สืบค้นงานวิจัย
การตรวจแยกแบคทีเรีย vibrio cholerae, vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus และ vibrio vulnificus โดยวิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์
Akaranong Rujiwat - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การตรวจแยกแบคทีเรีย vibrio cholerae, vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus และ vibrio vulnificus โดยวิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์
ชื่อเรื่อง (EN): Identification of vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus and vibrio vulnificus by multiplex polymerase chain reaction
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Akaranong Rujiwat
บทคัดย่อ: เชื้อ Vibrio เป็นสาเหตุสำคัญที่ทำให้เกิดการระบาดของโรคอาหารเป็นพิษที่เกิดจากการรับประทานอาหารที่ ปนเปื้อนโดยเฉพาะอาหารทะเล ประเทศไทยเป็นประเทศหนึ่งที่มีความสำคัญในการส่งออกอาหารทะเลไปยัง ประเทศต่างๆจึงต้องให้ความสำคัญกับความปลอดภัยและควบคุมป้องกันการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ การศึกษานี้ ได้ศึกษาการตรวจแยกเชื้อแบคทีเรียอย่างรวดเร็วโดยใช้วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ เพื่อตรวจหายีนที่สำคัญในการก่อโรค ของเชื้อ Vibrio โดยประกอบด้วยยีน ctx, tl และ vvh สำหรับ V. cholerae, V. parahaemolyticus และ V. vulnificus ตามลำดับ ยีนเหล่านี้มีความสำคัญในการก่อให้เกิดโรคในมนุษย์ วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์นี้ได้ถูกพัฒนาโดยเลือกใช้ ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะทั้งหมด 3 คู่ในการตรวจ เพื่อให้ได้ขนาดของลำดับเบสที่ให้ผลการตรวจสอบที่มีขนาด 302 คู่เบส (สำหรับ V. cholerae), 450 คู่เบส (สำหรับ V. parahaemolyticus) และ 704 คู่เบส (สำหรับ V. vulnificus) วิธีมัล ติเพลกซ์พีซีอาร์นี้เป็นวิธีที่มีความแม่นยำและรวดเร็วในการตรวจ โดยสามารถตรวจได้ผลภายในเวลาเพียง 12-14 ชั่วโมงและยังสามารถตรวจพบเชื้อที่มีปริมาณเพียง 104-106 cfu/mlได้ ในขณะที่วิธีทางจุลชีววิทยาตามวิธีมาตรฐาน การตรวจการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio ในอาหารทะเลของ BAM ปี 2004 ใช้เวลา 3- 5 วัน ผลการศึกษาพบว่า การ ตรวจแยกโดยใช้วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ให้ผลการตรวจที่ไวกว่าการตรวจโดยใช้วิธีพื้นฐานทางจุลชีววิทยา ซึ่งจะ ก่อให้เกิดประโยชน์ต่อการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อและสามารถใช้เป็นวิธีมาตรฐานเพื่อควบคุมความปลอดภัยของ อาหารสำหรับผู้บริโภคและนอกจากนี้ยังเป็นประโยชน์ต่อการส่งออกอาหารทะเลและในอุตสาหกรรมอาหาร การพัฒนาวิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ในครั้งนี้ได้นำไปใช้ในการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio ในตัวอย่างเนื้อกุ้งทั้งหมด 60 ตัวอย่าง ซึ่งสุ่มตัวอย่างมาจากตลาดสดและห้างสรรพสินค้าในกรุงเทพมหานคร ได้ใช้ วิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้นและทำการตรวจสอบควบคู่ไปกับวิธีมาตรฐานทางจุลชีววิทยา จาก การศึกษานี้พบว่าการรับประทานอาหารที่ปรุงไม่สุกหรืออาหารดิบ เป็นสาเหตุความเสี่ยงในการเกิดโรค โดยในการ ตรวจตัวอย่างทั้งหมด 60 ตัวอย่างในครั้งนี้ พบว่ามีถึง 22 ตัวอย่างที่ตรวจพบเชื้อ V. parahaemolyticus, 6 ตัวอย่าง ตรวจพบเชื้อ V. vulnificus และ 1 ตัวอย่างตรวจพบเชื้อ V. cholerae และในบางตัวอย่างตรวจพบการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio มากกว่าหนึ่งชนิด ซึ่งนับว่าเป็นอัตราที่ค่อนข้างสูง นอกจากนี้วิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้น ยังสามารถนำไปประยุกต์ใช้กับการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อในอาหารประเภทต่างๆได้เพื่อให้มีมาตรฐานและความ ปลอดภัย
บทคัดย่อ (EN): Vibrio spp. has been recognized as an important cause of foodborne illness. Consuming seafood is mostly associated with Vibrio spp. outbreaks. Thailand is one of the major countries exporting seafood worldwide and has to strictly control these organisms in seafood products promptly before transportation. In this study, a rapid multiplex PCR (m-PCR) method that allows the simultaneous detection, in a single tube, of Vibrio strains of common pathogens was developed. The identified target genes were: cholerae toxin (ctx) gene of V. cholerae, thermolabile (tl) gene of V. parahaemolyticus and Vibrio vulnificus haemolysin (vvh) gene of V. vulnificus, which were reported to be associated with pathogenicity in humans. M-PCR was developed using three pairs of primers and produced specific amplicons of the expected sizes from mixed populations of reference of bacterial strains from pure cultures. The molecular sizes of amplicons from genes, ctx, tl and vvh, were approximately 302 bp (for V. cholerae), 450 (for V. parahaemolyticus) and 704 bp (for V. vulnificus), respectively. This m-PCR assay was specific and rapid, with a turnaround time of 12-14 h compared to the conventional microbiology method of 3-5 days. The detection limit of the assay for the bacterial target was estimated at 104-106 cfu/ml. The organism identification was confirmed following the standard protocol for Vibrio spp. detection in seafood recommended by the Bacteriological Analytical Manual (BAM, 2004). The results showing that the m-PCR method gave a higher level of sensitivity and specificity than culturing methods, thereby improving the identification of Vibrio in seafood safety-control for industries and consumers. Due to the occurance of pathogenic Vibrio spp., the potential risk of consumption of raw or undercooked shrimps was envisaged. Our developed m-PCR was applied to survey the contamination of the targeted organisms. Samples of shrimps collected from local fresh markets and supermarkets in Bangkok, Thailand were examined for the presence of V. cholerae, V. parahaemolyticus and V. vulnificus. M-PCR was used to identify the ctx, tl and vvh genes. A conventional microbiology method was performed, in parallel, to confirm the identification of the isolates. Twenty two V. parahaemolyticus, six V. vulnificus and one V. cholerae strains were detected from 60 shrimp samples. Mixed contaminations were found in some samples. Our developed m-PCR is rapid, accurate, and less time-consuming than the conventional method and could be practically applied for seafood safety control.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=3687&obj_id=3651
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Vibrio vulnificus
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: เชื้อ Vibrio เป็นสาเหตุสำคัญที่ทำให้เกิดการระบาดของโรคอาหารเป็นพิษที่เกิดจากการรับประทานอาหารที่ ปนเปื้อนโดยเฉพาะอาหารทะเล ประเทศไทยเป็นประเทศหนึ่งที่มีความสำคัญในการส่งออกอาหารทะเลไปยัง ประเทศต่างๆจึงต้องให้ความสำคัญกับความปลอดภัยและควบคุมป้องกันการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ การศึกษานี้ ได้ศึกษาการตรวจแยกเชื้อแบคทีเรียอย่างรวดเร็วโดยใช้วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ เพื่อตรวจหายีนที่สำคัญในการก่อโรค ของเชื้อ Vibrio โดยประกอบด้วยยีน ctx, tl และ vvh สำหรับ V. cholerae, V. parahaemolyticus และ V. vulnificus ตามลำดับ ยีนเหล่านี้มีความสำคัญในการก่อให้เกิดโรคในมนุษย์ วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์นี้ได้ถูกพัฒนาโดยเลือกใช้ ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะทั้งหมด 3 คู่ในการตรวจ เพื่อให้ได้ขนาดของลำดับเบสที่ให้ผลการตรวจสอบที่มีขนาด 302 คู่เบส (สำหรับ V. cholerae), 450 คู่เบส (สำหรับ V. parahaemolyticus) และ 704 คู่เบส (สำหรับ V. vulnificus) วิธีมัล ติเพลกซ์พีซีอาร์นี้เป็นวิธีที่มีความแม่นยำและรวดเร็วในการตรวจ โดยสามารถตรวจได้ผลภายในเวลาเพียง 12-14 ชั่วโมงและยังสามารถตรวจพบเชื้อที่มีปริมาณเพียง 104-106 cfu/mlได้ ในขณะที่วิธีทางจุลชีววิทยาตามวิธีมาตรฐาน การตรวจการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio ในอาหารทะเลของ BAM ปี 2004 ใช้เวลา 3- 5 วัน ผลการศึกษาพบว่า การ ตรวจแยกโดยใช้วิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ให้ผลการตรวจที่ไวกว่าการตรวจโดยใช้วิธีพื้นฐานทางจุลชีววิทยา ซึ่งจะ ก่อให้เกิดประโยชน์ต่อการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อและสามารถใช้เป็นวิธีมาตรฐานเพื่อควบคุมความปลอดภัยของ อาหารสำหรับผู้บริโภคและนอกจากนี้ยังเป็นประโยชน์ต่อการส่งออกอาหารทะเลและในอุตสาหกรรมอาหาร การพัฒนาวิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ในครั้งนี้ได้นำไปใช้ในการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio ในตัวอย่างเนื้อกุ้งทั้งหมด 60 ตัวอย่าง ซึ่งสุ่มตัวอย่างมาจากตลาดสดและห้างสรรพสินค้าในกรุงเทพมหานคร ได้ใช้ วิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้นและทำการตรวจสอบควบคู่ไปกับวิธีมาตรฐานทางจุลชีววิทยา จาก การศึกษานี้พบว่าการรับประทานอาหารที่ปรุงไม่สุกหรืออาหารดิบ เป็นสาเหตุความเสี่ยงในการเกิดโรค โดยในการ ตรวจตัวอย่างทั้งหมด 60 ตัวอย่างในครั้งนี้ พบว่ามีถึง 22 ตัวอย่างที่ตรวจพบเชื้อ V. parahaemolyticus, 6 ตัวอย่าง ตรวจพบเชื้อ V. vulnificus และ 1 ตัวอย่างตรวจพบเชื้อ V. cholerae และในบางตัวอย่างตรวจพบการปนเปื้อนของเชื้อ Vibrio มากกว่าหนึ่งชนิด ซึ่งนับว่าเป็นอัตราที่ค่อนข้างสูง นอกจากนี้วิธีการตรวจโดยมัลติเพลกซ์พีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้น ยังสามารถนำไปประยุกต์ใช้กับการตรวจการปนเปื้อนของเชื้อในอาหารประเภทต่างๆได้เพื่อให้มีมาตรฐานและความ ปลอดภัย
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Akaranong Rujiwat. "การตรวจแยกแบคทีเรีย vibrio cholerae, vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus และ vibrio vulnificus โดยวิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์Identification of vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus and vibrio vulnificus by multiplex polymerase chain reaction". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2550

Akaranong Rujiwat. "การตรวจแยกแบคทีเรีย vibrio cholerae, vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus และ vibrio vulnificus โดยวิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์Identification of vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus and vibrio vulnificus by multiplex polymerase chain reaction". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2550. Print.



TARR Wordcloud:
การตรวจแยกแบคทีเรีย vibrio cholerae, vibrio cholerae, vibrio parahaemolyticus และ vibrio vulnificus โดยวิธีมัลติเพลกซ์พีซีอาร์
Akaranong Rujiwat
มหาวิทยาลัยมหิดล
2550
การตรวจและจำแนกเชื้อ vibrio cholerae O1, O139 และ non-O1 ในตัวอย่างอาหารทะเลโดยวิธี touch down multiplex po ไบโอเซนเซอร์ชนิดไมโครแคนติลิเวอร์สำหรับการตรวจวัดเชื้อ vibrio cholerae O1 ระบาดวิทยาของ Vibrio fluvialis ในจังหวัดชลบุรี การพัฒนาวัคซีนต้านแบคทีเรียก่อโรคชนิด Vibrio vulnificus ในปลากะพงขาว การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อเชื้อ vibrio parahaemolyticus โดยเน้นการวินิจฉัย serotype การประเมินความเสี่ยงเชิงปริมาณของเชื้อ Vibrio parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งไทย การตรวจหายีน CTX ของ Vibrio cholerae ด้วยวิธีควอทซ์คริสตัลไมโครบาลานซ์ ดีเอ็นเอเซ็นเซอร์ การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ Vibrio alginolyticus การศึกษาไลโซเจนีของแบคเทอริโอฟาจ VHS1 ในเชื้อ Vibrio harveyi การตรวจหาการแสดงออกที่ต่างกันของยีนในใบประดับของบัวชั้นโดยเทคนิคดีดีอาร์ที-พีซีอาร์
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair