สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาวิธีทดสอบและวินิจฉัยเชื้อ cyprinid herpesvirus 3 ในปลาคาร์พด้วยวิธี nested PCR
ทินรัตน์ ศรีสุวรรณ์ - กรมปศุสัตว์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาวิธีทดสอบและวินิจฉัยเชื้อ cyprinid herpesvirus 3 ในปลาคาร์พด้วยวิธี nested PCR
ชื่อเรื่อง (EN): Development of nested PCR for direct detection and diagnosis of cyprinid herpesvirus 3 infection in carp
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ทินรัตน์ ศรีสุวรรณ์
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Supansa Tangdee
บทคัดย่อ: cyprinid herpesvirus 3 (CyHV3) (koi herpesvirus, KHV) เป็นไวรัสที่มี DNA สายคู่ก่อโรคระบาดรุนแรงในปลาไนและปลาคาร์พ (Cyprinus carpio) พบโรคนี้ได้ทั่วโลก การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีทดสอบ CyHV3 ที่มีความจำเพาะและความไวสูง โดยอาศัยหลักการ nested polymerase chain reaction (nested PCR) primers 2 คู่ได้รับการออกแบบขึ้นเพื่อใช้เพิ่มจำนวนยีนส์จำเพาะของ CyHV3 ขนาด 1,322 bp และ 919 bp ในปฏิกิริยา nested PCR โดยพบว่า primers ที่พัฒนาขึ้นนี้มีความจำเพาะสูงต่อ CyHV3 และไม่จำเพาะต่อ DNA จากปลาคาร์พปกติ รวมทั้งต่อ herpesviruses ชนิดอื่น ซึ่งได้แก่ pseudorabies virus และ duck plague virus ผลการทดสอบความไวโดยการใช้ 10-fold serial dilutions ของ CyHV3 DNA พบว่าวิธี nested PCR ที่พัฒนาขึ้นนี้มีความไวเท่ากับ 12 zg ไวมากกว่าชุดทดสอบสำเร็จรูป IQ2000 Detection and Prevention System (10ยกกำลัง9 เท่า) ซึ่งใช้กันอยู่ทั่วไปในห้องปฏิบัติการหลายแห่ง นอกจากนี้วิธีที่พัฒนาขึ้นยังสามารถใช้ทดสอบ CyHV3 จากปลาคาร์พป่วยที่ได้จากแหล่งเลี้ยงต่างๆ ในเขตกรุงเทพมหานครในปี 2552 อีกด้วย ดังนั้นจึงสรุปได้ว่าวิธี nested PCR ที่ได้พัฒนาขึ้นมีความจำเพาะและความไวสูงต่อ CyHV3 และสามารถใช้ในการทดสอบและวินิจฉัยการติดเชื้อ CyHV3 ในปลาคาร์พได้
บทคัดย่อ (EN): Cyprinid herpesvirus 3 (CyHV3), also known as koi herpesvirus (KHV), is a doublestranded DNA virus that causes a severely progressive disease in common carp and koi carp (both Cyprinus carpio) worldwide. In this present study, a specific and sensitive method for definitive diagnosis of CyHV3 infection was developed using nested polymerase chain reaction (nested PCR)-based technique. Two primer sets were designed and used to detect 1,322 and 919 bp of the CyHV3 genome in the nested PCR assay. The primers were shown to be exclusively specific for CyHV3 DNA because the amplicon was not detected using DNA extracted from either healthy carp or animals naturally infected by other animal herpesviruses, i.e. pseudorabies virus and duck plaque virus. Using 10-fold serial dilutions of CyHV3 DNA, the detection limit of the developed nested PCR was 12 zg and shown to be greater than (109times) that of IQ2000TM KHV Detection and Prevention System, a commercial nested PCR test kit widely used in laboratories. Additionally, in field application, the developed nested PCR was able to detect the presence of CyHV3 in carp specimens collected from different locations in the Bangkok area in 2009. In conclusion, the developed nested PCR can, therefore, be used as a specific and sensitive method for direct detection and diagnosis of CyHV3 infection in carp.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://niah.dld.go.th/th/files/ejournal/v05n1t05.pdf
เผยแพร่โดย: กรมปศุสัตว์
คำสำคัญ: ปลาคาร์พ
คำสำคัญ (EN): PCR
เจ้าของลิขสิทธิ์: กรมปศุสัตว์
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การพัฒนาวิธีทดสอบและวินิจฉัยเชื้อ cyprinid herpesvirus 3 ในปลาคาร์พด้วยวิธี nested PCR
กรมปศุสัตว์
2553
กรมปศุสัตว์
การศึกษาระดับของยาปฏิชีวนะในซีรั่มปลาคาร์พ และผลต่อแบคทีเรียแกรมบวกและแกรมลบ : รายงานผลการวิจัย ผลของสารสกัดหยาบขมิ้นชันและฟ้าทะลายโจรต่อระบบภูมิคุ้มกันและการเจริญเติบโตของปลาคาร์ป การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพของปลาคาร์พที่เป็นโรคเคเอชวี การศึกษาและพัฒนาแนวทางการป้องกันและกำจัดโรคขิงเน่าที่เกิดจากเชื้อบักเตรีโดยวิธีผสมผสาน ความชุกชุมของปลาบริเวณปะการังเทียม จังหวัดนราธิวาส การศึกษาความสมบูรณ์เพศของปลาน้ำจืดเศรษฐกิจในหนองเบน อำเภอมัญจาคีรี จังหวัดขอนแก่น การวินิจฉัยเชื้อ Thermophilic Campylobacter: วิธีทางจุลชีววิทยาเปรียบเทียบวิธี Multiplex Polymerase Chain Reaction การพัฒนาวิธีตรวจเชื้อ Trichomonas foetus ในน้ำเชื้อโคด้วยเทคนิค PCR การพัฒนาวิธีตรวจเชื้อ Tritrichomonas foetus ในน้ำเชื้อโคด้วยเทคนิค PCR ความหลากชนิดและความชุกชุมของปลาในบริเวณป่าชายเลนคลองกำพวนและพื้นที่ชายฝั่ง อำเภอสุขสำราญ จังหวัดระนอง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก