สืบค้นงานวิจัย
การสลายเซลล์ด้วยด่างอย่างต่อเนื่องผ่านท่อผสมที่ไม่มีการกวนเพื่อผลิตพลาสมิดสำหรับยีนบำบัด
ธัญวัฒน์ กาญจนศร - มหาวิทยาลัยบูรพา
ชื่อเรื่อง: การสลายเซลล์ด้วยด่างอย่างต่อเนื่องผ่านท่อผสมที่ไม่มีการกวนเพื่อผลิตพลาสมิดสำหรับยีนบำบัด
ชื่อเรื่อง (EN): Continuous alkaline-cell lysis through in-line static mixer for the production of pDNA for gene therapy
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ธัญวัฒน์ กาญจนศร
บทคัดย่อ: ปฏิกรณ์แบบท่อที่ไม่มีการเคลื่อนไหวถูกประดิษฐ์ขึ้นเพื่อใช้สลายเซลล์ E.colipTX0161 และทำให้ lysate เป็นกลางเพื่อสกัดพลาสมิดดีเอ็นเออย่างต่อเนื่องอย่างมีประสิทธิภาพเซลล์ถูกสลายด้วยด่างเข้มข้นผสม 1% SDS และ lysate ถูกทำให้เป็นกลางด้วยอัตราการไหลของเซลล์แขวนลอย: สารละายสำหรับสลายเซลล์ : สารละลายที่ทำให้ lysate เป็นกลาง ที่อัตราส่วนต่าง ๆ คือ 125:250:125 มิลลิลิตรต่อนาที 250:500:250 มิลลิลิตรต่อนาที และ 500:1,000:500 มิลลิลิตรต่อนาที จากการทดลองพบว่าความหนือของ lysate และขนาดของเศษเซลล์ในขั้นตอนของการทำให้ lysate เป็นกลางลดลงและความหนาแน่นของเศษเซลล์เพิ่มขึ้น เมื่อระยะทางและอัตราการไหลเพิ่มขึ้น ผลผลิตของพลาสมิดที่ดีได้จากการทำงานที่อัตราการไหล 125:250:125 มิลลิลิตรต่อนาที 250:500:250 มิลลิลิตรต่อนาที ที่ระยะทางของท่อไม่เกิน 0.6 เมตร การกวนผสมที่ไม่ดีและผลผลิตพลาสมิดต่ำนั้นได้จากที่อัตราการไหล และ 500:1,000:500 มิลลิลิตรต่อนาที เนื่องจากระยะเวลาในการทำงานน้อยกว่า 2 วินาที และที่ระยะทางของท่อเกิน 0.6 เมตร ของทุกการทดลอง เพื่อทดสอบว่า In-Line Static Mixer ทำงานร่วมกับการใช้ถังกวนช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการสกัดพลาสมิดหรือไม่ โดยทำการสลายเซลล์ผ่าน In-Line Static Mixer จากนั้นสลายต่อในถังกวนแล้วตามด้วยการทำให้ lysate เป็นกลางในถังกวนเช่นกัน ผลปรากฎวา In-Line Static Mixer เพียงอย่างเดียวสามารถใช้สลายเซลล์ได้อย่างสมบูรณ์ ส่วนการสลายเซลล์โดยการใช้ถังกวนเพียงอย่างเดียวก็ได้การทดลองด้วยทั้งสามวิธีนี้พบว่าการสลายเซลล์และการทำให้ lysate เป็นกลางผ่าน In-Line Static Mixer เป็นวิธีที่ให้ผลดีที่สุด เพื่อพัฒนากระบวนการสกัดพลาสมิดต่อไปได้มีการศึกษาโดยการติดตั้งระบบการกรองเข้าที่ปลายของ In-Line Static Mixer ต่อจากสิ้นสุดขั้นตอนของการทำให้ lysate เป็นกลางเพื่อกรองเศษเซลล์ ปรากฎว่าให้ผลดีคือให้ปริมาณพลาสมิดสูงกว่าที่ไม่มีการกรอง การประดิษฐ์นี้ให้ผลดีและมีศักยภาพสำหรับการผลิตพลาสมิดในระดับอุตสาหกรรมเพื่อใช้สำหรับทำยีนบำบัดต่อไป
บทคัดย่อ (EN): An In-Line Static Mixer (ISM) was invented to lyse E.coli pTX0161 cells and to neutralise the cell lysate continuously and efficiently for the extraction of plasmid DNA (pDNA). Cells were lysed using concentrated alkaline with 1% SDS and the lysate was neutralised at feeding rates of cell suspension: lysis soultion: neutralisation solution of 125:250:125 mL/min, 250:500:250 mL/min, and 500:1,000:500 mL/min. Lysate viscosity decreased as distances and feeding rates increased. Good plasmid yields were obtained from both lysis and neutralisation at the feeding rate ratios of 125:250:125 mL/min and 250:500:250 mL/min within mixing distances <= 0.6 m. Poor mixing performance and plasmid yield were obtained at a high feeding rate of 500:1000:500 mL/min because the residence reaction times were less than 2s and the mixing distances >= 0.6 m at all feeding rates. Whether cell lysis using In-Line Static Mixer together with a stirred tank enhanced cell lysis, cells also were lysed through the In-Line Static Mixer and then the lysis was continued in a stirreed tank and followed by neutralisation in the same tank. Result showed that only In-Line Static Mixer was sufficient for complete cell lysis. Cell lysis and lysate and lysate neutralisation in the stirred tank, without using In-Line Static Mixer, was also carried out. Among those methods, cell lysis and lysate neutralisation through In-Line Static Mixer showed superb performance and plasmid yield over the other two methods. For further development of the plasmid extraction process, a filtration unit was integrated at the end of the In-Line Static Mixer following neutralisation step in order to separate neutralised flocs. With this system, a high plasmid yield obtained. This invention showed excellent performance with scaleable potential for the commercial manufacture of pDNA for gene therapy.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=95&RecId=11156&obj_id=88096
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยบูรพา
คำสำคัญ: พลาสมิด
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยบูรพา
รายละเอียด: An In-Line Static Mixer (ISM) was invented to lyse E.coli pTX0161 cells and to neutralise the cell lysate continuously and efficiently for the extraction of plasmid DNA (pDNA). Cells were lysed using concentrated alkaline with 1% SDS and the lysate was neutralised at feeding rates of cell suspension: lysis soultion: neutralisation solution of 125:250:125 mL/min, 250:500:250 mL/min, and 500:1,000:500 mL/min. Lysate viscosity decreased as distances and feeding rates increased. Good plasmid yields were obtained from both lysis and neutralisation at the feeding rate ratios of 125:250:125 mL/min and 250:500:250 mL/min within mixing distances = 0.6 m at all feeding rates. Whether cell lysis using In-Line Static Mixer together with a stirred tank enhanced cell lysis, cells also were lysed through the In-Line Static Mixer and then the lysis was continued in a stirreed tank and followed by neutralisation in the same tank. Result showed that only In-Line Static Mixer was sufficient for complete cell lysis. Cell lysis and lysate and lysate neutralisation in the stirred tank, without using In-Line Static Mixer, was also carried out. Among those methods, cell lysis and lysate neutralisation through In-Line Static Mixer showed superb performance and plasmid yield over the other two methods. For further development of the plasmid extraction process, a filtration unit was integrated at the end of the In-Line Static Mixer following neutralisation step in order to separate neutralised flocs. With this system, a high plasmid yield obtained. This invention showed excellent performance with scaleable potential for the commercial manufacture of pDNA for gene therapy.
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ธัญวัฒน์ กาญจนศร. "การสลายเซลล์ด้วยด่างอย่างต่อเนื่องผ่านท่อผสมที่ไม่มีการกวนเพื่อผลิตพลาสมิดสำหรับยีนบำบัดContinuous alkaline-cell lysis through in-line static mixer for the production of pDNA for gene therapy". มหาวิทยาลัยบูรพา. 2548

ธัญวัฒน์ กาญจนศร. "การสลายเซลล์ด้วยด่างอย่างต่อเนื่องผ่านท่อผสมที่ไม่มีการกวนเพื่อผลิตพลาสมิดสำหรับยีนบำบัดContinuous alkaline-cell lysis through in-line static mixer for the production of pDNA for gene therapy". มหาวิทยาลัยบูรพา. 2548. Print.



TARR Wordcloud:
การสลายเซลล์ด้วยด่างอย่างต่อเนื่องผ่านท่อผสมที่ไม่มีการกวนเพื่อผลิตพลาสมิดสำหรับยีนบำบัด
ธัญวัฒน์ กาญจนศร
มหาวิทยาลัยบูรพา
2548
การแยกยีน NADPH cytochrome P450 oxidoreductase [XyCPR] ที่เกี่ยวข้องในวิถีการสังเคราะห์ depudecin จาก Xylaria sp. BCC1067 สายพันธุ์กลายพันธุ์ T170 การสลายแป้งให้เป็นน้ำตาลในปฏิกรณ์ชีวภาพแบบถังกวน พัฒนาการของเซลล์เพศและวงสืบพันธุ์ของหอยตลับ Meretrix meretrix (Linnaeus, 1758) (Bivalvia : Veneridae) จากบริเวณหาดบางแสน จังหวัดชลบุรี พลาสมิดโพรไฟล์ของไรโซเบียมในถั่วเขียว Vigna radiata (L.) Wilczek จากพื้นที่โครงการสร้างป่าและป่าพันธุกรรมพืช จังหวัดนครราชสีมา ความหลากหลายทางพันธุกรรมของราที่สามารถย่อยสลายเซลลูโลสในพื้นที่โครงการสร้างป่าตามแนวพระราชดำริ และป่าพันธุกรรมพืช อ.ครบุรี จังหวัดนครราชสีมา การศึกษาผลของพลาสมิดที่โคลนด้วยยีนอินเตอร์เฟอรอนแกมมาของสุกรต่อการแบ่งตัวของ Porcine reproductive and respiratory syndrome virus ในเซลล์ MARC-145 การออกแบบและวิเคราะห์พลังงานของเตาปฏิกรณ์แบบกึ่งต่อเนื่องสำหรับการแยกสลายซังข้าวโพดด้วยความร้อน สภาวะที่เหมาะสมของการบำบัดไนเตรตในน้ำทะเล ด้วยระบบบำบัดไนเตรตแบบท่อสำหรับบ่อเลี้ยงกุ้งทะเล ผลของระยะเวลาการกวนผสมและความเข้มข้นของของแข็งทั้งหมดต่อประสิทธิภาพในการผลิตก๊าซชีวภาพจากหญ้าเนเปียร์ปากช่อง 1 โดยถังปฏิกรณ์แบบกวนสมบูรณ์ การพัฒนาระบบบำบัดน้ำเสียสีย้อมแบบผสม
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair