สืบค้นงานวิจัย
การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะเพื่อการวินิจฉัย Vibrio parahaemolyticus ที่ทำให้เกิดโรคตายด่วนในกุ้ง
ประดิษฐ์ หวังมาน - มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ
ชื่อเรื่อง: การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะเพื่อการวินิจฉัย Vibrio parahaemolyticus ที่ทำให้เกิดโรคตายด่วนในกุ้ง
ชื่อเรื่อง (EN): Production of monoclonal antibody for diagnosis of Vibrio parahaemolyticus that cause Early Mortality Syndrome (EMS) in shrimp
บทคัดย่อ: จากการแยกท๊อกซินชนิด เอ (ToxA) และชนิดบี (ToxB) ที่ผลิตจากแบคทีเรีย Vibrio parahaemolyticus สายพันธุ์จากประเทศจีน (CN-VPAHPND) ที่ทำให้เกิดโรคกลุ่มอาการตับและตับอ่อนเสื่อมสภาพอย่างฉับพลัน (AHPND) โดยทำการปั่นแยกเซลล์แบคทีเรียออกจากน้ำเลี้ยง แล้วนำน้ำเลี้ยงมาใช้ในการปลูกภูมิคุ้มกันในหนูเพื่อผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดี (MAb) พบว่าสามารถทำการผลิตและคัดเลือก MAb ได้ 3 กลุ่ม คือ 1) MAb จำเพาะต่อ ToxA 2) MAb จำเพาะต่อ ToxB และ 3) MAb จับเฉพาะ CN-VPAHPND เท่านั้น MAb ที่จำเพาะต่อ ToxA และ ToxB สามารถใช้ตรวจ VPAHPND ทั้ง 10 สายพันธุ์ที่แยกได้จากประเทศจีน เวียดนาม มาเลเซียและไทย แต่ไม่จับกับ V. parahaemolyticus ที่ไม่ทำให้เกิดโรค AHPND (non-VPAHPND ) จำนวน 20 สายพันธ์ที่แยกได้จากแหล่งต่างๆ รวมทั้งไม่ทำปฏิกิริยากับ Vibrio spp. และแบคทีเรียอื่น ๆ จากการทดสอบด้วยวิธี dot-ELISA พบว่า MAb ที่จำเพาะต่อ ToxA และ ToxB นี้สามารถนำมาใช้ตรวจหาโปรตีนรีคอมบิแนนท์ของท๊อกซินชนิด เอ (His-tagged ToxA) และ บี (GST-ToxB) โดยมีความไวเท่ากับ 200 fmol/spot และ 10 fmol/spot ตามลำดับ นอกจากนี้ยังสามารถใช้ MAb นี้ในการตรวจท๊อกซินที่สร้างจากแบคทีเรียหรือจากเนื้อเยื่อกุ้งที่ผสมเชื้อแบคทีเรียในตัวอย่างได้ที่ความเข้มข้นต่ำสุดเท่ากับ 1 CFU/ml หลังจากที่ทำการบ่มเชื้อแบคทีเรียเป็นเวลา 6 ชั่วโมง ส่วน MAb ที่จับจำเพาะต่อ CN-VPAHPND เท่านั้นไม่สามารถจับกับ VPAHPND ไอโซเลตอื่นๆ 9 จาก 10 ไอโซเลตที่แยกจากเวียดนาม มาเลเซีย และไทยได้ อย่างไรก็ตาม MAb นี้สามารถเกิดปฏิกิริยาข้ามกับ 1 จาก 20 ไอโซเลตของ non -VPAHPND และ 3 จาก 9 ไอโซเลตของเชื้อ V. alginolyticus ผลการวิจัยนี้แสดงให้เห็นว่าการระบาดของโรค AHPND ในเอเชียตะวันออกเฉียงใต้อาจไม่ได้เกิดจาก CN-VPAHPND ไอโซเลตที่แยกจากประเทศจีน และ MAb ที่จำเพาะต่อ ToxA และ ToxB ที่ผลิตได้จากการศึกษาครั้งนี้สามารถใช้เพื่อตรวจหาท๊อกซินทั้ง 2 ชนิดได้โดยตรงโดยใช้วิธี dot blotting
บทคัดย่อ (EN): Toxin A (ToxA) and toxin B (ToxB) of Vibrio parahaemolyticus, which cause acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND), were prepared in a bacterial supernatant from Chinese isolates (CN-VPAHPND) by washing bacterial colonies off of TSA cultures. The supernatant was subsequently used in mouse immunization to produce monoclonal antibodies (MAbs). Three groups of MAbs were selected: one MAb specific to ToxA, two MAbs specific to ToxB and one MAb specific to V. parahaemolyticus (CN-VPAHPND). The MAbs specific to ToxA and ToxB recognized all 10 VPAHPND isolates from China, Vietnam, Malaysia and Thailand, but did not bind to the 20 nonVPAHPND isolates from various other sources, including Vibrio spp. and other bacteria. The MAbs specific to toxins were used to detect the recombinant proteins of His-tagged ToxA and GST-ToxB with sensitivities of 200 fmol/spot and 10 fmol/spot, respectively, as determined by dot-ELISA. The MAbs were used to detect the toxins produced by bacteria or shrimp tissue lysate spiked with bacteria in a complex tissue sample at concentrations as low as 1 CFU/ml after pre-enrichment of the bacteria for 6 h. The third group of MAb was specific to CN-VPAHPND isolate but did not recognize the other 9 out of 10 VPAHPND isolates from Vietnam, Malaysia and Thailand. However, this MAb demonstrated cross-reactivity to 1 out of 20 of the non-VPAHPND isolates and 3 out of 9 of the V. alginolyticus isolates. These findings indicate that the AHPND epidemic in Southeast Asia was not caused by the CN-VPAHPND isolate. The MAbs specific to ToxA and ToxB produced in this study could be used to detect both toxins directly by dot blotting.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ
คำสำคัญ: โรคตายด่วน
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ประดิษฐ์ หวังมาน. "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะเพื่อการวินิจฉัย Vibrio parahaemolyticus ที่ทำให้เกิดโรคตายด่วนในกุ้งProduction of monoclonal antibody for diagnosis of Vibrio parahaemolyticus that cause Early Mortality Syndrome (EMS) in shrimp". มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ. 2560

ประดิษฐ์ หวังมาน. "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะเพื่อการวินิจฉัย Vibrio parahaemolyticus ที่ทำให้เกิดโรคตายด่วนในกุ้งProduction of monoclonal antibody for diagnosis of Vibrio parahaemolyticus that cause Early Mortality Syndrome (EMS) in shrimp". มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ. 2560. Print.



TARR Wordcloud:
การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะเพื่อการวินิจฉัย Vibrio parahaemolyticus ที่ทำให้เกิดโรคตายด่วนในกุ้ง
ประดิษฐ์ หวังมาน
มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ
30 กันยายน 2560
การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อ nervous necrosis virus (NNV) เพื่อการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ NNV ในปลากะรัง การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ 3-อะมิโน-2-ออกซาโซลิดิโนน ประสิทธิภาพของสารสกัดขมิ้นชันในการป้องกันโรคตายด่วนในกุ้งขาวแวนนาไมที่เกิดจากเชื้อ Vibrio parahaemolyticus การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีและการพัฒนาวิธีการทางอิมมูโนวิทยาเพื่อใช้ตรวจวินิจฉัยเชื้อไวรัสและแบคทีเรียก่อโรคพืชที่สำคัญในพืชเศรษฐกิจ การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีและการพัฒนาวิธีการทางอิมมูโนวิทยาเพื่อใช้ตรวจวินิจฉัยเชื้อแบคทีเรีย Streptococcus agalactiae ในปลานิล การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีและการพัฒนาวิธีการทางอิมมูโนวิทยาเพื่อใช้ตรวจวินิจฉัยเชื้อไวรัสและแบคทีเรียก่อโรคพืชที่สำคัญในพืชเศรษฐกิจ (ปีที่ 2) โครงการวิจัยเรื่อง การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเซมิคาร์บาไซด์ : รายงานการวิจัย ปีที่ 1 การค้นหาตำแหน่ง epitope บน non-structural protein ของเชื้อ Watermelon silver mottle virus ที่ถูกจับอย่างจำเพาะเจาะจงโดยโมโนโคลนอลแอนติบอดี การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อออกซีตตราซัยคลิน เพื่อพัฒนาชุดตรวจสอบโดยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมูโนซอร์เบนต์เอสเสย์ : รายงานการวิจัยฉบับสมบูรณ์ การพัฒนาโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลโลเจนินในพลาสมาของปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch)
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair