สืบค้นงานวิจัย
การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม
Panu Ruangjan - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม
ชื่อเรื่อง (EN): Analysis of papaya ringspot virus transgenes in transformed papaya plants
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Panu Ruangjan
บทคัดย่อ: ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนก่อโรคร้ายแรงในมะละกอ ก่อนหน้านี้มีการแสดงให้เห็นว่า การนำยีนโปรตีนเปลือกหุ้มไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน (cp) เข้าสู่มะละกอสามารถสร้าง มะละกอต้านทานไวรัสนี้ได้ มะละกอดัดแปรพันธุกรรม 11 สายพันธุ์ (G1, G2, G3, G5, T1, T2, T3, T4, T5, T6 และ T7) ถูกสร้างขึ้นและตรวจสอบการต้านทานไวรัสที่ plant virology laboratory พบว่ามีเพียง 4 สายพันธุ์ (G2, G3, G5 และ T3) จาก 11 สายพันธุ์ สามารถ ต้านทานไวรัสนี้ได้ ในการวิจัยนี้จึงได้วิเคราะห์ยีนโปรตีนเปลือกหุ้มไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน และศึกษากลไกการต้านทานไวรัสในมะละกอดัดแปรพันธุกรรมดังกล่าว เทคนิค PCR ถูกใช้เพื่อตรวจหายีน cp พบว่า มะละกอดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมด 11 สายพันธุ์ มียีน cp การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดที่แทรกในพันธุกรรมมะละกอโดย Southern blot hybridization แสดงให้เห็นว่ามีเพียง 7 สายพันธุ์ (G1, T1, T2, T4, T5, T6 และ T7) เกิดจาก การนำยีนถ่ายทอดเข้าสู่มะละกอที่เป็นอิสระจากกัน ยกเว้นในมะละกอ 4 สายพันธุ์ (G2, G3, G5 และ T3) ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีรูปแบบการเรียงตัวของยีน cp ที่เหมือนกัน นอกจากนี้พบว่าทั้ง 4 สายพันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีทั้งยีน cp ขนาดปกติ และ ยีน cp ที่สั้นกว่าปรกติหลายสำเนาและมีการจัดเรียงตัวใหม่ของยีนถ่ายทอดดังกล่าวในส่วน ของ CP cassette ผลการวิเคราะห์การถ่ายทอดยีน cp ในสายพันธุ์ G2 พบว่ายีน cp สามารถ ถ่ายทอดไปยังรุ่น R1 และ R2 พบว่ารูปแบบการเรียงตัวของยีน cp ในรุ่นนี้มีรูปแบบการเรียง ตัวของยีน cp เหมือนรุ่น R0 เทคนิค RT-PCR ถูกใช้เพื่อตรวจหาระดับ mRNA ของยีน cp พบว่ามะละกอ 4 สาย พันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีการสะสม steady-state ของ mRNA ขนาดสั้นใน ระดับต่ำ ตรวจพบ siRNAs ของยีน cp ขนาดประมาณ 23 nucleotides ทั้งสอง polarities จำนวนมากใน 4 สายพันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน อย่างไรก็ตามสามารถตรวจพบ siRNAs ของยีน uidA ในมะละกอที่ต้านทานและไม่ต้านทานต่อไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน ผลการทดลองดังกล่าวแสดงให้เห็นว่าการต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในระดับ RNA เป็นผลมาจากยีน cp นอกจากนี้ยังตรวจพบ siRNAs ของยีน cp ในรุ่น R2 ของมะละกอดัดแปร พันธุกรรมสายพันธุ์ G2
บทคัดย่อ (EN): Papaya ringspot virus (PRSV) causes a serious disease in papaya (Carica papaya L.). Transformation of the PRSV coat protein (cp) gene into papaya plants was previously shown to generate transgenic papaya resistant to PRSV. Eleven transgenic papaya lines (G1, G2, G3, G5, T1, T2, T3, T4, T5, T6 and T7) have been generated and tested for PRSV resistance previously in the plant virology laboratory. Four (G2, G3, G5 and T3) out of eleven transgenic papaya lines showed resistance against PRSV. In this thesis, we analyzed the cp transgene and studied the mechanism of PRSV resistance in these transgenic plants. Using PCR amplification to verify for the presence of the cp transgene, all transgenic papaya lines contained the cp transgene. The integration of the transgene in papaya genome was analyzed using Southern blot hybridization. The results indicated that seven (G1, T1, T2, T5, T6 and T7) out of eleven transgenic papaya lines were from an independent transformation except in the four resistant transgenic papaya lines (G2, G3, G5 and T3) which showed identical pattern of the transgene insertion. Furthermore, all four resistant transgenic papaya lines contained multiple copies of both intact cp and truncated cp with rearrangement of transgene in CP cassette. Analysis of the cp transgene insertion from the resistant transgenic papaya line G2 revealed that the cp transgene was inherited by the next generation (R1, R2). The cp transgene insertion showed identical band pattern as in the R0 plant. RT-PCR amplification to verify for the presence of cp mRNA revealed that all four resistant transgenic papaya lines accumulated relatively low steady-state level of the truncated cp mRNA. High level of short interfering RNAs (siRNAs) of the cp transgene, approximately 23 nucleotides in size corresponding to both sense and antisense polarities, were also detected in all four resistant transgenic papaya lines. However, siRNAs of uidA transgene were detected in both resistant and nonresistant transgenic papaya lines. These results suggest RNA-mediated virus resistance conferred by the cp transgene. SiRNAs of the cp transgene were also detected in R2 plants of transgenic papaya line G2
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=2621&obj_id=1826
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Plant Diseases
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนก่อโรคร้ายแรงในมะละกอ ก่อนหน้านี้มีการแสดงให้เห็นว่า การนำยีนโปรตีนเปลือกหุ้มไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน (cp) เข้าสู่มะละกอสามารถสร้าง มะละกอต้านทานไวรัสนี้ได้ มะละกอดัดแปรพันธุกรรม 11 สายพันธุ์ (G1, G2, G3, G5, T1, T2, T3, T4, T5, T6 และ T7) ถูกสร้างขึ้นและตรวจสอบการต้านทานไวรัสที่ plant virology laboratory พบว่ามีเพียง 4 สายพันธุ์ (G2, G3, G5 และ T3) จาก 11 สายพันธุ์ สามารถ ต้านทานไวรัสนี้ได้ ในการวิจัยนี้จึงได้วิเคราะห์ยีนโปรตีนเปลือกหุ้มไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน และศึกษากลไกการต้านทานไวรัสในมะละกอดัดแปรพันธุกรรมดังกล่าว เทคนิค PCR ถูกใช้เพื่อตรวจหายีน cp พบว่า มะละกอดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมด 11 สายพันธุ์ มียีน cp การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดที่แทรกในพันธุกรรมมะละกอโดย Southern blot hybridization แสดงให้เห็นว่ามีเพียง 7 สายพันธุ์ (G1, T1, T2, T4, T5, T6 และ T7) เกิดจาก การนำยีนถ่ายทอดเข้าสู่มะละกอที่เป็นอิสระจากกัน ยกเว้นในมะละกอ 4 สายพันธุ์ (G2, G3, G5 และ T3) ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีรูปแบบการเรียงตัวของยีน cp ที่เหมือนกัน นอกจากนี้พบว่าทั้ง 4 สายพันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีทั้งยีน cp ขนาดปกติ และ ยีน cp ที่สั้นกว่าปรกติหลายสำเนาและมีการจัดเรียงตัวใหม่ของยีนถ่ายทอดดังกล่าวในส่วน ของ CP cassette ผลการวิเคราะห์การถ่ายทอดยีน cp ในสายพันธุ์ G2 พบว่ายีน cp สามารถ ถ่ายทอดไปยังรุ่น R1 และ R2 พบว่ารูปแบบการเรียงตัวของยีน cp ในรุ่นนี้มีรูปแบบการเรียง ตัวของยีน cp เหมือนรุ่น R0 เทคนิค RT-PCR ถูกใช้เพื่อตรวจหาระดับ mRNA ของยีน cp พบว่ามะละกอ 4 สาย พันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนมีการสะสม steady-state ของ mRNA ขนาดสั้นใน ระดับต่ำ ตรวจพบ siRNAs ของยีน cp ขนาดประมาณ 23 nucleotides ทั้งสอง polarities จำนวนมากใน 4 สายพันธุ์ที่ต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน อย่างไรก็ตามสามารถตรวจพบ siRNAs ของยีน uidA ในมะละกอที่ต้านทานและไม่ต้านทานต่อไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน ผลการทดลองดังกล่าวแสดงให้เห็นว่าการต้านทานไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในระดับ RNA เป็นผลมาจากยีน cp นอกจากนี้ยังตรวจพบ siRNAs ของยีน cp ในรุ่น R2 ของมะละกอดัดแปร พันธุกรรมสายพันธุ์ G2
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Panu Ruangjan. "การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรมAnalysis of papaya ringspot virus transgenes in transformed papaya plants". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2548

Panu Ruangjan. "การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรมAnalysis of papaya ringspot virus transgenes in transformed papaya plants". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2548. Print.



TARR Wordcloud:
การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม
Panu Ruangjan
มหาวิทยาลัยมหิดล
2548
การตรวจวิเคราะห์ยีนโปรตีนเปลือกหุ้มของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนที่ถ่ายฝากในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม G2 การใช้ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเพื่อผลิตและนำเสนอแอนติเจนแปลกปลอมอย่างเป็นระบบ การใช้ไวรัสใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเป็นยีนพาหะเพื่อผลิตโปรตีนแปลกปลอมในพืชแบบชั่วคราว การศึกษาเกี่ยวกับจีโนมและการสร้าง infectious transcript ของไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอสายพันธุ์ w การถ่ายยีนสร้างโปรตีน cylindrical inclusion ของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนในมะละกอเข้าสู่พืช การใช้โปรตีนเรืองแสงสีเขียวในการศึกษาตำแหน่งภายในเซลล์ของโปรตีน P3 ของไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน / Sarasate Eiamtanasate ความสามารถในการถ่ายทอดลักษณะต้านทานต่อโรคใบจุดสีดำและลักษณะทางเกษตรของถ้วลิสง การถ่ายยีนแอนติฟริซโปรตีนดัดแปรในสตรอเบอรี การศึกษาคุณสมบัติของยีนมะเร็งของไวรัส HPV16 : ความหลากหลายของยีน แหล่งที่อยู่และหน้าที่การกระตุ้นการแสดงออกของยีน การวิเคราะห์ระดับอณูของยีนที่เป็นสาเหตุของโรคไตผิดปกติในการขับกรด
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair