สืบค้นงานวิจัย
ความหลากหลายของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสการผลิตและคุณสมบัติของเอนไซม์เซลลูเลส
นงพงา คุณจักร - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
ชื่อเรื่อง: ความหลากหลายของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสการผลิตและคุณสมบัติของเอนไซม์เซลลูเลส
ชื่อเรื่อง (EN): Biodiversity of cellulose-producing bacteria, production and characterization of cellulolytic enzymes
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: นงพงา คุณจักร
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): NONGPANGA KHUNAJAKR
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
  1. มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
บทคัดย่อ: งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อคัดแยก และศึกษาเชื้อแบคทีเรียที่สามารถผลิตเอนไซม์เซลลูเลส รวมทั้ง การศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการผลินเอนไซม์เซลลูเลส และศึกษาคุณสมบัติเบื้องตันของเอนไซม์ที่เชื้อสร้างขึ้น โดยจากตัวอย่างทั้งหมด 28 ตัวอย่าง สามารถแยกแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์ย่อยคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส (carboxymethy! cellulose , CMC) ได้จำนวน 47 ไอโซเลต เมื่อทำการจัดกลุ่มแบคทีเรียที่แยกได้นี้ด้วย เทคนิค PCR-RFLP ของ 16S IDNA ร่วมกับลักษณะทางสัญฐานวิทยา สามารถแบ่งได้ 10 กลุ่ม จากการพิสูจน์ เอกลักษณ์ของเชื้อตัวแทนแต่ละกลุ่มโดยการวิเคราะห์ลำดับนิวคลิโอไทด์ของยืน 16S RNA พบว่าเชื้อ 9 ใน 10 กลุ่มนี้อยู่ในสกุล Bacillus โดยสามารถจัดจำแนกได้เป็น Bacillus sp., B. altitudinis, B. cereus, B. amyloliquefaciens, B. (ichenijformis, B. subtilis และ B. thuringiensis ส่วนกลุ่มที่ 10 ถูกจัดจำแนกเป็น Streptornyces thermocoprophilus และเมื่อนำเชื้อที่คัดแยกได้นี้ มาศึกษาความสามารถในการผลิตเอนไซม์ เซลลูเลสทั้ง 4 ชนิด คือเซลลูเลสทั้งหมด เอนโดกลูคาเนส เอกโซกลูคาเนส และเบต้ากลูโคซิเดส พบว่า แบคทีเรียไอโซเลท SB51 มีความสามารถในการผลิตเอนไซม์ทั้ง 4 ชนิดได้ในระดับดีที่สุด โดยเฉพาะเอนไซม์ เซลลูลสทั้งหมด และเอนไซม์เอนโดกลูคาเนส ที่สามารถผลิตได้ 0.1316 + 0.008 และ 0.0045 0.006 ยูนิตต่อมิลลิลิตรตามลำดับ จากการศึกษาสภาวะที่เหมาะสมต่อการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสของเชื้อไอโซเลท SB51 ด้วยวิธี response surface methodology (RSM) โดยใช้หลักการ central composite design (CCD) พบว่าเชื้อผลิตเอนไซม์ได้ดีที่ความเข้มข้นของ CMC ร้อยละ 4 และความเป็นกรด-ด่างของอาหารเลี้ยงเชื้อเท่ากับ 5 yeast extract ที่ร้อยละ 0.5 และอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส โดยให้ค่ากิจกรรมเอนไซม์เซลลูเลสเท่ากับ 0.6565 ยูนิตต่อมิลลิลิตร ที่เวลา 48 ชั่วโมง จากการทำบริสุทธิ์เอนไซม์เซลลูเลสด้วยการตกตะกอนด้วยเกลือ แอมโมเนียนมซัลเฟต และทำบริสุทธิ์ต่อด้วยวิธีโครมาโทกราฟีแบบแลกเปลี่ยนประจุด้วยคอลัมน์ประจุลบ (Anion exchange chromatography) เมื่อทำการหาขนาดของเอนไซม์เซลลูเลสด้วยวิธี SDS - PAGE ร่วมกับ การวิเคราะห์ zymogram พบแถบของเอนไซม์เซลลูเลส 2 ชนิด ที่มีขนาดน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 61 และ 41 กิโลดาลตัน
บทคัดย่อ (EN): The objective of this work is to isolate and study genetic diversity of cellulase producing bacteria. Optimization of cellulase production and partial characterization were also investigated. A total of 47 bacteria isolated from 28 soil and dung samples were found to produce enzyme capable of CMC digestion activity. Classification of 47 cellulase producing bacteria using PCR-RFLP of 16S rDNA analysis and morphological characteristic resulted in 10 different PCR-RFLP patterns. Representative from each group were further identified using 16S rDNA sequence analysis. The results showed that representative isolates from 9 groups were closely related to Bacillus sp., B. altitudinis, B. cereus, B. amyloliquefaciens, B. licheniformis, B. subtilis and B. thuringiensis. Representative isolate from group 10 was identified as Streptomyces thermocoprophilus. The ability to produce four cellulase enzymes including total cellulose, endoglucanase, exoglucanase and betaglucosidase was investigated among the 47 cellulolytic bacterial isolates. The isolates SB51 was shown to produce high levels of all 4 cellulase enzyme especially for total cellulase and endoglucanase (0.1316 + 0.008 and 0.00451 + 0.006 U/mL respectively). Optimum conditions for cellulase enzyme production from isolate SB51 was investigated using Response Surface Methodology (RSM) based on Central Composite Design (CCD) model. Optimum conditions were 4 % CMC, 0.5 % Yeast extract, pH 5, temperatures at 37 ? C and incubation time of 48 h. At this condition, maximum cellulase activity of 0.6565 U/mL was obtained. Partial purification of cellulase enzyme was performed using ammonium sulfate precipitation followed by anion exchange column chromatography. The results from SDS-PAGE coupled with zymogram analysis revealed 2 cellulase enzymes with molecular weigh of 63 and 41 kDa.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
คำสำคัญ: เอนไซม์เซลลูเลส
คำสำคัญ (EN): N/A
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

นงพงา คุณจักร. "ความหลากหลายของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสการผลิตและคุณสมบัติของเอนไซม์เซลลูเลสBiodiversity of cellulose-producing bacteria, production and characterization of cellulolytic enzymes". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2557

นงพงา คุณจักร. "ความหลากหลายของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสการผลิตและคุณสมบัติของเอนไซม์เซลลูเลสBiodiversity of cellulose-producing bacteria, production and characterization of cellulolytic enzymes". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2557. Print.



TARR Wordcloud:
ความหลากหลายของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสการผลิตและคุณสมบัติของเอนไซม์เซลลูเลส
นงพงา คุณจักร
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
30 กันยายน 2557
การผลิต ทำบริสุทธิ์ และศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์กลุ่มเซลลูเลสจากแบคทีเรียในการย่อยสลายวัสดุทางการเกษตร การคัดแยกแบคทีเรียที่สามารถผลิตเอนไซม์เซลลูเลสในการย่อยสลายฟางข้าว การศึกษาประสิทธิภาพในการย่อยเซลลูโลสของแบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์เซลลูเลสและการโคลนยีนเซลลูเลสเข้าสู่ Escherichia coli การตรวจสอบชนิดของแบคทีเรียและการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ เซลลูเลสจากเพรียงเรือที่พบในป่าชายเลนแถบตะวันออกของประเทศไทย การคัดแยกแบคทีเรียที่สามารถผลิตเซลลูเลสจากลำไส้ของแมลงสาบสุรินัม Pycnoscelus surinamensis การแยกและคัดเลือกแบคทีเรียผลิตเอนไซม์เซลลูเลสเพื่อการผลิตเซลูโลซิกเอทานอล การแยกและคัดกรองแบคทีเรียที่สามารถผลิตเอนไซม์เซลลูเลสจากมูลช้าง ม้า แพะ และโคอาลา การศึกษาเพื่อผลิตเอ็นไซม์ผสมกลุ่มเซลลูเลสโดยการเพาะเลี้ยงเชื้อราร่วมกัน การคัดแยกจุลินทรีย์ที่สามารถผลิตเอนไซม์เซลลูเลสจากดิน บริเวณห้วยกุ่ม จ.ชัยภูมิ ศึกษาสมบัติและสภาวะที่เหมาะสมในการผลิตของเอนไซม์อัลคาไลน์โปรติเอส
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair