สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์โพลิเมอเรสเชนรีเอคชันเพื่อการตรวจ วิเคราะห์ Salmonella spp. และ Campylobacter spp. ที่ปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
สร้อยทอง สายหยุดทอง - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์โพลิเมอเรสเชนรีเอคชันเพื่อการตรวจ วิเคราะห์ Salmonella spp. และ Campylobacter spp. ที่ปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
ชื่อเรื่อง (EN): The development of multiplex Polymerase Chain Reaction (PCR)technique for the detection of Salmonella spp. and Campylobacter spp. in meat products
บทคัดย่อ: งานวิจัยนี้ได้พัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ในการวิเคราะห์ Campylobacter jejuni และ Campylobacter coli โดยได้นำ primer ที่มีความจำเพาะต่อ genus และ species มาทำการศึกษา พบว่า primer มีความจำเพาะสูงไม่มีผลบวกปลอมต่อเชื้อจุลินทรีย์ในอาหารที่นำมาทดสอบ 14 genus มีความไวในการตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อได้ต่ำสุดที่ 1 cell ในตัวอย่างอาหาร 25 กรัม ผลการศึกษาปัจจัยที่เหมาะสมในการพัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ โดยเปรียบเทียบการเจริญเติบโตของเชื้อในอาหารเหลวชนิดต่างๆก่อนนำมาสกัดแยกดีเอ็นเอ พบว่า PCR product สามารถตรวจสอบได้จากเชื้อที่เจริญในอาหารเลี้ยงเชื้อ Bolton broth, Brain heart infusion,Tryptic soy broth, Lactose broth วิธีสกัดดีเอ็นเอที่เหมาะสมสามารถใช้ได้ทั้งวิธีต้มสกัดและวิธีสกัดด้วย Proteinase K นอกจากนี้ได้ศึกษาปริมาณ primer, reagent, อุณหภูมิและ จำนวนรอบที่เหมาะสมของเทคนิคนี้ด้วย จากการศึกษาการปนเปื้อนของ C. jejuni และ C. coli ในผลิตภัณฑ์เนื้อไก่ที่เก็บตัวอย่างจากในตลาดสดและ Supermarket แหล่งละ 150 ตัวอย่าง พบตัวอย่างที่มีการปนเปื้อนเชื้อ Campylobacter 71 ตัวอย่าง คิดเป็น 47.33% ตัวอย่างจากตลาดสดมีการปนเปื้อน C. jejuni และ C. coli คิดเป็น 36.67% และ 20.67% ตามลำดับ ส่วนตัวอย่างจาก Supermarket มีการปนเปื้อน C. jejuni และ C. coli คิดเป็น 24.67% และ 11.33% ตามลำดับ โดยการตรวจวิเคราะห์ด้วยวิธี mPCR สามารถพบตัวอย่างที่มีการปนเปื้อนเท่ากับผลการทดลองที่ได้จากการเพาะเลี้ยง (Conventional method)งานวิจัยนี้ได้พัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ในการวิเคราะห์ Campylobacter jejuni และ Campylobacter coli โดยได้นำ primer ที่มีความจำเพาะต่อ genus และ species มาทำการศึกษา พบว่า primer มีความจำเพาะสูงไม่มีผลบวกปลอมต่อเชื้อจุลินทรีย์ในอาหารที่นำมาทดสอบ 14 genus มีความไวในการตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อได้ต่ำสุดที่ 1 cell ในตัวอย่างอาหาร 25 กรัม ผลการศึกษาปัจจัยที่เหมาะสมในการพัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ โดยเปรียบเทียบการเจริญเติบโตของเชื้อในอาหารเหลวชนิดต่างๆก่อนนำมาสกัดแยกดีเอ็นเอ พบว่า PCR product สามารถตรวจสอบได้จากเชื้อที่เจริญในอาหารเลี้ยงเชื้อ Bolton broth, Brain heart infusion,Tryptic soy broth, Lactose broth วิธีสกัดดีเอ็นเอที่เหมาะสมสามารถใช้ได้ทั้งวิธีต้มสกัดและวิธีสกัดด้วย Proteinase K นอกจากนี้ได้ศึกษาปริมาณ primer, reagent, อุณหภูมิและ จำนวนรอบที่เหมาะสมของเทคนิคนี้ด้วย จากการศึกษาการปนเปื้อนของ C. jejuni และ C. coli ในผลิตภัณฑ์เนื้อไก่ที่เก็บตัวอย่างจากในตลาดสดและ Supermarket แหล่งละ 150 ตัวอย่าง พบตัวอย่างที่มีการปนเปื้อนเชื้อ Campylobacter 71 ตัวอย่าง คิดเป็น 47.33% ตัวอย่างจากตลาดสดมีการปนเปื้อน C. jejuni และ C. coli คิดเป็น 36.67% และ 20.67% ตามลำดับ ส่วนตัวอย่างจาก Supermarket มีการปนเปื้อน C. jejuni และ C. coli คิดเป็น 24.67% และ 11.33% ตามลำดับ โดยการตรวจวิเคราะห์ด้วยวิธี mPCR สามารถพบตัวอย่างที่มีการปนเปื้อนเท่ากับผลการทดลองที่ได้จากการเพาะเลี้ยง (Conventional method)
บทคัดย่อ (EN): This study aimed at developing of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli multiplex PCR. Primers used in this study were specific to genus and species. The study showed no cross-positive result to 14 genus of other food microorganisms. The sensitivity of this technique for contaminated Campylobacter analysis from chicken meat was 1 cell per 25 gram sample. The comparison of microbiological medium (broth) for Campylobacter culture before DNA extraction was studied. There is no significant difference in specific PCR band from Bolton broth, Brain heart infusion,Tryptic soy broth and Lactose broth.DNA could be extracted by boiling method and Proteinase K.The optimum condition of primer, reagent, temperature and cycling number were studied. The study of C. jejuni and C. coli contamination in chicken meat from fresh market and supermarket showed that out of 150 fresh market samples, the contaminated C. jejuni and C. coli were found 36.67% and 20.67%, respectively., whereas , the positive number of C. jejuni and C. coli were found 24.67% and 11.33% respectively from 150 supermarket samples. The positive results in conventional method and multiplex PCR were found equally. Multiplex PCR developed in this study has high sensitivity and efficiency to detect contaminated Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in chicken meat. This study aimed at developing of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli multiplex PCR. Primers used in this study were specific to genus and species. The study showed no cross-positive result to 14 genus of other food microorganisms. The sensitivity of this technique for contaminated Campylobacter analysis from chicken meat was 1 cell per 25 gram sample. The comparison of microbiological medium (broth) for Campylobacter culture before DNA extraction was studied. There is no significant difference in specific PCR band from Bolton broth, Brain heart infusion,Tryptic soy broth and Lactose broth.DNA could be extracted by boiling method and Proteinase K.The optimum condition of primer, reagent, temperature and cycling number were studied. The study of C. jejuni and C. coli contamination in chicken meat from fresh market and supermarket showed that out of 150 fresh market samples, the contaminated C. jejuni and C. coli were found 36.67% and 20.67%, respectively., whereas , the positive number of C. jejuni and C. coli were found 24.67% and 11.33% respectively from 150 supermarket samples. The positive results in conventional method and multiplex PCR were found equally. Multiplex PCR developed in this study has high sensitivity and efficiency to detect contaminated Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in chicken meat.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: ผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การพัฒนาเทคนิคมัลติเพล็กซ์โพลิเมอเรสเชนรีเอคชันเพื่อการตรวจ วิเคราะห์ Salmonella spp. และ Campylobacter spp. ที่ปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2554
การพัฒนาวิธีตรวจหาเชื้อ Campylobacter spp., Salmonella spp. และ Escherichia coli ด้วยวิธีมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ Developed method for detection Campylobacter spp., Salmonella spp. and Escherichia coli by ผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์กับวัตถุเจือปนอาหาร ไคโตซาน: ทางเลือกใหม่ของสารต้านเชื้อจุลินทรีย์และสารต้านอนุมูลอิสระในเนื้อสัตว์และผลิตภัณฑ์ การพัฒนาผงหมักไนไตรท์จากธรรมชาติและกล้าเชื้อเพื่อลดสารก่อมะเร็งในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์หมักของไทย การใช้เครื่องเทศและสมุนไพรไทยเป็นสารออกฤทธิ์ชีวภาพและเพื่อเพิ่มคุณค่าผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้าในย่านความถี่วิทยุในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ ผลของสารเคลือบผสมไคโตซานและสารสกัดสาหร่ายสไปโรไจราในการต้านจุลินทรีย์และต้านอนุมูลอิสระในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ ความสัมพันธ์ของโครงสร้างทางเคมีของสารโพลีฟีนอลต่อการยับยั้งการเกิดสารก่อมะเร็งไนโตรซามีนในระบบจำลองและการประยุกต์ใช้ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ การตรวจวิเคราะห์ Campylobacter spp. ที่ปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์อาหาร
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก