สืบค้นงานวิจัย
การผลิต Pichia pastoris ที่มีโอเมก้า 3 สูง สำหรับใช้เป็นอาหารปลา
มารินา เกตุทัต-คาร์นส์ - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
ชื่อเรื่อง: การผลิต Pichia pastoris ที่มีโอเมก้า 3 สูง สำหรับใช้เป็นอาหารปลา
ชื่อเรื่อง (EN): Production of Pichia pastoris with high omega 3 for fish feed
บทคัดย่อ: กรดไขมันที่ไม่อิ่มตัวสูง (polyunsaturated fatty acids; PUFAs) ตัวอย่างเช่น docosahexaenoic acid (DHA, C22:6n-3) ถูกสร้างขึ้น โดยอาศัยเอนไซม์ desaturase และ elongase หลายชนิด ได้แก่ ?5 desaturase (?5) ?6 desaturase (?6) ?5 elongase (E5) และ ?6 elongase (E6) โดยเอนไซม์ desaturase มีหน้าที่ในการเติมพันธะคู่ เพื่อเพิ่มความไม่อิ่มตัวในสายของกรดไขมัน ขณะที่เอนไซม์ elongase มีหน้าที่ในการเพิ่มความยาวในสายของกรดไขมัน โดยทำการเติมคาร์บอนทีละสองอะตอม เอนไซม์ทั้งสองกลุ่มนี้ สามารถพบได้ในสัตว์มีกระดูกสันหลังทั่วไปรวมถึงปลาด้วย โดยในปลาน้ำจืดจะพบการแสดงออกของเอนไซม์ดังกล่าวในระดับที่สูงกว่าในปลาทะเล ซึ่งมีความเกี่ยวข้องกับอาหารที่ปลาเหล่านั้นกิน ทั้งนี้ สัตว์มีกระดูกสันหลังทุกชนิด ไม่สามารถผลิตสารตั้งต้น alpha-linolenic acid (ALA, C18:3n-3) และ linoleic acid (LA, C18:2n-6) ที่ใช้ในการสร้างกรดไขมันที่ไม่อิ่มตัวสูงได้ ดังนั้นจึงจำเป็นต้องรับสารตั้งต้นดังกล่าวจากอาหารโดยตรง ในการศึกษานี้ ได้ทำการสกัดยีน E6 และ ?2 desaturase (?2) จากปลาม้าลาย ซึ่งเอนไซม์ ?2 เป็นเอนไซม์ที่ทำหน้าที่ทั้ง ?6 และ ?5 สกัดยีน ?4 desaturase (?4) จากสาหร่ายทะเลขนาดเล็ก Isochrysis galbana แล้วนำเข้าสู่พลาสมิด pGAPZ และ pGAPZ(M) ได้เป็น pGAPZ?2 pGAPZ(M)E6 และ pGAPZ(M)?4 พลาสมิดลูกผสมทั้งหมดถูกถ่ายโอนเข้าสู่เซลล์แบคทีเรีย Escherichia coli แล้วสกัดออกมา เพื่อทำการบ่งชี้ลักษณะที่สำคัญของเอนไซม์ใน กลุ่ม desaturase และ elongase จากผลการวิเคราะห์ พบบริเวณสำคัญถูกต้องตรงตามกลุ่มของ เอนไซม์ desaturase และ elongase พลาสมิดลูกผสมทั้งสามชนิดถูกนำมาเชื่อมต่อกันเพื่อสร้างพลาสมิดลูกผสมใหม่ pGAPZ?2E6?4 แล้วจึงถ่ายโอนเข้าสู่เซลล์ยีสต์ Pichia pastoris ได้เป็น P. pastoris ลูกผสม (recombinant P. pastoris) เพื่อศึกษาการสะสมของ DHA โดยทำการเพาะเลี้ยง recombinant P. pastoris จากนั้นสกัดกรดไขมัน เปลี่ยนกรดไขมันให้อยู่ในรูปเอสเทอร์ของกรดไขมัน (fatty acid methyl esters; FAMEs) และวิเคราะห์ FAMEs ที่ได้ ด้วยเทคนิคแก๊สโครมาโทกราฟี (gas chromatography, GC) ผลการทดลองชี้ให้เห็นว่า recombinant P. pastoris ที่มีพลาสมิดลูกผสม pGAPZ?2E6?4 มีการสะสมของ DHA ประมาณ 2.7 มิลลิกรัมต่อกรัมเซลล์แห้ง (mg/g dry cell weight (DCW)) ซึ่งไม่พบในกลุ่มควบคุม ในอนาคต recombinant P. pastoris ที่มีการสะสมของ DHA นี้ สามารถนำไปใช้ เป็นส่วนผสมในอาหารของสัตว์เศรษฐกิจที่สำคัญ เช่น อาหารปลา ไก่ จิ้งหรีด เพื่อเพิ่มคุณภาพ และราคา ของสัตว์เหล่านั้นต่อไป
บทคัดย่อ (EN): Polyunsaturated fatty acids (PUFAs), for example, docosahexaenoic acid (C22:6n-3) is generated by desaturase and elongase enzymes for example, ?5 desaturase (?5), ?6 desaturase (?6), ?5 elongase (E5), and ?6 elongase (E6). The function of desaturase is adding double bonds to increase the unsaturation of the fatty acid chain. The function of elongase is adding two carbon atoms to elongate the fatty acid chain. These enzymes can be found in all vertebrates including fish. Freshwater fish has been shown to have higher expression level of these enzymes than marine fish due to their diets. Since, all vertebrates are unable to synthesize the substrates (alpha-linolenic acid (ALA); C18:3n-3 and linoleic acid (LA); C18:2n-6) for polyunsaturated fatty acids (PUFAs) production, these substrates need to be obtain from their diets. In this study, cDNAs ?2 desaturase, which contains bifunctional of ?5 and ?6, and E6 from zebrafish were amplified and cloned into pGAPZ and pGAPZ(M) plasmids to generate recombinant plasmids pGAPZ?2 and pGAPZ(M)E6, respectively. cDNA ?4 desaturase from Isochrysis galbana was amplified then cloned into pGAPZ(M) plasmid to construct pGAPZ(M)?4. Recombinant plasmid was transformed into Escherichia coil, and then extracted to identify the important characteristics of the desaturase and elongase enzyme families. The results indicated that the desaturases and elongase cloned contained important regions related to their enzyme families. All of these genes were co-expressed together in single plasmid pGAPZ?2E6?4. Thereafter, the recombinant plasmid was transformed into Pichia pastoris. To study the polyunsaturated fatty acids (PUFAs) accumulation, the recombinant P. pastoris were cultured, and fatty acids were extracted and methylated to form fatty acid methyl esters (FAMEs), which were determined by gas chromatography (GC). The results indicated that recombinant P. pastoris containing pGAPZ?2E6?4 accumulated DHA ~2.7 mg/g dry cell weight (DCW), which is a fatty acid that is not present in the P. pastoris containing empty pGAPZ plasmid. In the future, this recombinant P. pastoris with high PUFAs can be used as supplement in economic animal feed, e.g. chicken, cricket, and fish to increase their quality and price.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
คำสำคัญ: อาหารปลานิล
เจ้าของลิขสิทธิ์: ฐานข้อมูล NRMS
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

มารินา เกตุทัต-คาร์นส์. "การผลิต Pichia pastoris ที่มีโอเมก้า 3 สูง สำหรับใช้เป็นอาหารปลาProduction of Pichia pastoris with high omega 3 for fish feed". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี. 2558

มารินา เกตุทัต-คาร์นส์. "การผลิต Pichia pastoris ที่มีโอเมก้า 3 สูง สำหรับใช้เป็นอาหารปลาProduction of Pichia pastoris with high omega 3 for fish feed". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี. 2558. Print.



TARR Wordcloud:
การผลิต Pichia pastoris ที่มีโอเมก้า 3 สูง สำหรับใช้เป็นอาหารปลา
มารินา เกตุทัต-คาร์นส์
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
30 กันยายน 2558
ภัยในอาหาร 3 อาหารบำรุงสมอง การแทนที่ปลาป่นด้วยของเหลือใช้จากสัตว์บกในอาหารสำหรับปลานิลแปลงเพศ การพัฒนาอาหารนกกระจอกเทศ ผลของการใช้สารเสริมในอาหารปลานิลที่มีต่อการเจริญเติบโตและสุขภาพ การใช้กล้วยหอมทองสุกในสูตรอาหารเลี้ยงปลานิล อนาคตของอาหารโลกอยู่ในมือของคุณ อาหารสำหรับสายตา 3 แนวคิดสำหรับการเล่าเรื่อง (storytelling) ที่ดีกว่าในการจัดการความรู้ การแทนที่ปลาป่นด้วยแหล่งโปรตีนจากพืชในอาหารปลาสวายลูกผสม
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair