สืบค้นงานวิจัย
การวิจัยและพัฒนาพันธุ์หน้าวัวด้วยเทคนิคการหลอมรวมโปรโตพลาสต์
ปิยนันท์ ชมนาวัง - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน
ชื่อเรื่อง: การวิจัยและพัฒนาพันธุ์หน้าวัวด้วยเทคนิคการหลอมรวมโปรโตพลาสต์
ชื่อเรื่อง (EN): Anthurium Improvement for High Yield by Protoplast Fusion Technique
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ปิยนันท์ ชมนาวัง
บทคัดย่อ: การวิจัยเพื่อพัฒนาหน้าวัว โดยวิธีการรวมโปรโตพลาสต์ ในการศึกษาหน้าวัว 2 สายพันธุ์คือทรอปิคอล (จานรองดอกสีแดง) และพิชตาเช (จานรองดอกสีเขียว) พบว่า สภาวะที่เหมาะสมในการแยกเอนไซม์คือ เซลลูเลส, เฮมิเซลลูเลส และ เพคติเนสที่ระดับร้อยละ 5 สามารถแยกโปรโต พลาสต์ได้จำนวนมากที่สุด (42.53x104 และ 37.93x104 เซลล์/มิลลิลิตร ตามลำดับ) แต่ถ้าใช้เอนไซม์ที่ระดับร้อยละ 4 พบว่ามี ร้อยละความมีชีวิตมากที่สุดในทรอปิคอลและพิชตาเช (ร้อยละ 93.72 และ 92.27 ตามลำดับ) ระยะเวลาที่เหมาะสมสำหรับใช้ในการบ่มกับเอนไซม์คือ 8 ชั่วโมง สามารถแยก โปรโตพลาสต์จากทรอปิคอลและพิชตาเชได้มากที่สุด และการศึกษาผลของออสโมติคัมต่อจำนวนและความมีชีวิตของโปรโตพลาสต์ พบว่า แมนนิทอล 0.8 โมลาร์ เหมาะสมสำหรับแยกโปรโต พลาสต์ทั้ง 2 สายพันธุ์ จากการเพาะเลี้ยงโปรโตพลาสต์ในอาหารเหลวสูตร MS ที่มี 2,4-D ร่วมกับ BA และ Kinetin ที่ระดับ 1 มิลลิกรัมต่อลิตร ทำให้โปรโต พลาสต์มีจำนวนเซลล์และร้อยละการแบ่งเซลล์มากที่สุด โปรโตพลาสต์ที่เพาะเลี้ยงในอาหารที่มี กลูโคสร้อยละ 3 นาน 4 สัปดาห์ สามารถแบ่งเซลล์และพัฒนาได้ จากการแปรผันสูตรอาหารต่อการเพาะเลี้ยงโปรโตพลาสต์หน้าวัวทรอปิคอลและพิชตาเชพบว่าสูตรอาหารที่เหมาะสมคือ MS และ ? MS ตามลำดับ และเพื่อที่จะใช้ในขั้นตอนการศึกษาต่อไปได้สกัดโปรโตพลาสต์เพิ่มเติมจาก สายพันธุ์แองเจิล (จานรองดอกสีขาว) และแชมเปี้ยนพิงค์ (จานรองดอกสีชมพู) จากนั้นนำไปเพาะเลี้ยงเพิ่มจำนวนนาน 1 เดือน และนำมาศึกษาการชักนำให้เกิดการรวมโปรโตพลาสต์โดยการใช้สารเคมี polyethylene glycol (PEG) โดยใช้ความเข้มข้น PEG 8000 (ร้อยละ น้ำหนักต่อปริมาตร 0, 10, 20, 30 และ 40) และระยะเวลาในการชักนำการรวมโปรโตพลาสต์ (10, 20 และ 30 นาที) ที่แตกต่างกัน พบว่า การชักนำการรวมกันด้วย ร้อยละ 40 (น้ำหนักต่อปริมาตร) เป็นเวลา 30 นาที เหมาะสมสำหรับใช้ในการชักนำให้เกิดการหลอมรวมโปรโตพลาสต์ เนื่องจากพบว่ามีการเกิด binary fusion สูง (ร้อยละ 27) และเกิด multi fusion ต่ำ (ร้อยละ 9) ในการหลอมรวมโปรโต พลาสต์ด้วยกระแสไฟฟ้าระดับที่เหมาะสมคือการใช้ กระแสไฟฟ้าสลับ 150 โวลต์ต่อเซนติเมตร และปริมาณไฟฟ้ากระแสตรงในระดับที่เหมาะสมคือ 1500 โวลต์ต่อเซนติเมตร ที่ให้การเกิด binary fusion สูง (ร้อยละ 25) และเกิด multi fusion ต่ำ (ร้อยละ 9) ลูกผสมที่ได้จากการหลอมรวมโปรโตพลาสต์ด้วยสารเคมีที่น่าจะเกิดจากการรวมของสายพันธุ์พ่อและแม่เมื่อทดสอบด้วยเทคนิคอาร์เอพีดีมี 3 ลูกผสมได้แก่ ลูกผสมจากทรอปิคอลกับพิชตาเช ลูกผสมทรอปิคอลกับแองเจิล และลูกผสมจากพิชตาเชกับแชมเปี้ยนพิงค์ ในขณะที่ลูกผสมที่ได้จากการหลอมรวมโปรโตพลาสต์ด้วยกระแสไฟฟ้าที่น่าจะเกิดจากการรวมของสายพันธุ์พ่อและแม่เมื่อทดสอบด้วยเทคนิคอาร์เอพีดีมี 2 ลูกผสม ได้แก่ลูกผสมจากทรอปิคอลกับพิชตาเช และลูกผสมจากพิชตาเชกับแชมเปี้ยนพิงค์ ส่วนการทดสอบด้วยเทคนิคทางโครโมโซมนั้นข้อมูลที่ได้ยังไม่ชัดเจน เนื่องจากพบว่าเซลล์มีการแตกและโครโมโซมกระจัดกระจายมาก ทำให้ไม่สามารถสรุปการทดลองได้ อย่างไรก็ตาม ผลการวิจัยที่ได้ ยังไม่ได้ดำเนินการชักนำ โปรโตพลาสต์ให้พัฒนาเป็นพืชที่สมบูรณ์ได้ ซึ่งเป็นอีกขั้นตอนหนึ่งที่สำคัญและมีความจำเป็นต้องทำการศึกษาเพิ่มเติม เพื่อที่จะได้ต้นพืชที่สมบูรณ์จากการหลอมรวม โปรโตพลาสต์นำไปใช้พัฒนาลูกผสมที่ได้ต่อไป
บทคัดย่อ (EN): The followings were the research conducted to generate of Anthuriums by protoplast fusion for hybrid production. Isolation of young leaf protoplast from Anthurium cv Tropical and Pitache using various isolation methods and enzyme concentration showed that the combination of 5% cellulase with 5% hemicellulase and 5% pectinase gave the highest yield of Tropical and Pitache protoplasts, 42.53x104 and 37.93x104 protoplasts per ml, respectively. The viability of protoplasts was determined by dye testing. The highest viability yields of protoplasts were obtained when 4% cellulase, 4% hemicellulase and 4% pectinase were used for both Tropical and Pitache. About 93.72% and 92.27% could be obtained from Tropical and Pitache respectively. The best period of time for incubation with the enzyme is 8 hours and mannitol 0.8 molar for separate protoplast. Culture of protoplast in liquid medium resulted in the highest yield and percentage of cell division were observed when using MS with 2,4-D and Kinetin in combination with BA at 1 mg per liter, 3% glucose for 4 weeks and medium for Tropical and Pitache were MS and ? MS respectively. Young leaves of Anthurium cv Angle and Champion pink were stripped and digested enzymatically. Isolated protoplasts were cultured in various plant growth regulators-containing media. Protoplast fusion between of various Anthurium was induced using different concentrations of polyethyleneglycol (PEG 8000) (0, 10, 20, 30 and 40 w/v) and induction periods (10, 20 and 30 min). It was found that 40% w/v with 30 min of induction periods was the most proper combination for induction of because of high percentage of binary fusion and low percentage of multi fusion (27 and 9%, respectively). Protoplasts of Anthurium were electrofused using an alternating current (AC field) of 150 V/cm followed by pulse of 1500 V/cm direct current (DC) field. The hybridization produced high percentage of binary fusion and low percentage of multi fusion (25 and 9%, respectively). Four interspecific hybridizations of inter or intra section of Anthurium were made. Three crosses hybridization by chemical induced and two crosses hybridization by electrofused showed good compatibility. Parents and hybrids of crosses were analyzed by RAPD using 10 decamer primers and the number of primers generating polymorphic patterns of each cross varied. RAPD markers were able to differentiate parents in inter- and intra- sectional crosses and these markers could confirm the interspecific hybrids. In this research, chromosome technique found impossible for identification of intersectional crosses from protoplast Anthurium. However, regeneration from protoplasts into complete plants which is a crucial step was still unsuccessful, necessitating additional work to be able to fully exploit the protoplast fusion for developing useful hybrids in the future.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน
คำสำคัญ: การหลอมรวมโปรโตพลาสต์
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ปิยนันท์ ชมนาวัง. "การวิจัยและพัฒนาพันธุ์หน้าวัวด้วยเทคนิคการหลอมรวมโปรโตพลาสต์Anthurium Improvement for High Yield by Protoplast Fusion Technique". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน. 2557

ปิยนันท์ ชมนาวัง. "การวิจัยและพัฒนาพันธุ์หน้าวัวด้วยเทคนิคการหลอมรวมโปรโตพลาสต์Anthurium Improvement for High Yield by Protoplast Fusion Technique". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน. 2557. Print.



TARR Wordcloud:
การวิจัยและพัฒนาพันธุ์หน้าวัวด้วยเทคนิคการหลอมรวมโปรโตพลาสต์
ปิยนันท์ ชมนาวัง
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลอีสาน
30 กันยายน 2557
การวิจัยและพัฒนาการปรับปรุงพันธุ์ไหมให้เหมาะสมกับสภาพพื้นที่ภาคต่างๆ ของประเทศไทย การวิจัยและพัฒนาพันธุ์ข้าวสาลี การวิจัยและพัฒนาเพื่อการปรับปรุงพันธุ์อ้อย การวิจัยและพัฒนาเครื่องหยอดเมล็ดพันธุ์ข้าว โครงการวิจัยและพัฒนาการปรับปรุงพันธุ์ดาหลา โครงการวิจัยและพัฒนาหน้าวัว การวิจัยและพัฒนาผลิตภัณฑ์เครื่องดื่มน้ำข้าวกล้อง การวิจัยและพัฒนาผลิตภัณฑ์ขนมกรอบจากข้าวกล้อง การวิจัยและพัฒนาการจัดการแมลงบั่ว การวิจัยและพัฒนาการผลิตบรรจุภัณฑ์อาหารจากเปลือกทุเรียน
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair