สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidisที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์
สุดสาย ตรีวานิช - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidisที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์
ชื่อเรื่อง (EN): Development of using DNA-intercalating dye combined with polymerase chain reaction fordetection of viable Salmonella Enteritidis in chicken meat and its products
บทคัดย่อ: เทคนิค RAPD-PCR ที่พัฒนาขึ้นเพื่อตรวจวิเคราะห์ Salmonella Enteritidis ในอาหาร แม้จะทำให้สามารถตรวจผลวิเคราะห์ได้อย่างรวดเร็วโดยมีความไวและความจำเพาะสูง แต่วิธีนี้ยังมีข้อจำกัดคือ ให้ผลบวกทั้งได้กับดีเอ็นเอจากเซลล์ที่มีชีวิตและไม่มีชีวิต การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อ พัฒนาเทคนิค RAPD-PCR ร่วมกับสีย้อมกรดนิวคลีอิกแอซิดคือเอธิเดียม โมโนเอไซด์(Ethidium monoazide;EMA) ในการตรวจแยกดีเอ็นเอจากเซลล์ที่ไม่มีชีวิตออกจากดีเอ็นเอของเซลล์ที่มีชีวิต จากการศึกษาสภาวะในการตรวจสอบเซลล์บริสุทธิ์ของ S. Enteritidis DMST 15676 ในสภาพที่มีชีวิตและไม่มีชีวิตปริมาณ 107 CFU/ml พบว่า สภาวะที่เหมาะสมคือ ปริมาณ EMA เท่ากับ 3 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ระยะเวลาที่ใช้แสงฮาโลเจน 650 W เท่ากับ 15 นาที และระยะห่างของตัวอย่างดีเอ็นเอกับแสงไฟฮาโลเจนเท่ากับ 20 เซ็นติเมตร เทคนิค RAPD-PCRร่วมกับ EMAนี้ สามารถตรวจสอบ S. Enteritidis DMST 15676 ที่ผสมกับแบคทีเรียชนิดอื่นได้แก่ Shigella flexneri, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae หรือ Klebsiella oxytoca ได้ภายใต้สภาวะในหลอดทดลอง นอกจากนี้ เทคนิค RAPD-PCRร่วมกับ EMA ยังสามารถประยุกต์เพื่อใช้ตรวจสอบการปนเปื้อนของ S. Enteritidis ในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ที่ผลิตจากโรงงานอาหารและวางจำหน่ายในตลาดสดและซุปเปอร์มาเก็ต โดยให้ผลการตรวจสอบสอดคล้องกับวิธี MPN หลังการยืนยันด้วยserologเทคนิค RAPD-PCR ที่พัฒนาขึ้นเพื่อตรวจวิเคราะห์ Salmonella Enteritidis ในอาหาร แม้จะทำให้สามารถตรวจผลวิเคราะห์ได้อย่างรวดเร็วโดยมีความไวและความจำเพาะสูง แต่วิธีนี้ยังมีข้อจำกัดคือ ให้ผลบวกทั้งได้กับดีเอ็นเอจากเซลล์ที่มีชีวิตและไม่มีชีวิต การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อ พัฒนาเทคนิค RAPD-PCR ร่วมกับสีย้อมกรดนิวคลีอิกแอซิดคือเอธิเดียม โมโนเอไซด์(Ethidium monoazide;EMA) ในการตรวจแยกดีเอ็นเอจากเซลล์ที่ไม่มีชีวิตออกจากดีเอ็นเอของเซลล์ที่มีชีวิต จากการศึกษาสภาวะในการตรวจสอบเซลล์บริสุทธิ์ของ S. Enteritidis DMST 15676 ในสภาพที่มีชีวิตและไม่มีชีวิตปริมาณ 107 CFU/ml พบว่า สภาวะที่เหมาะสมคือ ปริมาณ EMA เท่ากับ 3 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ระยะเวลาที่ใช้แสงฮาโลเจน 650 W เท่ากับ 15 นาที และระยะห่างของตัวอย่างดีเอ็นเอกับแสงไฟฮาโลเจนเท่ากับ 20 เซ็นติเมตร เทคนิค RAPD-PCRร่วมกับ EMAนี้ สามารถตรวจสอบ S. Enteritidis DMST 15676 ที่ผสมกับแบคทีเรียชนิดอื่นได้แก่ Shigella flexneri, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae หรือ Klebsiella oxytoca ได้ภายใต้สภาวะในหลอดทดลอง นอกจากนี้ เทคนิค RAPD-PCRร่วมกับ EMA ยังสามารถประยุกต์เพื่อใช้ตรวจสอบการปนเปื้อนของ S. Enteritidis ในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ที่ผลิตจากโรงงานอาหารและวางจำหน่ายในตลาดสดและซุปเปอร์มาเก็ต โดยให้ผลการตรวจสอบสอดคล้องกับวิธี MPN หลังการยืนยันด้วยserolog
บทคัดย่อ (EN): The developed RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR was used for the specific detection of Salmonella Enteritidis in foods because of its rapidity and high sensitivity. However, this method cannot distinguish viable cells from dead cells. This study aimed to develop the RAPD-PCR in combination with ethidium monoazide(EMA) for discrimination of viable S. Enteritidis cells from dead cells. Under the study on the pure culture of viable and heat killed S. Enteritidis DMST 15676 at the concentration of 107CFU/ml, the optimized conditions obtained were addition of EMA at concentration of3 ?g/ml, halogen light (650 W) exposure time at 15 min, and 20 cm-light exposure distance between DNA sample and light source. The RAPD-PCR combined with EMA was able to detect the DNA of S. Enteritidis in mixed bacteria (Shigella flexneri, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae or Klebsiella oxytoca) under in vitro experiment. In addition, this technique was proven to be effective as MPN after serology confirmation in specific detection of viable S. Enteritidis contaminated in chicken meat and its product, which were produced by food manufacturing and distributed in local market and supermarket. The developed RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR was used for the specific detection of Salmonella Enteritidis in foods because of its rapidity and high sensitivity. However, this method cannot distinguish viable cells from dead cells. This study aimed to develop the RAPD-PCR in combination with ethidium monoazide(EMA) for discrimination of viable S. Enteritidis cells from dead cells. Under the study on the pure culture of viable and heat killed S. Enteritidis DMST 15676 at the concentration of 107CFU/ml, the optimized conditions obtained were addition of EMA at concentration of3 ?g/ml, halogen light (650 W) exposure time at 15 min, and 20 cm-light exposure distance between DNA sample and light source. The RAPD-PCR combined with EMA was able to detect the DNA of S. Enteritidis in mixed bacteria (Shigella flexneri, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae or Klebsiella oxytoca) under in vitro experiment. In addition, this technique was proven to be effective as MPN after serology confirmation in specific detection of viable S. Enteritidis contaminated in chicken meat and its product, which were produced by food manufacturing and distributed in local market and supermarket.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: เนื้อไก่
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

สุดสาย ตรีวานิช. "การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidisที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์Development of using DNA-intercalating dye combined with polymerase chain reaction fordetection of viable Salmonella Enteritidis in chicken meat and its products". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2552

สุดสาย ตรีวานิช. "การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidisที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์Development of using DNA-intercalating dye combined with polymerase chain reaction fordetection of viable Salmonella Enteritidis in chicken meat and its products". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2552. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidisที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์
สุดสาย ตรีวานิช
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2552
การพัฒนาใช้สีย้อมดีเอ็นเอร่วมกับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสในการตรวจสอบ Salmonella Enteritidis ที่มีชีวิตในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ ผลของสารทดแทนไขมันประเภทใยอาหารต่อคุณภาพผลิตภัณฑ์เนื้อไก่สวรรค์เพื่อการพัฒนาผลิตภัณฑ์สุขภาพจากเนื้อไก่ไข่ปลดระวาง ความชุกของเชื้อซัลโมเนลลาและรูปแบบการดื้อสารต้านจุลชีพของเชื้อที่แยกได้จากเนื้อไก่ในตลาดจังหวัดปทุมธานี ความชุกของเชื้อซัลโมเนลลาและรูปแบบการดื้อสารต้านจุลชีพของเชื้อที่แยกได้จากเนื้อไก่ในตลาดจังหวัดปทุมธานี การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในผลิตภัณฑ์อาหาร การประยุกต์ใช้ไคโตโอลิโกแซคคาไรด์ร่วมกับเอนไซม์ทรานกลูตามิเนสในผลิตภัณฑ์ไส้แฮมเบอร์เกอร์ไก่พร้อมปรุงที่ผลิตจากเนื้อไก่แยกกระดูกด้วยเครื่อง การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในผลิตภัณฑ์อาหาร (ต่อยอดปี 2556) การกำจัดสีย้อมและสารพิษในน้ำทิ้งจากโรงงานอุตสาหกรรมด้วยเอนไซม์ย่อยลิกนินจากเชื้อรา จลนศาสตร์และการตกค้างของดีอ๊อกซีนิวาลินอล และซีราลีโนนในไก่ การลดจำนวนจุลินทรีย์ในเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์โดยการใช้สารอินทรีย์ที่ไม่มีอันตรายทดแทนสารเคมีที่ใช้ฆ่าเชื้อในกระบวนการผลิต (ระยะที่ 1)
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair