สืบค้นงานวิจัย
การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์
Kittipat Sopitthummakhun - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์
ชื่อเรื่อง (EN): Purification and characterization of serine hydroxymethyltransferase from plasmodium vivax
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Kittipat Sopitthummakhun
บทคัดย่อ: การเกิดเชื้อมาลาเรียดื้อยาทำให้มีความจำเป็นอย่างเร่งด่วนในการหาและศึกษาคุณสมบัติของเป้าหมายยา ใหม่ การสังเคราะห์ deoxythimidine monophosphate ซึ่งเป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอใน มาลาเรียอาศัยปฏิกิริยาที่เร่งโดยเอนไซม์ 3 ตัว คือ เอนไซม์ Thymidylate synthase (TS), dihydrofolate reductase (DHFR), และ serine hydroxymethyltransferase (SHMT) ในขณะที่มีการแยกและศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ TS และ DHFR ของเชื้อมาลาเรียอย่างกว้างขวาง แต่ทว่า การศึกษา SHMT ของเชื้อมาลาเรียยังมีไม่มากนัก ในงานวิจัยนี้ ได้ทำการโคลนยีนและเพิ่มจำนวน SHMT ของพลาสโมเดียม ไวแวกซ์ (PvSHMT) ใน Escherichia coli ภายใต้สภาวะกระตุ้นการสร้างโปรตีนโดย ใช้ 1 มิลลิโมลาห์ isopropylthiogalactoside ที่อุณหภูมิ 16 องศาเซลเซียสเป็นเวลาหนึ่งคืน ทำการแยก บริสุทธิ์โปรตีนด้วยวิธีตกตะกอนด้วยเกลือแอมโมเนียมซัลเฟตและวิธีทางโครมาโทกราฟีคือ DEAE- และ SP-Sepharose ซึ่งเมื่อผ่านกระบวนการแยกบริสุทธิ์แล้วได้โปรตีน 60 มิลลิกรัม การวัดแอคติวิตีของ SHMT ใช้วิธี enzyme coupling assay กับเอนไซม์ methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) ภายใต้สภาวะที่ไม่มีออกซิเจนเพื่อให้เตตระไฮโดรโฟเลตมีความเสถียรและหลีกเลี่ยง NADH oxidase แอคติวิ ตีของ MTHFR เอนไซม์ PvSHMT มีลักษณะสเปคตรัมที่มีความยาวคลื่นสูงสุดที่ 424 นาโนเมตร ซึ่งเป็น ลักษณะบ่งชี้ของเอนไซม์ที่มี pyridoxal-5-phosphate ซึ่งอยู่ในรูป internal adimine และมีค่าคงที่ของ การดูดกลืนคลืนแสงที่ความยาวคลื่น 424 นาโนเมตรเท่ากับ 5.16 x 103 โมลาห์-1 ซม.-1 ค่าคงที่ของการจับ ระหว่างเอนไซม์กับซีรีนคือ 0.58 + 0.06 มิลลิโมลาห์ ค่าคงที่ทางจลน์ศาสตร์ Km ของเอนไซม์ต่อซีรีนและเต ตระไฮโดรโฟเลตเท่ากับ 3.55 + 0.3 และ 0.26 + 0.02 มิลลิโมลาห์ ตามลำดับ และค่าคงที่ kcat เมื่อให้ความ เข้มข้นของซีรีนคงที่ที่ 40 มิลลิโมลาห์ เท่ากับ 1.12 วินาที
บทคัดย่อ (EN): 0.02 mM, respectively.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=4939&obj_id=3123
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Thymidine Monophosphate
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: การเกิดเชื้อมาลาเรียดื้อยาทำให้มีความจำเป็นอย่างเร่งด่วนในการหาและศึกษาคุณสมบัติของเป้าหมายยา ใหม่ การสังเคราะห์ deoxythimidine monophosphate ซึ่งเป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอใน มาลาเรียอาศัยปฏิกิริยาที่เร่งโดยเอนไซม์ 3 ตัว คือ เอนไซม์ Thymidylate synthase (TS), dihydrofolate reductase (DHFR), และ serine hydroxymethyltransferase (SHMT) ในขณะที่มีการแยกและศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ TS และ DHFR ของเชื้อมาลาเรียอย่างกว้างขวาง แต่ทว่า การศึกษา SHMT ของเชื้อมาลาเรียยังมีไม่มากนัก ในงานวิจัยนี้ ได้ทำการโคลนยีนและเพิ่มจำนวน SHMT ของพลาสโมเดียม ไวแวกซ์ (PvSHMT) ใน Escherichia coli ภายใต้สภาวะกระตุ้นการสร้างโปรตีนโดย ใช้ 1 มิลลิโมลาห์ isopropylthiogalactoside ที่อุณหภูมิ 16 องศาเซลเซียสเป็นเวลาหนึ่งคืน ทำการแยก บริสุทธิ์โปรตีนด้วยวิธีตกตะกอนด้วยเกลือแอมโมเนียมซัลเฟตและวิธีทางโครมาโทกราฟีคือ DEAE- และ SP-Sepharose ซึ่งเมื่อผ่านกระบวนการแยกบริสุทธิ์แล้วได้โปรตีน 60 มิลลิกรัม การวัดแอคติวิตีของ SHMT ใช้วิธี enzyme coupling assay กับเอนไซม์ methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) ภายใต้สภาวะที่ไม่มีออกซิเจนเพื่อให้เตตระไฮโดรโฟเลตมีความเสถียรและหลีกเลี่ยง NADH oxidase แอคติวิ ตีของ MTHFR เอนไซม์ PvSHMT มีลักษณะสเปคตรัมที่มีความยาวคลื่นสูงสุดที่ 424 นาโนเมตร ซึ่งเป็น ลักษณะบ่งชี้ของเอนไซม์ที่มี pyridoxal-5-phosphate ซึ่งอยู่ในรูป internal adimine และมีค่าคงที่ของ การดูดกลืนคลืนแสงที่ความยาวคลื่น 424 นาโนเมตรเท่ากับ 5.16 x 103 โมลาห์-1 ซม.-1 ค่าคงที่ของการจับ ระหว่างเอนไซม์กับซีรีนคือ 0.58 + 0.06 มิลลิโมลาห์ ค่าคงที่ทางจลน์ศาสตร์ Km ของเอนไซม์ต่อซีรีนและเต ตระไฮโดรโฟเลตเท่ากับ 3.55 + 0.3 และ 0.26 + 0.02 มิลลิโมลาห์ ตามลำดับ และค่าคงที่ kcat เมื่อให้ความ เข้มข้นของซีรีนคงที่ที่ 40 มิลลิโมลาห์ เท่ากับ 1.12 วินาที
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Kittipat Sopitthummakhun. "การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์Purification and characterization of serine hydroxymethyltransferase from plasmodium vivax". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2549

Kittipat Sopitthummakhun. "การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์Purification and characterization of serine hydroxymethyltransferase from plasmodium vivax". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2549. Print.



TARR Wordcloud:
การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์
Kittipat Sopitthummakhun
มหาวิทยาลัยมหิดล
2549
การโคลนและการแสดงออกของยีนออกซิเจนเนสของเอนไซม์พาราไฮดรอกซีฟีนิลอะซิเตตไฮดรอกซีเลส การตกผลึกของเอนไซม์ 2-เมทธิล-3-ไฮดรอกซีไพริดีน-5-คาร์บอกซีลิก แอซิด ออกซีจีเนสจากเชื้อแบคทีเรียในดิน Pseudomonas SP. MA-1 การทำให้เอนไซม์ไคติเนสบริสุทธิ์และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์จากเชื้อ escherichia coli ที่ การผลิตและการทำให้ starch-binding amylase จาก alkaliphilic Bacillus sp. SS-8 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆ ของเอนไซม์บริสุทธิ์ ความเป็นพิษเชิงชีวเคมีของยาขับเหล็ก 1-(เอ็น-อะซิติล-6-อะมิโนเฮกซิล)-3-ไฮดรอกซี-2-เมธิลไพริดิน-4-โอน หาลักษณะเฉพาะของสารยับยั้งอะซีทิลโคลีนเอสเทอเรสจากรากหนอนตายหยากสำหรับสมบัติการต่อต้านแมลงและการรักษาความผิดปกติทาง การเตรียมแคลเซียมออกไซด์บริสุทธิ์สูงจากเปลือกหอยแครงเพื่อการผลิตผงไฮดรอกซีอะพาไทต์ การเตรียมไฮโดรเจลจากการครอสลิงค์เมทิลไฮดรอกซีเอทิลเซลลูโลสร่วมกับกรดมาเลอิกโดยการฉายรังสีแกมมา การผลิตเอนไซม์ Class C [beta]-Lactamase จากพลาสมิดในเชื้อแบคทีเรียกรัมลบ การสังเคราะห์กรดไฮดรอกซีคาร์บอกซิลิกจากน้ำมันละหุ่ง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair