สืบค้นงานวิจัย
การทำให้อัลคาไลน์โปรตีเอสที่ผลิตจาก alkalotolerant Bacillus sp. B12 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆ
พิมล จำนงค์ - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
ชื่อเรื่อง: การทำให้อัลคาไลน์โปรตีเอสที่ผลิตจาก alkalotolerant Bacillus sp. B12 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆ
ชื่อเรื่อง (EN): Purification and Characterization of an Alkaline Protease from Alkalotolerant Bacillus sp. B12
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: พิมล จำนงค์
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Pimon Jamnong
บทคัดย่อ (EN): Thirty Bacillus strains were cultured in a soybean mealmedium at an alkaline condition and an alkalotolerant Bacillus sp.B12 was found to be able to grow and produced the highestprotease level. This strain was a Gram-variable, rod-shaped,spore-forming, oxygen required bacterium and produced catalase.The strain B12 protease was highly stable in commercialdetergents such as P1 (Fab perfect), P2 (Breeze power), L1 (Fabperfect), L2 (Fine line) and L3 (Vanish) when incubated at 50 0Cfor 1 hr. Although Bacillus sp. B12 could grow in the 0.5%soybean meal medium and produced high protease at pH 7.0 to10.0, the most suitable condition for production of alkalineprotease was pH 9.0 at 37 0C, and shaken at 250 rpm for 24 hr(0.44 Unit/ml). Alkaline protease produced by this strain wasfound to increase along with the cell growth. The crude proteasehad an optimum pH from 8.0 to 11.0 and maintained its stabilityover a broad range of pH between 6.0 and 11.0 for 1 hr. Theoptimum temperature for crude protease activity was from 30 to80 0C. The protease was stable between 30 and 60 0C for 1 hr.To evaluate the protease action in improving the washingefficiency of the detergents, the prices of white cotton cloth soiledwith cow blood stain were washed with L2 and L3 detergents inthe presence of the crude protease from Bacillus sp. B12. Itshowed the increases in bright values from 77.22 and 71.73 to80.24 and 75.83, respectively and the decreases in red valueswhen compared to the washing only with detergents L2 and L3.Therefore, its properties had a great potential for application indetergent industry.The alkaline protease from Bacillus sp. B12 was purified by0-20% saturated ammonium sulfate precipitation and DEAEToyopearlchromatography, eluted with 0.0-0.15 M NaCl in Tris-HCl buffer, pH 8.0. Analysis of the purified protease by SDSPAGErevealed that its molecular weight was 32 kilodaltons. Thepurified protease had the highest activity at pH 10.0 andmaintained its stability between pH 8.0 and 11.0. The optimumtemperature for the purified protease was between 50 and 70 0C.The protease was stable from 30 to 50 0C for 1 hr. It wascompletely inhibited with 10 mM phenylmethylsulfonylfluoride,indicating that it belongs to the family of serine protease. It wasalso inhibited by sodium dodecyl sulfate (0.5 and 1.0%).Hydrogen peroxide (0.5 and 1.0%) did not totally inactivate theprotease activity, whereas the purified protease activity wasenhanced by the presence of either Triton X-100 or Tween-80.The purified protease showed the highest rate on hydrolysis ofcasein, followed by skim milk, bovine serum albumin, gelatin,collagen Type I and keratin, but it did not hydrolyse elastin. Thepurified protease could be active in any commercial detergentsand was highly stable in L2 and L3 detergents but was not stablein P1, P2, P3 (Pao handforce), L1 and L4 (Home) detergents.Kinetic studies of this enzyme for casein and skim milk showedthat Vmax/Km were 2.00 and 1.16 ?g.ml-1.min-1/mg.ml-1, respectively,indicating that Bacillus sp. B12 alkaline protease could hydrolysecasein better than skim milk.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=54&RecId=5540&obj_id=16009
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
คำสำคัญ (EN): Alkaline Protease
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
รายละเอียด: Thirty Bacillus strains were cultured in a soybean mealmedium at an alkaline condition and an alkalotolerant Bacillus sp.B12 was found to be able to grow and produced the highestprotease level. This strain was a Gram-variable, rod-shaped,spore-forming, oxygen required bacterium and produced catalase.The strain B12 protease was highly stable in commercialdetergents such as P1 (Fab perfect), P2 (Breeze power), L1 (Fabperfect), L2 (Fine line) and L3 (Vanish) when incubated at 50 0Cfor 1 hr. Although Bacillus sp. B12 could grow in the 0.5%soybean meal medium and produced high protease at pH 7.0 to10.0, the most suitable condition for production of alkalineprotease was pH 9.0 at 37 0C, and shaken at 250 rpm for 24 hr(0.44 Unit/ml). Alkaline protease produced by this strain wasfound to increase along with the cell growth. The crude proteasehad an optimum pH from 8.0 to 11.0 and maintained its stabilityover a broad range of pH between 6.0 and 11.0 for 1 hr. Theoptimum temperature for crude protease activity was from 30 to80 0C. The protease was stable between 30 and 60 0C for 1 hr.To evaluate the protease action in improving the washingefficiency of the detergents, the prices of white cotton cloth soiledwith cow blood stain were washed with L2 and L3 detergents inthe presence of the crude protease from Bacillus sp. B12. Itshowed the increases in bright values from 77.22 and 71.73 to80.24 and 75.83, respectively and the decreases in red valueswhen compared to the washing only with detergents L2 and L3.Therefore, its properties had a great potential for application indetergent industry.The alkaline protease from Bacillus sp. B12 was purified by0-20% saturated ammonium sulfate precipitation and DEAEToyopearlchromatography, eluted with 0.0-0.15 M NaCl in Tris-HCl buffer, pH 8.0. Analysis of the purified protease by SDSPAGErevealed that its molecular weight was 32 kilodaltons. Thepurified protease had the highest activity at pH 10.0 andmaintained its stability between pH 8.0 and 11.0. The optimumtemperature for the purified protease was between 50 and 70 0C.The protease was stable from 30 to 50 0C for 1 hr. It wascompletely inhibited with 10 mM phenylmethylsulfonylfluoride,indicating that it belongs to the family of serine protease. It wasalso inhibited by sodium dodecyl sulfate (0.5 and 1.0%).Hydrogen peroxide (0.5 and 1.0%) did not totally inactivate theprotease activity, whereas the purified protease activity wasenhanced by the presence of either Triton X-100 or Tween-80.The purified protease showed the highest rate on hydrolysis ofcasein, followed by skim milk, bovine serum albumin, gelatin,collagen Type I and keratin, but it did not hydrolyse elastin. Thepurified protease could be active in any commercial detergentsand was highly stable in L2 and L3 detergents but was not stablein P1, P2, P3 (Pao handforce), L1 and L4 (Home) detergents.Kinetic studies of this enzyme for casein and skim milk showedthat Vmax/Km were 2.00 and 1.16 ?g.ml-1.min-1/mg.ml-1, respectively,indicating that Bacillus sp. B12 alkaline protease could hydrolysecasein better than skim milk.
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

พิมล จำนงค์. "การทำให้อัลคาไลน์โปรตีเอสที่ผลิตจาก alkalotolerant Bacillus sp. B12 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆPurification and Characterization of an Alkaline Protease from Alkalotolerant Bacillus sp. B12". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2545

พิมล จำนงค์. "การทำให้อัลคาไลน์โปรตีเอสที่ผลิตจาก alkalotolerant Bacillus sp. B12 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆPurification and Characterization of an Alkaline Protease from Alkalotolerant Bacillus sp. B12". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2545. Print.



TARR Wordcloud:
การทำให้อัลคาไลน์โปรตีเอสที่ผลิตจาก alkalotolerant Bacillus sp. B12 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆ
พิมล จำนงค์
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
2545
การผลิตและการทำให้ starch-binding amylase จาก alkaliphilic Bacillus sp. SS-8 บริสุทธิ์และศึกษาสมบัติต่าง ๆ ของเอนไซม์บริสุทธิ์ การหาภาวะที่เหมาะสมในการผลิตนิวทรัลโปรติเอสทนร้อนจาก Bacillus cereus และลักษณะสมบัติของเอนไซม์ที่บริสุทธิ์บางส่วน การทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนจาก Bacillus subtilis N3 ที่มีฤทธิ์ต้านราก่อโรคพืช Bipolaris sp. การโคลนนิ่ง การแสดงออก การทำให้บริสุทธิ์ และคุณลักษณะทางเอนไซม์ของโปรตีนโปรตีเอส NS2B/NS3 ของไวรัสไข้สมองอักเสบ การผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสโดย Aspergillus oryzae U1521 การผลิตและศึกษาสมบัติของบีตา-กาแล็กโทซิเดสบริสุทธิ์จากยีสต์ทนร้อน Kluyveromyces sp. CK8 การผลิตและการทำบริสุทธิ์ของบีตา-แมนนาเนสจาก Bacillus subtilis M7 การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติของลูซีนดีไฮโดรจิเนส จาก Alcaligenes faecalis การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะสมบัติของเลคตินจากเมล็ดลูกเนียง Archidendron jiringa Nielsen. การคัดกรองและการหาสภาวะที่เหมาะสมสาหรับการผลิตเอนไซม์โปรตีเอสโดยแบคทีเรียย่อยสลายโปรตีนเพื่อใช้ในการกาจัดโปรตีนในเปลือ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair