สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร
วิลาวัลย์ สินธุประภา - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร
ชื่อเรื่อง (EN): Improvement of enzyme for prebiotics production from agricultural waste
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: วิลาวัลย์ สินธุประภา
บทคัดย่อ: เบต้าแมนนาเนส เป็นเอนไซม์ที่มีบทบาทในอุตสาหกรรมทางเทคโนโลยีชีวภาพอย่างหลากหลาย เนื่องจากเป็น เอนไซม์ที่มีคุณสมบัติในการย่อยแบบสุ่มของพันธะเบต้า1,4 ภายในสายโซ่หลักของแมนแนนให้ได้เป็นแมนโนโอลิโกแซคคาไรด์ ซึ่งเป็นสารพรีไบโอติกที่สามารถนำไปใช้ในอุตสาหกรรมอาหารสัตว์ แต่ในปัจจุบันเอนไซม์ที่ได้จากจุลินทรีย์สายพันธุ์ธรรมชาติมี ระดับการแสดงออกไม่เพียงพอต่อความต้องการในระดับอุตสาหกรรม ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงทำการโคลนและเพิ่มประสิทธิภาพของ การแสดงออกยีนเบต้าแมนนาเนส ในระบบของ Escherichia coli และต้นยาสูบ (Nicotiana benthamiana) ยีนที่ กำหนดการแสดงออกของเอนไซม์เบต้าแมนนาเนส (Open reading frame, ORF) ที่ได้จากการเพิ่มปริมาณโดยใช้เทคนิค polymerase chain reaction พบว่า premature mannanase enzyme (มี signal peptide) และ mature mannanase enzyme (ไม่มี signal peptide) มีขนาด 2,190 และ 2,124 คู่เบส ตามลำดับ ประกอบด้วยกรดอะมิโนจำนวน 725 และ 707 กรดอะมิโน ตามลำดับ ค่ามวลโมเลกุลทางทฤษฎีเท่ากับ 80.6 และ 78.8 กิโลดาลตัน ตามลำดับ ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนแมน นาเนสจาก Acinetobacter sp. ST1-1 มีความคล้ายคลึงเหมือนกับยีนเบต้าแมนนาเนสของ Klebsiella pneumonia 99 เปอร์เซ็นต์ จัดอยู่ในกลุ่มของ glycoside hydrolase 26 (GH 26) ประกอบด้วยโดเมน Fibronectin type 3 และ Carbohydrate Binding Module 35 เมื่อศึกษาการแสดงออกในเวคเตอร์ pET24a (+) เมื่อใช้ E. coli BL21(DE3), E. coli RosettaTM (DE3) และ E. coli BL21 (DE3) pLysS เป็นเซลล์เจ้าบ้าน และถูกเหนี่ยวนำด้วยสารละลาย IPTG ความเข้มข้น 1 มิลลิโมลาร์ ที่อุณหภูมิ 37, 20 และ18 องศาเซลเซียส เมื่อวิเคราะห์โปรตีนโดยวิธี SDS-PAGE และ western blot analysis พบแถบโปรตีนขนาดประมาณ 64-98 กิโลดาลตัน ที่มีความจำเพาะต่อ 6x-His tag Antibody ที่ติดด้วย HRP enzyme (6x- His taq Antibody, HRP) ในส่วนของ pellet มากกว่าบริเวณ extracellular, periplasm และ cytoplasm แต่อย่างไรก็ตาม ไม่สามารถตรวจพบกิจกรรมของเอนไซม์แมนนาเนสได้ การศึกษาการแสดงออกในเวกเตอร์ pBYR2eK2Md-GFP โดยมี Agrobacterium tumefaciens เป็นเซลล์เจ้าบ้าน และโปรตีนแมนนาเนสถูกแสดงออกในต้นยาสูบ (N. benthamiana) พลาสมิดลูกผสม 2.1k pBY2e และ 2.2k pBY2e เข้าสู่ต้นยาสูบ N. benthamiana โดยใช้ A. tumefaciens เป็นพาหะ ตรวจสอบโปรตีนที่สกัดได้จากใบต้นยาสูบที่เจริญหลังถ่ายโอนยีน เป็นเวลา 4 วัน เมื่อวิเคราะห์ขนาดของโปรตีนด้วยวิธี SDS- PAGE ไม่พบความแตกต่างของขนาดโปรตีนระหว่างใบต้นยาสูบที่ถูกดัดแปลงพันธุ์กรรมและใบต้นยาสูบที่ไม่ถูกดัดแปลงพันธุ์ กรรม และเมื่อวิเคราะห์โปรตีนต่อความจำเพาะต่อ 6x-His tag Antibody ด้วยวิธี Western blot ไม่พบแถบสีของโปรตีนฮีส ทิดีน
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: สารพรีไบโอติกส์
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

วิลาวัลย์ สินธุประภา. "การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรImprovement of enzyme for prebiotics production from agricultural waste". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2560

วิลาวัลย์ สินธุประภา. "การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรImprovement of enzyme for prebiotics production from agricultural waste". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2560. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร
วิลาวัลย์ สินธุประภา
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
2560
การพัฒนาเอนไซม์เพื่อผลิตสารพรีไบโอติจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร สำหรับอุตสาหกรรมอาหารสัตว์ การผลิตไบโอเอธานอลจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร การผลิตไบโอเซลจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรด้วยกระบวนการทางเทคโนโลยีชีวภาพ การผลิตไบโอเซลจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรด้วยกระบวนทางเทคโนโลยีชีวภาพ การผลิตกรดแลคติกจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรเพื่อการแข่งขัน (ระยะที่ 2) การผลิตปุ๋ยหมักชีวภาพจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรด้วยจุลินทรีย์จากกอไผ่ การผลิตกรดไขมันจำเป็นจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรด้วยเชื้อจุลินทรีย์ Thraustochytrids แนวทางการพัฒนาสูตรอาหารจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร เพื่อเป็นแหล่งผลิตสารเสริมชีวนะในอุตสาหกรรมอาหารสัตว์ 2558A17002106 วัสดุทดแทนจากการผสมขยะพลาสติกกับวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตร การเพิ่มผลผลิตของเห็ดนางรมที่เพาะเลี้ยงจากวัสดุเหลือทิ้งทางการเกษตรด้วยจุลินทรีย์ที่มีประสิทธิภาพ (EM)
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair