สืบค้นงานวิจัย
โครงการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพเพื่อวิจัยพัฒนาพืชและจุลินทรีย์ในสภาวะโลกร้อน
สุภาวดี ง้อเหรียญ - กรมวิชาการเกษตร
ชื่อเรื่อง: โครงการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพเพื่อวิจัยพัฒนาพืชและจุลินทรีย์ในสภาวะโลกร้อน
ชื่อเรื่อง (EN): Biotechnology Research and Development of Plants and Microbes under Global Warming Condition
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: สุภาวดี ง้อเหรียญ
บทคัดย่อ: สภาวะโลกร้อน (Global Warming) หรือ สภาวะภูมิอากาศเปลี่ยนแปลง (Climate Change) ส่งผลกระทบต่อพื้นที่เกษตรกรรมโดยตรงทั้งปัญหาโรคพืช แมลงศัตรูพืช และสภาพแวดล้อมไม่เหมาะสม เช่น สภาวะขาดน้ำ ดินเค็ม และน้ำท่วมฉับพลัน เป็นต้น โครงการวิจัยนี้วัตถุประสงค์เพื่อ 1. ค้นหายีนและโคลนยีนที่เกี่ยวข้องความทนทานต่อสภาพแวดล้อมที่ไม่เหมาะสม และสร้างชุด cassette ยีน สำหรับนำไปใช้ในการปรับปรุงพันธุ์พืชเพื่อให้ทนต่อสภาวะแวดล้อมไม่เหมาะสม และ 2. เพื่อปรับปรุงพันธุ์พืชและพัฒนาเทคนิคการถ่ายฝากยีนที่เกี่ยวข้องความทนทานต่อสภาพแวดล้อมที่ไม่เหมาะสม โดยใช้เทคนิคการถ่ายยีนเข้าสู่พืชและเทคนิค Ovary Drip งานวิจัยนี้ได้ทำการโคลนยีนที่ทนต่อสภาวะขาดน้ำในข้าวโพดพันธุ์ทนแล้ง ได้แก่ ยีน SINA3 และ SINAT3 จากข้าวโพดพันธุ์ทนแล้ง 4 พันธุ์ ได้แก่ ตากฟ้า 1 (TF1), ตากฟ้า 3 (TF3), นครสวรรค์ 3 (NS3) และ นครสวรรค์ 1 (NS1) โดยใช้เทคนิค RT–PCR พบว่า สามารถเพิ่มปริมาณยีน SINA3 และ SINAT3 มีขนาดเท่ากับ 1,026 คู่เบส และ 1,050 คู่เบส ตามลำดับ สามารถถอดรหัสเป็นกรดอะมิโนของยีนได้เท่ากับ 341 และ 349 amino acids จากนั้นทำการสร้างชุด cassette ยีน โดยการเชื่อมต่อชิ้นยีน ZmSINA3 และ ZmSINAT3 เข้ากับ plant expression vector (pCAMBIA2300) ที่ประกอบด้วยโปรโมเตอร์ (35SCaMV) และเทอร์มิเนเตอร์ (NOS) ได้พลาสมิดสายผสม pCAMBIA2300 – ZmSINA3 และ pCAMBIA2300 – ZmSINAT3 มีขนาด 10.6 และ 10.7 กิโลเบส ตามลำดับ และได้มีการนำชุด cassette ยีน pCAMBIA2300 – ZmSINA3 ไปถ่ายฝากยีนเข้าสู่พืชต้นแบบ (ยาสูบ) เพื่อศึกษาการแสดงออกของยีนที่ทนต่อสภาวะเครียดในยาสูบ โดยการเพาะเลี้ยงยาสูบที่ได้รับการถ่ายยีน SINA3 บนอาหารสูตร MS ซึ่งแบ่งเป็น 2 กลุ่มคือ สภาวะขาดน้ำ เติม PEG 6000 ความเข้มข้น 0, 10, 15, 20 และ 25 เปอร์เซ็นต์ (w/v) และสภาวะเครียดเกลือ เติม NaCl ความเข้มข้น 0, 1, 1.5, 2, 2.5 และ 3 เปอร์เซ็นต์ (w/v) เปรียบเทียบกับยาสูบปกติที่เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่เติม PEG6000 และ NaCl ระดับความเข้มข้นเดียวกันเป็นชุดควบคุม เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 30 วัน พบว่า ต้นยาสูบที่มียีน SINA3 ให้ผลการทดลองสอดคล้องกับต้นยาสูบชุดควบคุม ทั้งน้ำหนักสด ความสูงของต้น และจำนวนใบ แสดงว่ายีน SINA3 ที่ถ่ายฝากเข้าสู่ยาสูบ แบบ over expression นั้น ไม่สามารถทนทานต่อสภาวะเครียดเกลือและสภาวะขาดน้ำได้ งานวิจัยการศึกษาและค้นหายีนที่ตอบสนองต่อสภาวะขาดน้ำของข้าวโพดพันธุ์นครสวรรค์ 3 (NSW3) โดยอาศัยเทคนิค PCR พบว่า เมื่อนำ cDNA ของใบข้าวโพดขาดน้ำนาน 7 วัน และ cDNA จากใบข้าวโพดให้น้ำปกติ (control) มาทำปฏิกิริยา PCR โดยใช้ arbitrary ACP primers จำนวน 12 ไพรเมอร์ สามารถตรวจหาการแสดงออกของยีนที่แตกต่างกันได้ (differentially expressed genes) และพบ ACP primers จำนวน 2 คู่ ที่ให้แถบดีเอ็นเอของยีนที่แตกต่างกันชัดเจนที่สุด (up-regulated) ได้แก่ ACP2 และ ACP12 ซึ่งข้อมูลที่ได้อาจนำไปสู่การศึกษาหน้าที่ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อสภาวะขาดน้ำในพืชและพัฒนาการปรับปรุงพันธุ์พืชทนแล้งต่อไป สำหรับงานวิจัยการปรับปรุงและถ่ายฝากยีนทนทานสภาพแวดล้อม OsSKIPa สู่ถั่วเหลืองโปรตีนสูงโดยเทคนิค Ovary drip นั้นเป็นการพัฒนาเทคนิคในการถ่ายยีน ซึ่งเป็นเทคนิคใหม่ที่มีประโยชน์อย่างมากเพราะสามารถลดข้อกังวลที่เกิดจากการใช้เวคเตอร์ เช่น ยีนต้านทานต่อสารปฏิชีวนะและยีนที่ไม่พึงประสงค์อื่นๆ ซึ่งจะติดมากับเวคเตอร์ ในขณะที่ linear gene cassette ที่ออกแบบไว้จะมีเพียงยีนที่เราต้องการเท่านั้น งานวิจัยนี้ได้ทำการออกแบบ linear gene cassette ของยีน OsSKIPa สำหรับใช้ในการถ่ายฝากยีนเข้าสู่ถั่วเหลืองโดยวิธีการ Ovary drip ผลจากการถ่ายยีน OsSKIPa เข้าสู่ถั่วเหลืองพันธุ์ไทยนี้ยังไม่พบ Insert จาก linear gene cassette ในถั่วเหลืองรุ่นลูกที่ได้รับการถ่ายยีนโดยวิธีดังกล่าวซึ่งสาเหตุอาจเกิดจากสภาวะแวดล้อมและอุณหภูมิของประเทศไทยที่ไม่เหมาะสมต่อวิธีการดังกล่าวและทำให้ไม่เกิดการถ่ายยีน
บทคัดย่อ (EN): Global warming or climate change is a directly affect to agricultural crops, diseases, insect pests and abiotic stress such as drought salinity and flooding, etc. This research study aimed to (1.) gene discovery and clone to abiotic stress and invent expression cassette for applying to plant variety improvement particularly against abiotic stress; and (2.) plant variety improvement and gene transfer technique improvement to abiotic stress by plant gene transfer and ovary drip techniques. In this study, two full-length cDNA sequences of corn (Zea mays L.) encoded to ZmSINA3 and ZmSINAT3 were isolated from four corn variety names TAKFA 1, TAKFA 3, NAKORNSAWAN 3 and NAKORNSAWAN 1 via RT – PCR based method. The SINA3 and SINAT3 gene sequence contains a fragment of 1,026 and 1,050 bp complete ORF, encoded to 341 and 349 amino acids polypeptide. A 1,026 bp and 1,050 bp fragment of ZmSINA3 and ZmSINAT3 gene were inserted into plant expression vector pCAMBIA2300 containing 35SCaMV promoter and NOS terminator. NPTII was used as a selectable marker in this selection. It were found that the total size of derived over – expression cassette (pCAMBIA2300 – ZmSINA3 and pCAMBIA2300 – ZmSINAT3) were 10.6 and 10.7 kb. The SINA3 gene was constructed into a plant expression vector and transformed into Nicotiana tabacum. Transgenic tobaccos were grown in MS medium. Drought was induced by adding Polyethylene glycol 6000 (PEG 6000) to the culture medium at concentrations of 0, 10, 15, 20 and 25 % (w/v), while salinity was induced by adding sodium chloride (NaCl) to the medium at concentrations of 0, 1, 1.5, 2, 2.5 and 3 % (w/v). The plant growth parameters were analyzed after 30 days in culture. Differentiation fresh weight, number of leaves and shoot length of the transgenic plants were similar to those of wild-type plants. The result showed that overexpression of SINA3 gene do not tolerant to salt and drought stresses in transgenic tobacco. The research project of genes discovery expressed in response to drought stress in the drought tolerant Maize (NSW3 variety) by PCR technique, we have used an annealing control primer (ACP) based reverse transcription polymerase chain reaction to identify drought-stress-induced differentially expressed genes in cDNA of maize leaves at 7 days after water depletion and cDNA from maize leaves to usually water (control) using 12 ACP-based RT-PCR screening method, two up-regulated ACPs were identified which were ACP2 and ACP12. The information might be helpful for better understanding of drought stress mechanism in maize to further gaining information about the plant genetic improvement for drought tolerance in plant. The research project of genetic manipulation and gene insertion of OsSKIPa, a multistress tolerance gene to high protein soybean using ovary drip transformation, we have the development of direct transformation become very useful and more attractive to researcher because of the concerning on using genetic maker in the vector such as antibiotic gene or other illegal inserts. With directed transformation method, linear gene cassette will be the only insert to plant genome. This study is intended to transform drought resistance gene OsSKIPa to soybean via Ovary drip. The experiment was done successfully with the synthesis of linear gene cassette and development of the protocol via remove mostly styles and direct DNA drip to the soybean flower. Despite all efforts and many tries, the transformation frequencies come out o% and no Insert found in F1 Thai soybean cultivar which may cause from high temperature and inappropriate environment & condition.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: กรมวิชาการเกษตร
คำสำคัญ: โปรตีนสูง
คำสำคัญ (EN): Sorghum bicolor
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
โครงการวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพเพื่อวิจัยพัฒนาพืชและจุลินทรีย์ในสภาวะโลกร้อน
กรมวิชาการเกษตร
30 กันยายน 2558
โครงการวิจัยคัดเลือกจุลินทรีย์เพิ่มความอุดมสมบูรณ์และป้องกันโรคพืชในดินเพื่อเพิ่มผลผลิตพืช ผลกระทบของสภาวะโลกร้อนที่มีต่อหญ้าทะเลในจังหวัดตรัง เทคโนโลยีชีวภาพด้านการดัดแปลงพันธุกรรมพืชเพื่อเป็นอาหารสัตว์ การพัฒนาพันธุ์ข้าวเพื่อลดผลกระทบของสภาวะโลกร้อนในระยะสืบพันธุ์และให้ผลผลิต การใช้ประโยชน์จากจุลินทรีย์ในการควบคุมทางชีวภาพ เทคโนโลยีการผลิตพืชแห่งศตวรรษที่ 21 ศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการเจริญของจุลินทรีย์เพื่อผลิตผลิตภัณฑ์จุลินทรีย์ย่อยสลายตะกอนอินทรีย์ เปรียบเทียบการใช้ผลิตภัณฑ์เทคโนโลยีชีวภาพของกรมพัฒนาที่ดินชนิดต่างๆเพื่อ เพิ่มผลผลิตอ้อยอย่างยั่งยืน การวิจัยและพัฒนากั้งตั๊กแตนเพื่อเพิ่มมูลค่าทางเศรษฐกิจ แผนงานวิจัยและพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก