สืบค้นงานวิจัย
โครงการวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อปรับปรุงพันธุ์และขยายพันธุ์
อำไพ สินพัฒนานนท์ - กรมวิชาการเกษตร
ชื่อเรื่อง: โครงการวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อปรับปรุงพันธุ์และขยายพันธุ์
ชื่อเรื่อง (EN): In vitro Culture Technique for Micropropagation and Breeding
บทคัดย่อ: กระทือกำลังได้รับความนิยมเป็นไม้ตัดดอก ขยายพันธุ์โดยวิธีแยกหน่อ ทำให้ขยายพันธุ์ได้ช้าและมีความหลากหลายน้อย การศึกษาการขยายพันธุ์กระทือโดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อด้วยระบบเทมโพรารีไบโอรีแอคเตอร์ จะสามารถขยายพันธุ์กระทือได้เป็นจำนวนมากเชิงพาณิชย์ และเพิ่มฐานพันธุกรรมโดยใช้รังสีแกมมาสร้างต้นกระทือกลายพันธุ์ ดำเนินการศึกษาการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อกระทือ พบว่า ตาจากลำต้นเทียมของกระทือ Zingiber zerumbet Smith และกระทือพิลาส Zingiber spectabile Griff. สามารถเจริญเติบโตเป็นยอดและรากได้บนอาหารสูตร MS ที่เติมและไม่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโตทุกสูตรที่ศึกษา ได้ศึกษาการเพาะเลี้ยงด้วยระบบเทมโพรารีไบโอรีแอคเตอร์ โดยมีระยะเวลาของการให้อาหารเหลว 6 ระดับ และจำนวนครั้งในการให้ 2 ระดับ ชิ้นส่วนกระทือมีการเจริญเติบโตในทุกสิ่งทดลอง แต่ไม่สามารถวิเคราะห์ผลทางสถิติได้เนื่องจากเกิดข้อมูลเสียหาย เมื่อย้ายออกปลูกลงดิน มีอัตราการรอดชีวิตสูงถึง 89.74 – 100 เปอร์เซ็นต์ ต้นแข็งแรงสมบูรณ์ ส่วนการชักนำให้กระทือที่เพาะเลี้ยงเกิดการกลายพันธุ์ด้วยรังสีแกมมาแบบเรื้อรังและแบบเฉียบพลัน พบกระทือที่ได้รับรังสีเกิดลักษณะผิดไปจากปกติหลายลักษณะ ตรวจสอบการกลายพันธุ์ระดับพลอยดิด้วยเครื่องโฟลไซโทรมิเตอร์ และตรวจสอบการกลายพันธุ์ระดับดิพลอยด์ด้วยวิธีทางชีวโมเลกุล พบว่ากระทือพิลาสได้รับรังสีแกมมาแบบเรื้อรัง 5 Krad ที่เกิดใบบิดลายเป็นต้นกลายพันธุ์ โดยให้รูปแบบแถบดีเอ็นเอแตกต่างกับกระทือปกติ เมื่อใช้ไพรเมอร์ชนิด RAPD ที่มีลำดับเบส 5 AGACGGCTCC 3 ศึกษาการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อยางพารา และศึกษาเทคนิคการปลูกถ่ายยีน เพื่อใช้เป็นแนวทางในการสร้างยางพาราดัดแปลงพันธุ์ พบว่า อาหารสูตร MSm1 เติม NAA ความเข้มข้น 1.0 -1.5 มิลลิกรัมต่อลิตร สามารถเพาะเลี้ยงอับละอองเกสรได้ดีและเมื่อเพิ่มความเข้มข้นของ NAA เป็น 2.0 มิลลิกรัมต่อลิตร แคลลัสที่ได้มีคุณภาพดีขึ้นแต่ปริมาณการสร้างแคลลัสลดลง จากการตัดข้อของต้นกล้ายางที่เพาะเมล็ดในหลอดทดลองมาเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MH เติม GA3 ความเข้มข้น 10 มิลลิกรัมต่อลิตร ร่วมด้วย BA ความเข้มข้น 1 มิลลิกรัมต่อลิตร และ NAA ความเข้มข้น 0.50 มิลลิกรัมต่อลิตรที่มีความเป็นกรดด่างของอาหาร 5.8 เป็นเวลา 8 สัปดาห์ มีการเกิดยอดของชิ้นส่วนพืชเฉลี่ยสูงสุด จำนวนการสร้างยอดเฉลี่ยสูงสุด ความยาวยอดเฉลี่ยสูงสุด และอาหารที่มีค่าความเป็นกรดด่าง 6.5 มีขนาดยอดเฉลี่ยสูงสุด การถ่ายฝากยีนเข้าสู่เนื้อเยื่อเปลือกหุ้มเมล็ดชั้นในของยางพันธุ์ RRIM600 โดยใช้ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่มีพลาสมิด pCAM1304 ซึ่งมียีน gus เป็นยีนรายงานผล พบว่าการใช้ความเข้มข้นของเชื้อ OD600 = 0.6 และปลูกเชื้อนาน 1 วินาที ให้ประสิทธิภาพของการถ่ายยีนสูงที่สุด ระยะเวลาในการเลี้ยงร่วมกับ Agrobacterium tumefaciens ที่เหมาะสม คือ 3-5 วัน การกำจัดเชื้อ Agrobacterium tumefaciens บนอาหารที่เติม Cefotaxime 200-400 มิลลิกรัมต่อลิตรสามารถกำจัดเชื้อได้ดี ความเข้มข้นของ Kanamycin ที่เหมาะสมสำหรับการนำไปใช้คัดเลือกแคลลัสภายหลังการถ่ายยีน คือ 150 มิลลิกรัมต่อลิตร
บทคัดย่อ (EN): Kratur” has recently become popular for the use as cut flowers because the inflorescence formed by bracts has unique shape and nice color. Division of clumps or pieces of the rhizome is the cause of slow propagation and few varieties. Study on tissue culture using temporary bioreactor system and mutation induction by gamma irradiation help to increase large-scale micropropagation and germplasms. Bud explants from psuedostems of Zingiber zerumbet Smith and Zingiber spectabile Griff. induced shoots and roots when cultured on every studied media MS supplemented with/without plant growth regurators . After proliferation, study on temporary bioreactors taken with 6 level of the liquid feeding durations and 2 level of the number of times. The growth of plantlets occur in any treatment. But can not analized with statistic because of some missing data. Plantlets transferred directly from bioreactors to soil showed 89.74 – 100% survival. The plants were healthy. On the other, gamma ray with tissue culture technique can induce mutation. Zingiber spectabile Griff. treated with 5.12 Krad cronic irradiation showed different morphological characteristics. The expected mutation plantlets were checked ploidy level with Flow cytometer and detected diploid level mutation with molecular biology technique using 16 primers from RAPD and ISSR of Zingiber officinale. The result, plantlet with twisted and striped leaves is mutant. The mutant is different in DNA band pattern from non-irradiation plant when nucleotide 5 AGACGGCTCC 3 is used as RAPD primer. Study on tissue culture and gene transfer of rubber to use as a guideline to induce genetically modified rubber. It was found that anther can be cultured well on MSm1 medium suppliments with NAA concentration 1.0-1.5 mg./L. And when the concentration of NAA was 2.0 mg./L, quality of callus increased but callus formation decreased. The nodes of rubber seedlings, from In Vitro seeds, cultured on MH added GA3 10 mg./L, BA 1 mg./L, NAA 0.50 mg./L and pH of medium 5.8 for 8 weeks resulted the highest averate number of shoots per explant, amount of shoots and shoot length. And medium with pH 6.5 found the highest of shoot size. Gene transfer into the tissue of the inner rubber seed coat variety RRIM600 using Agrobacterium tumefaciens species EHA105 with a pCAM1304 plasmid which is gene Gus as reporter genes. We found that the concentration of bacteria OD600 = 0.6 and inoculation for 1 seconds showed the highest of the efficiency of gene transfer. The proper culture period with Agrobacterium tumefaciens is 3-5 days. Agrobacterium tumefaciens on medium added Cefotaxime 200-400 mg /L can be get rid well. The suitable concentration of Kanamycin for applying to a selection of callus after gene transformation is 150 mg /L.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: กรมวิชาการเกษตร
คำสำคัญ: การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
โครงการวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อปรับปรุงพันธุ์และขยายพันธุ์
กรมวิชาการเกษตร
30 กันยายน 2558
การขยายพันธุ์หนอนตายหยากด้วยวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ปรับปรุงพันธุ์แก่นตะวันเพื่อความต้านทานโรคโคนเน่า เปรียบเทียบการเจริญเติบโตและการให้ผลผลิตของปาล์มน้ำมันที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ 6 สายพันธุ์ ในช่วงอายุปีที่ 3 – 4 ปี โครงการวิจัยและปรับปรุงพันธุ์มะม่วง การขยายพันธุ์เนียมหอม (Strobilanthes nivea) ด้วยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การขยายพันธุ์สบู่ดำ : การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การศึกษาการขยายพันธุ์ต้นศรีทอง (Sapium sebiferum Roxb.) ด้วยวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ โครงการวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีการจัดการหลังการเก็บเกี่ยวเงาะผลสด โครงการวิจัยและพัฒนาเทคโนโลยีหลังการเก็บเกี่ยวสละ การขยายพันธุ์กล้วยไม้ป่าบางชนิดโดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก