สืบค้นงานวิจัย
การคัดเลือก และขยายโคลนของต้นหน่อไม้ฝรั่งพันธุ์ดีจากการเพาะเลี้ยงอับละอองเรณู
มณฑา วงศ์มณีโรจน์ - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การคัดเลือก และขยายโคลนของต้นหน่อไม้ฝรั่งพันธุ์ดีจากการเพาะเลี้ยงอับละอองเรณู
ชื่อเรื่อง (EN): Assessment and multiplication of the selected asparagus (Asparagus officinalis L.) clones derived from anther culture
บทคัดย่อ: บทคัดย่อ การเพาะเลี้ยงอับเรณูของต้นหน่อไม้ฝรั่ง ที่ปลูกในแปลงเกษตรกร อำเภอกำแพงแสน จังหวัดนครปฐม โดยเลือกเฉพาะดอกตัวผู้ที่เป็นดอกตูมขนาด 2-3 มม. มาฟอกฆ่าเชื้อด้วยสารละลายคลอร็อกซ์ความเข้มข้น 10% และ 5% โดยปริมาตร เป็นเวลานาน 10 และ 5 นาที ตามลำดับ ล้างด้วยน้ำกลั่นที่นึ่งฆ่าเชื้อแล้ว ตัดเอาเฉพาะอับเรณูมาเพาะเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร MS ซึ่งเติมน้ำตาลซูโครส 60 กรัมต่อลิตร glutamine 800 มก.ต่อลิตร casein enzymatic hydrolysate (CEH) 500 มก.ต่อลิตร yeast extract 2 กรัมต่อลิตร NAA 2 มก.ต่อลิตร BA 1 มก.ต่อลิตร และ วุ้น (agar agar) 10 กรัมต่อลิตร (สูตร YNB) ทำการ pretreatment ที่อุณหภูมิ 34oC นาน 7 วัน แล้วจึงนำมาเลี้ยงในที่มืด ที่อุณหภูมิ 30oC เป็นเวลานาน 30 วัน สามารถชักนำให้เกิดเอ็มบริโอจีนิคแคลลัสได้ในอัตราร้อยละ 17.13 เมื่อนำแคลลัสที่ได้นี้มาเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร MS ซึ่งเติมน้ำตาลซูโครส 25 กรัมต่อลิตร adenine sulfate 55 มก.ต่อลิตร malt extract 500 มก.ต่อลิตร NaH2PO4 191.9 มก.ต่อลิตร NAA 0.06 มก.ต่อลิตร kinetin 0.1 มก.ต่อลิตร และ วุ้น (agar agar) 10 กรัมต่อลิตร (สูตร AS1) ที่อุณหภูมิ 26+1oC ความเข้มแสง 2,000 ลักซ์ ช่วงแสง 12 ชั่วโมงต่อวัน แคลลัสเหล่านี้สามารถพัฒนาเป็น somatic embryos ซึ่งเจริญเติบโตเป็นต้นหน่อไม้ฝรั่งต่อไปได้ และจากการศึกษาจำนวนโครโมโซมพบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งเหล่านี้มีจำนวนโครโมโซมทั้งชนิดแฮพพลอยด์ (1n=10) และชนิดดิพพลอยด์ (2n=20) ในอัตราส่วนร้อยละ 84.6 และ 15.4 ตามลำดับ ทำการคัดเลือกต้นหน่อไม้ฝรั่งชนิดแฮพพลอยด์ จำนวน 10 clones มาเพิ่มปริมาณต้น โดยการเพาะเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร AS1 ที่อุณหภูมิ 26+1oC ความเข้มแสง 2,000 ลักซ์ ช่วงแสง 12 ชั่วโมงต่อวัน พร้อมกับนำชิ้นส่วนหน่อไม้ฝรั่งที่มีชุดโครโมโซม 1n=10 บางส่วนมาทำการทดลอง double chromosome โดยนำมาแช่ในสารละลาย colchicines ที่ความเข้มข้น 0-1% ระยะเวลา 0-48 ชั่วโมง แล้วนำไปเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร AS1 นาน 1-2 เดือน พบว่าร้อยละ 13.3-60 ของชิ้นส่วนหน่อไม้ฝรั่งที่ผ่านการแช่ใน colchicines ความเข้มข้น 0.1-1% มีการเจริญเป็นต้นได้ ทั้งนี้เมื่อนำเนื้อเยื่อปลายรากของต้นหน่อไม้ฝรั่งทั้ง 10 clones ที่เพิ่มปริมาณ มาตรวจเช็คจำนวนโครโมโซมอีกครั้งหนึ่ง พบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งทุก clones มีจำนวนโครโมโซมเป็นดิพพลอยด์ จากการเกิด spontaneous double chromosome ทั้งจากการตรวจดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และการตรวจด้วยเครื่อง flow cytometer สำหรับผลการตรวจเพศหน่อไม้ฝรั่งด้วยวิธี PCR โดยใช้คู่ไพร์เมอร์ 5’-ATATGCGAGGCATTTGGAAG-3’ และ 5’-CTGCTACTGAGATACCTTAC-3’ พบว่ามีเฉพาะต้นตัวผู้ที่พบแถบ DNA ขนาด 300 bp ซึ่งไม่ปรากฏในต้นตัวเมีย/ต้นกระเทย สอดคล้องกับลักษณะความแตกต่างของดอกจากต้นหน่อไม้ฝรั่งตัวผู้และต้นตัวเมีย นอกจากนี้ยังพบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งชนิดตัวผู้ที่ผ่านการคัดเลือกด้วยวิธี PCR หลังจากย้ายออกปลูกในแปลงให้ดอกเป็นชนิดดอกตัวผู้ทั้งหมด บทคัดย่อ การเพาะเลี้ยงอับเรณูของต้นหน่อไม้ฝรั่ง ที่ปลูกในแปลงเกษตรกร อำเภอกำแพงแสน จังหวัดนครปฐม โดยเลือกเฉพาะดอกตัวผู้ที่เป็นดอกตูมขนาด 2-3 มม. มาฟอกฆ่าเชื้อด้วยสารละลายคลอร็อกซ์ความเข้มข้น 10% และ 5% โดยปริมาตร เป็นเวลานาน 10 และ 5 นาที ตามลำดับ ล้างด้วยน้ำกลั่นที่นึ่งฆ่าเชื้อแล้ว ตัดเอาเฉพาะอับเรณูมาเพาะเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร MS ซึ่งเติมน้ำตาลซูโครส 60 กรัมต่อลิตร glutamine 800 มก.ต่อลิตร casein enzymatic hydrolysate (CEH) 500 มก.ต่อลิตร yeast extract 2 กรัมต่อลิตร NAA 2 มก.ต่อลิตร BA 1 มก.ต่อลิตร และ วุ้น (agar agar) 10 กรัมต่อลิตร (สูตร YNB) ทำการ pretreatment ที่อุณหภูมิ 34oC นาน 7 วัน แล้วจึงนำมาเลี้ยงในที่มืด ที่อุณหภูมิ 30oC เป็นเวลานาน 30 วัน สามารถชักนำให้เกิดเอ็มบริโอจีนิคแคลลัสได้ในอัตราร้อยละ 17.13 เมื่อนำแคลลัสที่ได้นี้มาเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร MS ซึ่งเติมน้ำตาลซูโครส 25 กรัมต่อลิตร adenine sulfate 55 มก.ต่อลิตร malt extract 500 มก.ต่อลิตร NaH2PO4 191.9 มก.ต่อลิตร NAA 0.06 มก.ต่อลิตร kinetin 0.1 มก.ต่อลิตร และ วุ้น (agar agar) 10 กรัมต่อลิตร (สูตร AS1) ที่อุณหภูมิ 26+1oC ความเข้มแสง 2,000 ลักซ์ ช่วงแสง 12 ชั่วโมงต่อวัน แคลลัสเหล่านี้สามารถพัฒนาเป็น somatic embryos ซึ่งเจริญเติบโตเป็นต้นหน่อไม้ฝรั่งต่อไปได้ และจากการศึกษาจำนวนโครโมโซมพบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งเหล่านี้มีจำนวนโครโมโซมทั้งชนิดแฮพพลอยด์ (1n=10) และชนิดดิพพลอยด์ (2n=20) ในอัตราส่วนร้อยละ 84.6 และ 15.4 ตามลำดับ ทำการคัดเลือกต้นหน่อไม้ฝรั่งชนิดแฮพพลอยด์ จำนวน 10 clones มาเพิ่มปริมาณต้น โดยการเพาะเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร AS1 ที่อุณหภูมิ 26+1oC ความเข้มแสง 2,000 ลักซ์ ช่วงแสง 12 ชั่วโมงต่อวัน พร้อมกับนำชิ้นส่วนหน่อไม้ฝรั่งที่มีชุดโครโมโซม 1n=10 บางส่วนมาทำการทดลอง double chromosome โดยนำมาแช่ในสารละลาย colchicines ที่ความเข้มข้น 0-1% ระยะเวลา 0-48 ชั่วโมง แล้วนำไปเลี้ยงในอาหารแข็งสูตร AS1 นาน 1-2 เดือน พบว่าร้อยละ 13.3-60 ของชิ้นส่วนหน่อไม้ฝรั่งที่ผ่านการแช่ใน colchicines ความเข้มข้น 0.1-1% มีการเจริญเป็นต้นได้ ทั้งนี้เมื่อนำเนื้อเยื่อปลายรากของต้นหน่อไม้ฝรั่งทั้ง 10 clones ที่เพิ่มปริมาณ มาตรวจเช็คจำนวนโครโมโซมอีกครั้งหนึ่ง พบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งทุก clones มีจำนวนโครโมโซมเป็นดิพพลอยด์ จากการเกิด spontaneous double chromosome ทั้งจากการตรวจดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และการตรวจด้วยเครื่อง flow cytometer สำหรับผลการตรวจเพศหน่อไม้ฝรั่งด้วยวิธี PCR โดยใช้คู่ไพร์เมอร์ 5’-ATATGCGAGGCATTTGGAAG-3’ และ 5’-CTGCTACTGAGATACCTTAC-3’ พบว่ามีเฉพาะต้นตัวผู้ที่พบแถบ DNA ขนาด 300 bp ซึ่งไม่ปรากฏในต้นตัวเมีย/ต้นกระเทย สอดคล้องกับลักษณะความแตกต่างของดอกจากต้นหน่อไม้ฝรั่งตัวผู้และต้นตัวเมีย นอกจากนี้ยังพบว่าต้นหน่อไม้ฝรั่งชนิดตัวผู้ที่ผ่านการคัดเลือกด้วยวิธี PCR หลังจากย้ายออกปลูกในแปลงให้ดอกเป็นชนิดดอกตัวผู้ทั้งหมด
บทคัดย่อ (EN): Asparagus male flowers collected from field grown plants at Kamphaengsaen, Nakhon Pathom, were used for anther culture in vitro. Flowers sorted by sizes, 2-3 mm in length, were surfaced sterilized by soaking in 10% and 5% (V/V) clorox solutions for 10 and 5 minutes, respectively, followed by thoroughly rinsed with sterile distilled water. Anthers were dissected then placed onto solidified MS medium containing 60 g/l sucrose, 800 mg/l glutamine, 500 mg/l casein enzymatic hydrolysate (CEH), 2 g/l yeast extract, 2 mg/l NAA, 1 mg/l BA and 10 g/l agar agar (YNB). The pretreatment at 34oC for 7 days in darkness was necessary for embryogenic callus induction, prior to transferring to 30oC for 30 days. Embryogenic callus was observed within 30 days at the percentage of 17.13. Somatic embryogenesis and plantlet induction was achieved when these embryogenic callus were transferred onto solidified MS medium containing 25 g/l sucrose, 55 mg/l adenine sulfate, 500 mg/l malt extract, 191.9 mg/l NaH2PO4, 0.06 mg/l NAA, 0.1 mg/l kinetin and 10 g/l agar agar (AS1) at 26+1oC, 2000 lux light intensity, 12 hr photoperiods. Root tips of some regenerated plantlets were fixed for chromosome counting using Feulgen’s staining technique. Chromosome numbers of these planlets were haploids (1n=10) and diploids (2n=20) at 84.6% and 15.4%, respectively. The selected haploid asparagus, 10 clones derived from anther culture were cultured in solidified AS1 medium at 26+1oC, 2000 lux light intensity, 12 hr photoperiods for multiplication. In the meantime, these haploid asparagus clones were treated by colchicines treatments in order to chromosome doubling. Various concentrations, 0-1% and time duration, 0-48 hrs of colchicines treatments were conducted. Shoot induction was obtained from the explants treated with 0.1-1% colchicines at any duration at the rate of 13.3-60% in 1-2 months. However, it was found that all selected asparagus clones were spontaneous double chromosome by either Feulgen’s staining or flow cytometry. In addition, male and female asparagus were distinguished identification by using PCR technique. Primers of 5’-ATATGCGAGGCATTTGGAAG-3’ and 5’-CTGCTACTGAGATACCTTAC-3’ were used for PCR. The PCR result revealed that only male plants showed positive band at 300 bp. which was related to sex phenotype of the asparagus flower. In addition the flowers from all of asparagus plants grown in the field were male which were confirmed by PCR result. Asparagus male flowers collected from field grown plants at Kamphaengsaen, Nakhon Pathom, were used for anther culture in vitro. Flowers sorted by sizes, 2-3 mm in length, were surfaced sterilized by soaking in 10% and 5% (V/V) clorox solutions for 10 and 5 minutes, respectively, followed by thoroughly rinsed with sterile distilled water. Anthers were dissected then placed onto solidified MS medium containing 60 g/l sucrose, 800 mg/l glutamine, 500 mg/l casein enzymatic hydrolysate (CEH), 2 g/l yeast extract, 2 mg/l NAA, 1 mg/l BA and 10 g/l agar agar (YNB). The pretreatment at 34oC for 7 days in darkness was necessary for embryogenic callus induction, prior to transferring to 30oC for 30 days. Embryogenic callus was observed within 30 days at the percentage of 17.13. Somatic embryogenesis and plantlet induction was achieved when these embryogenic callus were transferred onto solidified MS medium containing 25 g/l sucrose, 55 mg/l adenine sulfate, 500 mg/l malt extract, 191.9 mg/l NaH2PO4, 0.06 mg/l NAA, 0.1 mg/l kinetin and 10 g/l agar agar (AS1) at 26+1oC, 2000 lux light intensity, 12 hr photoperiods. Root tips of some regenerated plantlets were fixed for chromosome counting using Feulgen’s staining technique. Chromosome numbers of these planlets were haploids (1n=10) and diploids (2n=20) at 84.6% and 15.4%, respectively. The selected haploid asparagus, 10 clones derived from anther culture were cultured in solidified AS1 medium at 26+1oC, 2000 lux light intensity, 12 hr photoperiods for multiplication. In the meantime, these haploid asparagus clones were treated by colchicines treatments in order to chromosome doubling. Various concentrations, 0-1% and time duration, 0-48 hrs of colchicines treatments were conducted. Shoot induction was obtained from the explants treated with 0.1-1% colchicines at any duration at the rate of 13.3-60% in 1-2 months. However, it was found that all selected asparagus clones were spontaneous double chromosome by either Feulgen’s staining or flow cytometry. In addition, male and female asparagus were distinguished identification by using PCR technique. Primers of 5’-ATATGCGAGGCATTTGGAAG-3’ and 5’-CTGCTACTGAGATACCTTAC-3’ were used for PCR. The PCR result revealed that only male plants showed positive band at 300 bp. which was related to sex phenotype of the asparagus flower. In addition the flowers from all of asparagus plants grown in the field were male which were confirmed by PCR result.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: การเพาะเลี้ยงอับเรณู
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

มณฑา วงศ์มณีโรจน์. "การคัดเลือก และขยายโคลนของต้นหน่อไม้ฝรั่งพันธุ์ดีจากการเพาะเลี้ยงอับละอองเรณูAssessment and multiplication of the selected asparagus (Asparagus officinalis L.) clones derived from anther culture". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2554

มณฑา วงศ์มณีโรจน์. "การคัดเลือก และขยายโคลนของต้นหน่อไม้ฝรั่งพันธุ์ดีจากการเพาะเลี้ยงอับละอองเรณูAssessment and multiplication of the selected asparagus (Asparagus officinalis L.) clones derived from anther culture". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2554. Print.



TARR Wordcloud:
การคัดเลือก และขยายโคลนของต้นหน่อไม้ฝรั่งพันธุ์ดีจากการเพาะเลี้ยงอับละอองเรณู
มณฑา วงศ์มณีโรจน์
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2554
การใช้เทคโนโลยีการปลูกหน่อไม้ฝรั่งจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อของเกษตรกรในจังหวัดสุพรรณบุรี การขยายพันธุ์ต้น Tea Tree โดยวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การขยายพันธุ์สับปะรดประดับโดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การผลิตต้นพันธุ์หน่อไม้ฝรั่ง เพื่อการพาณิชย์ในจังหวัดราชบุรี การขยายพันธุ์กล้วยไม้ด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ศึกษาการขยายพันธุ์ผักย่านางด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การศึกษาคุณภาพเมล็ดพันธุ์หน่อไม้ฝรั่ง 5 พันธุ์ ความพึงพอใจของเกษตรกรต่อการส่งเสริมการปลูกหน่อไม้ฝรั่งจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื้อของศูนย์ส่งเสริมและพัฒนอาชีพการเกษตร จังหวัดสุพรรณบุรี (พันธุ์พืชเพาะเลี้ยง) โครงการวิจัยการขยายพันธุ์และปรับปรุงพันธุ์พืชโดยใช้เทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การขยายสายพันธุ์กล้วยไม้รองเท้านารีโดยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair