สืบค้นงานวิจัย
เอนไซม์ทริปซินจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว (Thunnus alalunga): การทำบริสุทธิ์ การแยกส่วนและการจำแนกคุณลักษณะ
สรรพสิทธิ์ กล่อมเกล้า - มหาวิทยาลัยทักษิณ
ชื่อเรื่อง: เอนไซม์ทริปซินจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว (Thunnus alalunga): การทำบริสุทธิ์ การแยกส่วนและการจำแนกคุณลักษณะ
ชื่อเรื่อง (EN): Trypsin from liver of albacore tuna (Thunnus alalunga): Purification, partitioning and characterization
บทคัดย่อ: จากการศึกษากิจกรรมของเอนไซม์โปรตีเนสจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครี บยาว (Thunnus alalunga) พบว่าเอนไซม์โปรตีเนสมีพีเอชและอุณหภูมิที?เหมาะสมสําหรับการย่อยสลายเคซีน เท่ากับ 8.5 และ 55 องศาเซลเซียส ตามลําดับ เอนไซม์มีความคงตัวต่อความร้อนที?อุณหภูมิไม่เกิน 50 องศาเซลเซียส และมีความคงตัวต่อพีเอชในช่วง 7.0-10.0 เป็ นเวลา 30-120 นาที กิจกรรมของ เอนไซม์ถูกยับยั?งอย่างมีประสิทธิภาพด้วยสารยับยั?งเอนไซม์ทริปซินจากถั?วเหลือง (SBTI) TLCK และ PMSF กิจกรรมของเอนไซม์โปรตีเนสลดลงอย่างต่อเนื?องเมื?อความเข้มข้นของโซเดียมคลอ- ไรด์เพิ?มขึ?น (ร้อยละ 0-30) ในขณะที?กิจกรรมของเอนไซม์โปรตีเนสเพิ?มขึ?นเมื?อความเข้มข้นของ แคลเซียมคลอไรด์เพิ?มขึ?น เอนไซม์โปรตีเนสจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาวมีนํ? าหนักโมเลกุลเท่ากับ 21 24 30 และ 34 กิโลดาลตัน เมื?อตรวจสอบด้วยวิธี activity stainingจากการศึกษาผลของสารสกัด ต่อการเก็บเกี?ยวเอนไซม์โปรตีเนสจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว พบว่าการสกัดตับปลาทูน่าพันธุ์ ครีบยาวด้วยสารละลายโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที?ระดับความเข้มข้น 50 มิลลิโมลาร์ พีเอช 7.0 ที?มี Brij 35 ความเข้มข้นร้อยละ 0.2 ให้ประสิทธิภาพในการเก็บเกี?ยวเอนไซม์โปรตีเนสสูงกว่าสารสกัด ชนิดอื?น ๆ (P<0.05) จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์โปรตีเนสตัวหลักที?พบในตับปลา ทูน่าพันธุ์ครีบยาวคือ เอนไซม์โปรตีเนสที?เป็ นด่างที?ถูกกระตุ้นด้วยความร้อนซึ?งมีลักษณะคล้ายกับ เอนไซม์โปรตีเนสชนิดซีรีนโดยเฉพาะเอนไซม์ทริปซิน จากการศึกษาการเก็บเกี?ยวเอนไซม์โปรตีเนสจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาวโดยใช้ aqueous two-phase system (ATPS) พบว่า ATPS ซึ?งประกอบด้วยพอลิเอทธิลีนไกลคอล (นํ? าหนักโมเลกุล เท่ากับ 1000) ที?ระดับความเข้มข้นร้อยละ 25 และโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต ความเข้มข้นร้อยละ 20 พีเอช 7.0 เป็ นสภาวะที?ดีที?สุดในการแยกส่วนเอนไซม์โปรตีเนสไปยังเฟสบน และให้กิจกรรม จําเพาะสูงสุด (20.65 ยูนิตต่อมิลลิกรัมโปรตีน) และมีความบริสุทธิ? เพิ?มขึ?น 5.58 เท่า มีผลผลิตเท่ากับ ร้อยละ 89.99 การเติมโซเดียมคลอไรด์ที?ระดับความเข้มข้นไม่เกินร้อยละ 6 ส่งผลให้ความบริสุทธิ? และผลผลิตของเอนไซม์โปรตีเนสลดลง เอนไซม์โปรตีเนสที?ผ่านการแยกส่วนมีนํ? าหนักโมเลกุล เท่ากับ 2124 30 และ 34 กิโลดาลตัน เมื?อตรวจสอบด้วยวิธีอิเลคโตรฟอรีซีส จากการศึกษาผลของ เอนไซม์โปรตีเนสที?ผ่านการแยกส่วนด้วยวิธี ATPS ต่อการย่อยสลายกล้ามเนื?อปลาวัว (Abalistes stellaris) พบว่าเอนไซม์โปรตีเนสที?ผ่านการแยกส่วนด้วยวิธี ATPS สามารถย่อยสลายกล้ามเนื?อ ปลาวัวได้ทั?งนี? ขึ? นกับปริ มาณเอนไซม์ จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า ATPS เป็ นวิธีที?มี ประสิทธิภาพสําหรับการเก็บเกี?ยวและทําบริสุทธิ? เอนไซม์โปรตีเนสโดยไม่จําเป็ นต้องอาศัยหลาย v ขั? นตอนในการทําบริ สุ ทธิ? นอกจากนี? เอนไซม์โปรตีเนสที?ผ่านการแยกส่วนสามารถนําไป ประยุกต์ใช้ในการเตรียมโปรตีนไฮโดรไลเสต คําสําคัญ : โปรตีเนส เครื?องในปลา Aqueous two-phase system โปรตีนไฮโดรไลเสต
บทคัดย่อ (EN): Proteolytic activity of the extract from albacore tuna (Thunnus alalunga) liver was studied. Optimum pH and temperature for casein hydrolysis were 8.5 and 55?C, respectively. The enzyme was stable to heat-treatment up to 50?C and in the pH range of 7.0-10.0 for 30-120 min. The proteolytic activity was strongly inhibited by soybean trypsin inhibitor, TLCK and PMSF. Activities of liver extract continuously decreased with increasing NaCl concentration (0-30%), while activities increased as CaCl2 concentration increased. Based on activity staining, the molecular weights of the proteinases in albacore tuna liver were 21, 24, 30 and 34 kDa. Optimum extraction media for proteinases recovery from albacore tuna liver was also investigated. Extraction of the liver powder with 50 mM Na-phosphate buffer, pH 7.0 containing 0.2% (v/v) Brij 35 rendered a higher recovery of proteinase activity than other extractants tested (P<0.05). The results suggested that major proteinases in albacore tuna liver were heat-activated alkaline proteinases, most likely trypsin-like serine proteinases. The recovery of liver proteinase from albacore tuna by an aqueous two-phase system (ATPS) was optimized. ATPS comprising PEG1000 (25%, w/w) and NaH2PO4 (20%, w/w) at pH 7.0 provided the best condition for the maximum partitioning of proteinase into the top phase and gave the highest purification factor (5.58-fold) and specific activity (20.65 unit/mg protein). The yield of 89.99% was obtained. The addition of NaCl up to a final concentration of 6% (w/w) decreased the degree of purification and enzyme recovery of proteinase. Based on electrophoresis and activity staining, the fractionated proteinases had the MW 21, 24, 30 and 34 kDa. The effect of fractionated proteinases on starry triggerfish (Abalistes stellaris) muscle vii hydrolysis was also studied. Fractionated proteinases were able to hydrolyze triggerfish muscle in dose dependent manner. Overall results demonstrated the feasibility of ATPS for the recovery and purification of proteinase without the need of multiple steps and the obtained proteinase can be further in preparation of protein hydrolysate. Keywords : Proteinases, Viscera, Aqueous two-phase system, Protein hydrolysate
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยทักษิณ
คำสำคัญ: การแยกส่วน
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

สรรพสิทธิ์ กล่อมเกล้า. "เอนไซม์ทริปซินจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว (Thunnus alalunga): การทำบริสุทธิ์ การแยกส่วนและการจำแนกคุณลักษณะTrypsin from liver of albacore tuna (Thunnus alalunga): Purification, partitioning and characterization". มหาวิทยาลัยทักษิณ. 2560

สรรพสิทธิ์ กล่อมเกล้า. "เอนไซม์ทริปซินจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว (Thunnus alalunga): การทำบริสุทธิ์ การแยกส่วนและการจำแนกคุณลักษณะTrypsin from liver of albacore tuna (Thunnus alalunga): Purification, partitioning and characterization". มหาวิทยาลัยทักษิณ. 2560. Print.



TARR Wordcloud:
เอนไซม์ทริปซินจากตับปลาทูน่าพันธุ์ครีบยาว (Thunnus alalunga): การทำบริสุทธิ์ การแยกส่วนและการจำแนกคุณลักษณะ
สรรพสิทธิ์ กล่อมเกล้า
มหาวิทยาลัยทักษิณ
30 กันยายน 2560
คุณลักษณะของเอนไซม์ทริปซินที่ผ่านการทำบริสุทธิ์จากเครื่องในปลาดุกบิ๊กอุย เอนไซม์โปรตีเนสจากลำไส้ปลาทูน่าพันธุ์โอแถบ: การทำบริสุทธิ์และการจำแนกคุณลักษณะ กิจกรรมของเอนไซม์ทริปซิน และไคโมทริปซิน และอัตราส่วนของเอนไซม์ทริปซิน ไคโมทริปซิน (T/C ratio) ในทางเดินอาหารของปลาเวียนที่อุ่ณหภูมิต่างกัน ความหลากชนิดและความชุกชุมของปลาในบริเวณป่าชายเลนคลองกำพวนและพื้นที่ชายฝั่ง อำเภอสุขสำราญ จังหวัดระนอง ความหลากชนิดและความชุกชุมของปลาในบริเวณป่าชายเลนคลองกำพวนและพื้นที่ชายฝั่ง อำเภอสุขสำราญ จังหวัดระนอง การคัดเลือกพ่อแม่พันธุ์ที่เหมาะสม เพื่อยกระดับผลผลิตปลาดุก โดยอาศัยข้อมูลจากเครื่องหมายพันธุกรรม ผลของสารสกัดโปรตีนจากรำข้าวพันธุ์ต่างๆ และส่วนของโปรตีนที่แยกได้ต่อประสิทธิภาพการยับยั้งการเกิดสีน้ำตาลเนื่องจากเอนไซม์ โปรตีนไฮโดรไลเสตจากเครื่องในปลาทูน่าพันธุ์โอแถบ (Katsuwonus pelamis): สมบัติเชิงหน้าที่และกิจกรรมการต้านออกซิเดชัน การทำบริสุทธิ์ และการจำแนกคุณลักษณะสารยับยั้งเอนไซม์ย่อยโปรตีนจากเมล็ดถั่วเขียว การผลิตและการศึกษาคุณลักษณะของโปรตีนไฮโดรไลเสตจากกล้ามเนื้อปลาแป้นเขี้ยวโดยใช้ส่วนสกัดจากเครื่องในปลาดุกบิ๊กอุย
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair