สืบค้นงานวิจัย
การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำ
ประพันธ์ศักดิ์ ศรีษะภูมิ - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำ
ชื่อเรื่อง (EN): Evaluation of Stability and Efficacy of Antibody Egg to Control Luminous Disease in Black Tiger Shrimp
บทคัดย่อ: โรคเรืองแสงในกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) ที่เกิดจากเชื้อ Vibrio harveyi ได้สร้างความเสียหายให้กับการเพาะเลี้ยงกุ้งเป็นอย่างมาก การรักษาโรคดังกล่าวมักใช้ยาปฏิชีวนะในระดับสูง จนทำให้เชื้อโรคดื้อยาและเกิดสารตกค้างในผลิตภัณฑ์ จากการศึกษาของผู้วิจัยก่อนหน้านี้พบว่าการใช้แอนติบอดีที่ผลิตจากไข่ไก่ (IgY) สามารถนำไปใช้ควบคุมเชื้อสาเหตุโรคเรืองแสงได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่การนำแอนติบอดีดังกล่าวไปใช้ในเชิงพาณิชย์ในรูปของอาหารเสริมจำเป็นต้องมีการศึกษาถึงความคงทนของแอนติบอดี จึงเป็นที่มาของวัตถุประสงค์สำหรับงานวิจัยในครั้งนี้ โดยได้ผลิตแอนติบอดีต่อเชื้อ V. harveyi ในไก่ไข่พันธุ์ Roman-Brown จำนวน 12 ตัว ร่วมกับการใช้สารกระตุ้นภูมิคุ้มกัน C-phosphate guanosine oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) เก็บไข่และแยก IgY จากไข่แดงด้วยวิธี dilution method จากนั้นแปรรูปเป็นผงแห้งด้วยวิธี freeze drying ตรวจสอบไตเตอร์ด้วยวิธี ELISA ผลการศึกษาพบว่า IgY ที่แยกได้มีความเข้มข้น 9.8 มิลลิกรัมต่อไข่แดง 1 มิลลิลิตร โดยมีค่าความบริสุทธิ์และแอนติบอดีที่จำเพาะเท่ากับ 34.2% และ 12.2% ตามลำดับ การตรวจสอบประสิทธิภาพของ IgY ทำโดยวิธี ELISA และทดสอบความสามารถในการยับยั้งเชื้อ V. harveyi บนอาหาร TCBS ในการศึกษาสภาพการเก็บรักษาแอนติบอดีผงที่อุณหภูมิ -20, 4, 28 และอุณหภูมิห้อง พบว่า อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเก็บรักษา IgY คือ -20?C และเมื่อนำตัวอย่างแอนติบอดีผงจากแต่ละกลุ่มมาทดสอบประสิทธิภาพการยับยั้งเชื้อ V. harveyi ในหลอดทดลอง พบว่าแอนติบอดีที่เก็บรักษาที่ -20 องศาเซลเซียส ยังคงมีประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรียได้สูงที่สุด การประเมินความคงทนของ IgY ในสภาพต่างๆ ได้แก่ ความเป็นกรด-ด่าง อุณหภูมิ และความคงทนต่อเอนไซม์ พบว่า IgY จะเสื่อมสภาพในสภาวะกรดจัดหรือด่างจัด แต่จะค่อนข้างคงตัวที่ความเป็นกรด-ด่างระหว่าง 6 ถึง 8 โดยมี % IgY activity เหลือมากกว่า 88% หลังจากเวลาผ่านไป 4 ชั่วโมง การทดสอบความคงทนของแอนติบอดีผงที่อุณหภูมิสูง 60, 70 และ 80 องศาเซลเซียส พบว่าแอนติบอดีไม่สามารถทนสภาวะที่อุณหภูมิสูงถึง 70 องศาเซลเซียสหรือมากกว่าได้ โดยเมื่อได้รับอุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียส นาน 30 นาที หรือ 80 องศาเซลเซียส นาน 2 นาที จะทำให้ % IgY activity ลดลงเหลือประมาณ 60% และ 45% ตามลำดับ อย่างไรก็ตามพบว่า การเติมน้ำตาล sorbitol เข้มข้น 30% ในสารละลายแอนติบอดีจะช่วยเพิ่มความคงทนได้อย่างมีนัยสำคัญยิ่งทางสถิติ (P<0.01) การศึกษาประสิทธิภาพของแอนติบอดีผงที่บ่มในสารละลาย simulated gastric fluid (SGF) ที่เติมเอนไซม์เปปซิน และ Simulated intestinal fluid (SIF) ที่เติมเอนไซม์ทริปซินนาน 4 ชั่วโมง พบว่าแอนติบอดียังคงมี % IgY activity เหลือเท่ากับ 9% และ 94% ตามลำดับ โรคเรืองแสงในกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) ที่เกิดจากเชื้อ Vibrio harveyi ได้สร้างความเสียหายให้กับการเพาะเลี้ยงกุ้งเป็นอย่างมาก การรักษาโรคดังกล่าวมักใช้ยาปฏิชีวนะในระดับสูง จนทำให้เชื้อโรคดื้อยาและเกิดสารตกค้างในผลิตภัณฑ์ จากการศึกษาของผู้วิจัยก่อนหน้านี้พบว่าการใช้แอนติบอดีที่ผลิตจากไข่ไก่ (IgY) สามารถนำไปใช้ควบคุมเชื้อสาเหตุโรคเรืองแสงได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่การนำแอนติบอดีดังกล่าวไปใช้ในเชิงพาณิชย์ในรูปของอาหารเสริมจำเป็นต้องมีการศึกษาถึงความคงทนของแอนติบอดี จึงเป็นที่มาของวัตถุประสงค์สำหรับงานวิจัยในครั้งนี้ โดยได้ผลิตแอนติบอดีต่อเชื้อ V. harveyi ในไก่ไข่พันธุ์ Roman-Brown จำนวน 12 ตัว ร่วมกับการใช้สารกระตุ้นภูมิคุ้มกัน C-phosphate guanosine oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) เก็บไข่และแยก IgY จากไข่แดงด้วยวิธี dilution method จากนั้นแปรรูปเป็นผงแห้งด้วยวิธี freeze drying ตรวจสอบไตเตอร์ด้วยวิธี ELISA ผลการศึกษาพบว่า IgY ที่แยกได้มีความเข้มข้น 9.8 มิลลิกรัมต่อไข่แดง 1 มิลลิลิตร โดยมีค่าความบริสุทธิ์และแอนติบอดีที่จำเพาะเท่ากับ 34.2% และ 12.2% ตามลำดับ การตรวจสอบประสิทธิภาพของ IgY ทำโดยวิธี ELISA และทดสอบความสามารถในการยับยั้งเชื้อ V. harveyi บนอาหาร TCBS ในการศึกษาสภาพการเก็บรักษาแอนติบอดีผงที่อุณหภูมิ -20, 4, 28 และอุณหภูมิห้อง พบว่า อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเก็บรักษา IgY คือ -20?C และเมื่อนำตัวอย่างแอนติบอดีผงจากแต่ละกลุ่มมาทดสอบประสิทธิภาพการยับยั้งเชื้อ V. harveyi ในหลอดทดลอง พบว่าแอนติบอดีที่เก็บรักษาที่ -20 องศาเซลเซียส ยังคงมีประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรียได้สูงที่สุด การประเมินความคงทนของ IgY ในสภาพต่างๆ ได้แก่ ความเป็นกรด-ด่าง อุณหภูมิ และความคงทนต่อเอนไซม์ พบว่า IgY จะเสื่อมสภาพในสภาวะกรดจัดหรือด่างจัด แต่จะค่อนข้างคงตัวที่ความเป็นกรด-ด่างระหว่าง 6 ถึง 8 โดยมี % IgY activity เหลือมากกว่า 88% หลังจากเวลาผ่านไป 4 ชั่วโมง การทดสอบความคงทนของแอนติบอดีผงที่อุณหภูมิสูง 60, 70 และ 80 องศาเซลเซียส พบว่าแอนติบอดีไม่สามารถทนสภาวะที่อุณหภูมิสูงถึง 70 องศาเซลเซียสหรือมากกว่าได้ โดยเมื่อได้รับอุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียส นาน 30 นาที หรือ 80 องศาเซลเซียส นาน 2 นาที จะทำให้ % IgY activity ลดลงเหลือประมาณ 60% และ 45% ตามลำดับ อย่างไรก็ตามพบว่า การเติมน้ำตาล sorbitol เข้มข้น 30% ในสารละลายแอนติบอดีจะช่วยเพิ่มความคงทนได้อย่างมีนัยสำคัญยิ่งทางสถิติ (P<0.01) การศึกษาประสิทธิภาพของแอนติบอดีผงที่บ่มในสารละลาย simulated gastric fluid (SGF) ที่เติมเอนไซม์เปปซิน และ Simulated intestinal fluid (SIF) ที่เติมเอนไซม์ทริปซินนาน 4 ชั่วโมง พบว่าแอนติบอดียังคงมี % IgY activity เหลือเท่ากับ 9% และ 94% ตามลำดับ
บทคัดย่อ (EN): Luminous disease in black tiger shrimp (Penaeus monodon) is caused by Vibrio harveyi leading to high mortality and large economic losses in cultured shrimp. Due to the widespread use of antibiotics to control the disease, many luminescent Vibrios have become resistant, thereby making antibiotic treatments ineffective and leaving residual effect in shrimp products. In our previous research, passive immunization using chicken anti-V. harveyi antibodies (IgY) was proved to be a promising approach to control the infection. However, the stability of the egg yolk immunoglobulin for commercial application as feed additive needed to be evaluated further, which is the objective of this study. The specific antibody was raised in twelve Roman-Brown laying hens by immunising with glutaraldehyde-killed V. harveyi and C-phosphate guanosine oligodeoxynucleotide (CpG-ODN). The latter was added to enhance the specific antibody production. Eggs had been collected and IgY was extracted from egg yolk by water dilution method then freeze-dried. The concentration of IgY was approximately 9.8 mg/ml of egg yolk with 34.2% purity and 12.2% specific IgY. The specific activity of the antibodies was determined by ELISA and the in vitro neutralization test on TCBS agar. Study on storage temperature at -20, 4, 28?C and room temperature showed that the best storage temperature was -20?C where the highest neutralization activity still remained. The stability of IgY in various conditions including pH, temperature, effect of proteolytic enzymes to IgY activity were investigated. The results indicated that IgY was quite stable at pH 6 to 8 and more than 88% activity could be observed after 4 h incubation. Comparison of the high temperature treatment for spray-drying at 60, 70 and 80?C demonstrated that the temperature higher than 70?C significantly affected IgY activity. The IgY acitvity was significantly (P<0.01) decreased to 60% and 45% after incubation at 70?C for 30 min or 80?C for 2 min. However, the presence of 30% sorbitol in the antibody preparation effectively enhanced IgY stability. The behavior of IgY in Simulated gastric fluid (SGF) with pepsin and Simulated intestinal fluid (SIF) with trypsin were also examined and the result showed that after 4h incubation, the activity of IgY remained at 9 and 94% for the mixtures with pepsin and trypsin, respecti Luminous disease in black tiger shrimp (Penaeus monodon) is caused by Vibrio harveyi leading to high mortality and large economic losses in cultured shrimp. Due to the widespread use of antibiotics to control the disease, many luminescent Vibrios have become resistant, thereby making antibiotic treatments ineffective and leaving residual effect in shrimp products. In our previous research, passive immunization using chicken anti-V. harveyi antibodies (IgY) was proved to be a promising approach to control the infection. However, the stability of the egg yolk immunoglobulin for commercial application as feed additive needed to be evaluated further, which is the objective of this study. The specific antibody was raised in twelve Roman-Brown laying hens by immunising with glutaraldehyde-killed V. harveyi and C-phosphate guanosine oligodeoxynucleotide (CpG-ODN). The latter was added to enhance the specific antibody production. Eggs had been collected and IgY was extracted from egg yolk by water dilution method then freeze-dried. The concentration of IgY was approximately 9.8 mg/ml of egg yolk with 34.2% purity and 12.2% specific IgY. The specific activity of the antibodies was determined by ELISA and the in vitro neutralization test on TCBS agar. Study on storage temperature at -20, 4, 28?C and room temperature showed that the best storage temperature was -20?C where the highest neutralization activity still remained. The stability of IgY in various conditions including pH, temperature, effect of proteolytic enzymes to IgY activity were investigated. The results indicated that IgY was quite stable at pH 6 to 8 and more than 88% activity could be observed after 4 h incubation. Comparison of the high temperature treatment for spray-drying at 60, 70 and 80?C demonstrated that the temperature higher than 70?C significantly affected IgY activity. The IgY acitvity was significantly (P<0.01) decreased to 60% and 45% after incubation at 70?C for 30 min or 80?C for 2 min. However, the presence of 30% sorbitol in the antibody preparation effectively enhanced IgY stability. The behavior of IgY in Simulated gastric fluid (SGF) with pepsin and Simulated intestinal fluid (SIF) with trypsin were also examined and the result showed that after 4h incubation, the activity of IgY remained at 9 and 94% for the mixtures with pepsin and trypsin, respecti
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: ไข่
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ประพันธ์ศักดิ์ ศรีษะภูมิ. "การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำEvaluation of Stability and Efficacy of Antibody Egg to Control Luminous Disease in Black Tiger Shrimp". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2551

ประพันธ์ศักดิ์ ศรีษะภูมิ. "การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำEvaluation of Stability and Efficacy of Antibody Egg to Control Luminous Disease in Black Tiger Shrimp". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2551. Print.



TARR Wordcloud:
การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำ
ประพันธ์ศักดิ์ ศรีษะภูมิ
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2551
การพัฒนากระบวนการผลิตแอนติบอดีชนิด IgY จากไข่ไก่เพื่อต้านทาน โรค PED ในสุกร การถ่ายทอดเทคโนโลยีการป้องกันและการควบคุมโรคในการเลี้ยงปลานิล การศึกษาคุณสมบัติของไข่ปฏิสนธิและตัวอ่อนกุ้งกุลาดำที่มีโครโมโซม 3 ชุด (3n/ triploid eggs and embryos) เพื่อนำไปสู่การพัฒนาสร้างเครื่องมือแยกไข่กุ้ง 3n การพัฒนาชุดทดสอบชนิดแถบโดยใช้โพรบ Colloidal Gold ติดแอนติบอดีไข่แดงสำหรับตรวจหาไซเปอร์มีทรินในผักสด น้ำผัก และน้ำผลไม้ การประเมินความต้านทานโรคและการควบคุมโรคสำคัญของมะเขือเทศผลโต ประสิทธิภาพของเชื้อราไตรโคเดอร์มาชนิดสดต่อการควบคุมโรคเมล็ดด่างของข้าวในระบบอินทรีย์ กรรมวิธีทางอณูชีววิทยาเพื่อการกระตุ้นการพัฒนารังไข่และวางไข่ในแม่พันธุ์กุ้งกุลาดำเลี้ยง ประสิทธิภาพของสารสกัดจากพืชในการควบคุมโรคที่เกิดจากเชื้อรา Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp. ในถั่วพุ่มพันธุ์ มมส.1 การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ เชื้อก่อโรคในปูไข่ดอง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair