม่มีและมีการเติมโมเลกุลของ คาร์โบไฮเดรตตามลำดับ แต่ไม่พบโปรตีนเหล่านี้ในยีสต์ที่มียีน wild type rOAT1 นอกจากนี้ยังพบว่าระดับการแสดงออก ของโปรตีนโดย GAL1p โดย multicopy plasmid มีระดับสูงสุด ในขณะที่การแสดงออกโดย ADH1p โดย integrative plasmid มีระดับต่ำสุด เมื่อย่อยโปรตีนด้วย endoglycosidase H พบว่าขนาดของโปรตีนส่วนใหญ่ลดลง เหลือ 60 kDa แสดงให้เห็นว่า มีการแสดงออกของ rOAT1ในยีสต์ และส่วนหนึ่งของโปรตีนนั้นถูก glycosylated และ ไม่พบความแตกต่างในการแสดงออกและ glycosylation ของโปรตีนในยีสต์ซึ่งเจริญเติบโตที่อุณหภูมิต่างกัน สำหรับ การศึกษาการทำหน้าที่ของโปรตีนในการขนส่งสารอินทรีย์ประจุลบนั้น ทำโดยการวัดปริมาณของ substrate ที่ติดฉลากรังสี คือ [14C]PAH ที่ถูกนำเข้าไปในเซลล์ยีสต์ พบว่ายีสต์ที่มีการแสดงออกของโปรตีน rOAT1 มีความสามารถในการขนส่ง PAH ได้ นอกจากนี้ปริมาณการขนส่ง PAH สอดคล้องกับระดับการแสดงออกของโปรตีนด้วยพลาสมิด ชนิดต่างๆ โดยสรุปแล้ว การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่ามีการแสดงออก rOAT1 ในยีสต์โดยโปรตีนนั้นสามารถทำหน้าที่ได้ และการ เลือกรหัสของกรดอะมิโนที่ N-terminus ของ rOAT1 เป็นปัจจัยสำคัญที่ส่งผลกระทบต่อการแสดงออกของโปรตีน
บทคัดย่อ (EN): C was also studied. Western blotting with polyclonal OAT1 antibody and monoclonal HA antibody showed that many proteins of the molecular mass, from 60 kDa to 77 kDa, corresponding to the non-glycosylated and the glycosylated rOAT1 gene product, respectively, were detectable in the total membrane extract of recombinant yeast harboring the HArOAT1, but not in the cells harboring the wild type rOAT1 gene. The GAL1-inducible expression in multicopy plasmid was found to be the highest level while the ADH1-constitutive expression in integrative plasmid was the least. Upon endoglycosidase H digestion, the sizes were reduced mostly to 60 kDa, suggesting that a large portion of rOAT1 was expressed in yeast as the glycosylated protein. No difference was found in the expression and glycosylation of rOAT1 expressed at different growth temperature. The transport function of rOAT1 was characterized by measurement of the radiolabeled substrate [14C]PAH which was taken up into yeast cells. The PAH uptake ability of the yeast-expressed rOAT1, which correlated with the protein expression level by different plasmids, was observed. Collectively, these studies suggest that rOAT1 is functionally expressed in the recombinant S. cerevisiae and the codon chosen at the N-terminus is an important factor that affects the expression.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=369&obj_id=2480
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Rats
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: C เมื่อทำ Western blot ของสารสกัดเยื่อหุ้มเซลล์โดยใช้แอนติบอดีจำเพาะต่อ OAT1 และ HA พบว่าสามารถตรวจพบ โปรตีนที่มีขนาดใกล้เคียงกันตั้งแต่ 60 ถึง 77 kDa ซึ่งสอดคล้องกับขนาดของ rOAT1 ที่ไม่มีและมีการเติมโมเลกุลของ คาร์โบไฮเดรตตามลำดับ แต่ไม่พบโปรตีนเหล่านี้ในยีสต์ที่มียีน wild type rOAT1 นอกจากนี้ยังพบว่าระดับการแสดงออก ของโปรตีนโดย GAL1p โดย multicopy plasmid มีระดับสูงสุด ในขณะที่การแสดงออกโดย ADH1p โดย integrative plasmid มีระดับต่ำสุด เมื่อย่อยโปรตีนด้วย endoglycosidase H พบว่าขนาดของโปรตีนส่วนใหญ่ลดลง เหลือ 60 kDa แสดงให้เห็นว่า มีการแสดงออกของ rOAT1ในยีสต์ และส่วนหนึ่งของโปรตีนนั้นถูก glycosylated และ ไม่พบความแตกต่างในการแสดงออกและ glycosylation ของโปรตีนในยีสต์ซึ่งเจริญเติบโตที่อุณหภูมิต่างกัน สำหรับ การศึกษาการทำหน้าที่ของโปรตีนในการขนส่งสารอินทรีย์ประจุลบนั้น ทำโดยการวัดปริมาณของ substrate ที่ติดฉลากรังสี คือ [14C]PAH ที่ถูกนำเข้าไปในเซลล์ยีสต์ พบว่ายีสต์ที่มีการแสดงออกของโปรตีน rOAT1 มีความสามารถในการขนส่ง PAH ได้ นอกจากนี้ปริมาณการขนส่ง PAH สอดคล้องกับระดับการแสดงออกของโปรตีนด้วยพลาสมิด ชนิดต่างๆ โดยสรุปแล้ว การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่ามีการแสดงออก rOAT1 ในยีสต์โดยโปรตีนนั้นสามารถทำหน้าที่ได้ และการ เลือกรหัสของกรดอะมิโนที่ N-terminus ของ rOAT1 เป็นปัจจัยสำคัญที่ส่งผลกระทบต่อการแสดงออกของโปรตีน
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Suphansa Sawamiphak. "การแสดงออกของโปรตีน organic anion transporter 1 ของหนูในยีสต์ Saccharomyces cerevisiaeExpression of the rat organic anion transporter 1 (rOAT1) in the yeast saccharomyces cerevisiae". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2552

Suphansa Sawamiphak. "การแสดงออกของโปรตีน organic anion transporter 1 ของหนูในยีสต์ Saccharomyces cerevisiaeExpression of the rat organic anion transporter 1 (rOAT1) in the yeast saccharomyces cerevisiae". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2552. Print.



TARR Wordcloud:
การแสดงออกของโปรตีน organic anion transporter 1 ของหนูในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae
Suphansa Sawamiphak
มหาวิทยาลัยมหิดล
24 กรกฎาคม 2552
การศึกษาการเปลี่ยนแปลงระดับการแสดงออกของยีนและโปรตีน Neurotransmitter transporter ในหนูเมาส์ที่ติดเชื้อโรคพิษสุนัขบ้า การผลิตทรีฮาโลสจากยีสต์ขนมปัง Saccharomyces cerevisiae ผลของเอสโตรเจนต่อการแสดงออกของโปรตีน Arc ในการเพิ่มความจำ การศึกษาทางพันธุศาสตร์โมเลกุลของโปรตีนที่แสดงออกในช่วงการพัฒนาของหัวมันสำปะหลัง การแสดงออกและการศึกษาคุณลักษณะหน้าที่ทางชีวเคมีของโปรตีน Argonaute ในกุ้งกุลาดำ พิษผลกระทบของสาร tributyltin ต่อการแสดงออกของโปรตีนในหอยนางรมปากจีบ การแสดงออกและศึกษาคุณสมบัติของชิ้นส่วนโปรตีน Domain II และ II-III ของโปรตีนฆ่าลูกน้ำยุงชนิด CRY4Ba จากเชื้อแบคทีเรีย Baci การศึกษาทางพันธุศาสตร์โมเลกุลและการแสดงออกของยีนโปรตีนขนส่งน้ำตาลซูโครสในมันสำปะหลัง ผลของแบคทีเรียปนเปื้อนต่อการเจริญและการผลิตเอทานเอลของ Saccharomyces cerevisiae การแสดงออกทางพันธุกรรมของโปรตีนติดตามเพื่อการประยุกต์ใช้ทางภูมิคุ้มกันวิทยาและการศึกษาทางชีววิทยาระดับโมเลกุล
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair