สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาชุดไพรเมอร์เพื่อการตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR ควบคู่กับ High-resolution melting analysis
วรศักดิ์ แก้วก่อง - มหาวิทยาลัยนเรศวร
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาชุดไพรเมอร์เพื่อการตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR ควบคู่กับ High-resolution melting analysis
ชื่อเรื่อง (EN): Development of primer set for differential detection of avian tubercutiosis in duck using multiplex real-time PCR coupling with high-resolution melting analysis
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: วรศักดิ์ แก้วก่อง
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Worasak Kaewkong
บทคัดย่อ: การตรวจพบการติดเชื้อในสิ่งส่งตรวจจากสัตว์ โดยเฉพาะสัตว์เศรษฐกิจในพื้นที่ภาคเหนือตอนล่างเป็นปัญหาสำคัญและส่งผลต่อการมีชีวิตของสัตว์ คุณภาพของผลิตภัณฑ์จากสัตว์ ส่งผลกระทบในวงกว้างต่อระบบเศรษฐกิจทั้งการปศุสัตว์และคุณภาพชีวิตของเกษตรกรผู้เลี้ยง การสำรวจข้อมูลโรคติตเชื้อต่างๆ เช่น เชื้อแบคทีเรีย เชื้อปรสิต หรือเชื้อไวรัส ไม่ว่าจะเป็นข้อมูลชนิดของเชื้อ อุบัติการณ์ ระบาดวิทยา หรือข้อมูลพื้นฐานทางปศุสัตว์จึงมีความสำคัญในการศึกษาวิจัยเพื่อแก้ปัญหาดังกล่าว โดยความร่วมมือของผู้วิจัยทั้งทางชีวเคมีและชีววิทยาโมเลกุล ทางจุลชีววิทยาและปรสิตวิทยา และศูนย์วิจัยและพัฒนาการสัตวแพทย์ (ศวพ.) ภาคเหนือตอนล่าง จ.พิษณุโลก นำโดยผู้อำนวยการศูนย์วิจัย สัตวแพทย์หญิง ดร.จันทร์เพ็ญ ชำนาญพูด และคณะ ซึ่งประกอบไปด้วยนายสัตวแพทย์ชำนาญการด้านการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ รวมถึงบุคลากรในสังกัดโดยเฉพาะนักวิทยาศาสตร์การแพทย์ในห้องปฏิบัติการอณูชีววิทยา ได้ตระหนักถึงปัญหาที่เกิดขึ้น โจทย์วิจัยที่สำคัญในพื้นที่ และร่วมปรึกษาหารือเพื่อวิเคราะห์หาแนวทางในการแก้ไขปัญหาที่เกิดขึ้น โดยในเบื้องต้นพบว่าปัญหาของโรคติดเชื้อที่สำคัญ ได้แก่ การติดเชื้อแบคทีเรีย (Buikholderia pseudomallei สาเหตุของโรคเมลิออโดซิส และ Microbocterium spp. โดยเฉพาะ M. avium ในเป็ด สาเหตุของโรควัณโรคในเป็ด ซึ่งเป็นอุบัติการณ์ใหม่ที่น่าสนใจ) การติดเชื้อปรสิต (Trypanosoma spp., Anaplasme spp. และ Babesia spp. โดยเฉพาะในกลุ่มโคนม ซึ่งพบได้บ่อยครั้งที่มีการตรวจหาการติดเชื้อประจำปีของสถานีวิจัยทดสอบพันธุ์สัตว์พิษณุโลก ตากและนครสวรรค์ หรือ Fosciola spp. ในโค กระบือ) และการติดเชื้อไวรัส (FMD vius สาเหตุของโรคปากเท้าเปื่อย โดยเฉพาะในโค) ซึ่งจำเป็นจะต้องมีการพัฒนาเทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุลในการตรวจหาหรือตรวจคัดแยกการติดเชื้อ เนื่องจากปัญหาทางด้านระบาดวิทยาที่ทำให้การแพร่กระจายของเชื้อที่รวดเร็วและมีโฮสต์ที่สามารถป็นเจ้าบัานให้กับเชื้อต่างๆได้หลากหลายมากขึ้น นำไปสู่ความรุนแรงของโรค การแพร่กระจายไปในวงกว้างทั้งในกลุ่มสัตว์ด้วยกันเองหรือเกษตรกรผู้เลี้ยง อีกทั้ง วิธีมาตรฐานหรือการตรวจยืนยันที่ใช้ในห้องปฏิบัติการ เช่น การย้อมสีดูให้กล้องจุลทรรศน์ การเพาะเลี้ยงเชื้อ หรือแม้กระทั่งเทคนิคทางภูมิคุ้มกันวิทยาเองก็ตาม ก็ยังมีให้ค่าผลบวกและ/หรือลบปลอมได้ ทำให้ค่าความไวและความจำเพาะของการตรวจคัดแยกเชื้อต่ำ ใช้เวลานาน และจำเป็นต้องใช้บุคลากรผู้มีความเชี่ยวชาญเป็นอย่างสูงในการตรวจวินิจฉัยและรายงานผล ในการศึกษาวิจัยครั้งนี้ จึงมีจุดประสงค์ที่จะพัฒนาและประยุกต์ใช้เทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุลในการตรวจคัดแยกความจำเพาะของการติดเชื้อที่สำคัญ เพื่อเพิ่มความไวและความจำเพาะ ลดระยะเวลาและตันทุน โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่เป็นการลงพื้นที่สำรวจและคัดกรองการติดเชื้อในกลุ่มตัวอย่างปริมาณมากเนื่องจากทาง ศวพ. เอง นอกเหนือจากสิ่งส่งตรวจจากฟาร์ม จากเกษตรกร หรือ จากเจ้าของสัตว์แล้ว ก็ยังมีพันธกิจในการตรวจคัดกรองการติดเชื้อที่สำคัญในสถานีวิจัยทดสอบพันธุ์สัตว์ ในพื้นที่ภาคเหนือตอนล่างอีกด้วย ดังนั้น ทั้งผู้วิจัยและ ศวพ. เองจึงมีความคาดหวังว่าผลงานวิจัยนี้จะเกิดประโยชน์และสามารถนำไปพัฒนาและประยุกต์ใช้ได้จริงในอนาคต
บทคัดย่อ (EN): Two main animal pathogenic subspecies of Mycobacterium avium are M. avium avium (Maa) and M. avium paratuberculosis (Map), Their pathogenicity is host-specific, Maa causing avian tuberculosis in poultry whereas Map commonly cross-infects to ruminant. Veterinary diagnosis of M. avium infections is microscopic examination of acid-fast bacilli or culture in Lowenstein-Jensen medium, which are time-consuming and low sensitivity. This present study aimed to apply real-time PCR coupled with high-resolution metting (HRM) analysis for differential detection of Maa in Thai domestic ducks. Specific primer targeting host-expression dependent (hed) region was designed, PCR product of Maa were amplified from duck's tissue lesions whereas Map were amplified from cow and deer. HRM real-time PCR was performed and analyzed. Different HRM patterns were showed and metting temperature were analyzed at 83.26t0.12*C for Maa and 84.04-0.09*C for Map. This technique can detect as few as 102 DNA copies and present high specificity by negative amplification of other pathogenic bacterial species. This technique is sensitive, specific, rapid and does not require fluorescent probes or post-PCR electrophoresis. Our technique is a possible new toot for the detection of Maa and Map infection in tissue specimens.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://nuir.lib.nu.ac.th/dspace/bitstream/123456789/3968/1/WorasakKaewkong.pdf
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยนเรศวร
คำสำคัญ: เป็ด
คำสำคัญ (EN): duck
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยนเรศวร
รายละเอียด: 1) เพื่อพัฒนาชุดไพรเมอร์ที่สามารถตรวจหาและจำเพาะต่อการระบุชนิดของเชื้อวัณโรค Mycobecterim avium ในระดับสับสปีชีส์ในตัวอย่างรอยโรคจากอวัยวะต่างๆของเป็ด 2) เพื่อพัฒนาชุดไพรเมอร์ที่สามารถตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดที่สามารถประยุกต์ใช้ได้ในห้องปฏิบัติการจริง การตรวจภาคสนามและการออกสำรวจในพื้นที่สถานีบำรุงพันธุ์สัตว์ภาคเหนือตอนล่างและภาคกลางตอนบน
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

วรศักดิ์ แก้วก่อง. "การพัฒนาชุดไพรเมอร์เพื่อการตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR ควบคู่กับ High-resolution melting analysisDevelopment of primer set for differential detection of avian tubercutiosis in duck using multiplex real-time PCR coupling with high-resolution melting analysis". มหาวิทยาลัยนเรศวร. 2559

วรศักดิ์ แก้วก่อง. "การพัฒนาชุดไพรเมอร์เพื่อการตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR ควบคู่กับ High-resolution melting analysisDevelopment of primer set for differential detection of avian tubercutiosis in duck using multiplex real-time PCR coupling with high-resolution melting analysis". มหาวิทยาลัยนเรศวร. 2559. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาชุดไพรเมอร์เพื่อการตรวจคัดแยกการติดเชื้อวัณโรคในเป็ดด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR ควบคู่กับ High-resolution melting analysis
วรศักดิ์ แก้วก่อง
มหาวิทยาลัยนเรศวร
30 กันยายน 2559
ปัจจัยที่มีผลต่อการพัฒนาข้าราชการกรมประมง การพัฒนาชุดทดสอบเพื่อวินิจฉัยสภาวะการติดเชื้อเลปโตสไปร่าและ serovars ที่เป็นสาเหตุของการติดเชื้อในปศุสัตว์ การพัฒนาชุดทดสอบ Multiplex PCR สำหรับจำแนกชนิดเชื้อ Mycobacterium bovis และ Mycobacterium tuberculosis การเจริญของเชื้อ Macrophomina phaseolina ในส่วนต่าง ๆ ของพืชภายหลังการติดเชื้อของราก การพัฒนา ELISA สำหรับตรวจการติดเชื้อ Actinobacillus pleuropneumoniae โดยใช้รีคอมบิแนนท์โปรตีน Apx IV การตรวจหา Suilysin และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของ เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วย สุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคและคนที่เกี่ยวข้องโดยใช้เทคนิค PCR การพัฒนาเทคนิคการตรวจวินิจฉัยโรค Streptococcosis ในปลาทะเลเศรษฐกิจ ด้วยเทคนิค PCR การใช้เทคนิค PCR ตรวจสอบลักษณะพันธุกรรม Malignant Hyperthermia ในสุกรพันธุ์เปียแตรง โครงการวิจัยและพัฒนาเพื่อแก้ปัญหาโรคใบขาวของอ้อย การพัฒนาวิธีตรวจหาเชื้อ Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis ในสัตว์เคี้ยวเอื้อง ด้วยเทคนิคอณูชีวโมเลกุล
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair