สืบค้นงานวิจัย
การโคลน และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ DNA Helicase จากเชื้อมาลาเรียซึ่งเป็นเป้าหมายของยารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่
พัตรา สุนทรฐิติเจริญ - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
ชื่อเรื่อง: การโคลน และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ DNA Helicase จากเชื้อมาลาเรียซึ่งเป็นเป้าหมายของยารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่
ชื่อเรื่อง (EN): Cloning and Characterization of Malarial DNA Helicase : a novel anti-malarial drug target
บทคัดย่อ: พลาสโมเดียม ฟัลซิพารัม เป็นเชื้อโปรโตซัว ที่ทำให้เกิดโรคมาลาเรีย ซึ่งเป็นปัญหาสาธารณสุขที่สำคัญโรคหนึ่ง ในเขตร้อน และกึ่งร้อน ของโลก อีกทั้งยังเป็นโรคที่ยังต้องการยารักษาที่มีประสิทธิภาพ เนื่องจากเชื้อมีการดื้อยา การผลิตวัคซีนต่อโรคยังไม่ประสพผลสำเร็จ และ การกำจัดยุงพาหะก็ยังมีปัญหา เนื่องจากมีการดื้อต่อยากำจัดยุง ดังนั้นจึงมีความจำเป็นอย่างเร่งด่วนที่จะต้องหาเป้าหมายใหม่ของยา เพื่อการรักษาโรคที่มีประสิทธิภาพมากกว่าที่มีอยู่ในปัจจุบัน หนึ่งในเป้าหมายที่น่าสนใจคือ เอนไซม์ ดี เอน เอ เฮลิเคส ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่ทำหน้าที่คลายเกลียว ดีเอนเอ เพื่อให้สามารถทำกิจกรรมต่างๆ ซึ่งมีความจำเป็นต่อการดำรงชีวิต ของสิ่งมีชีวิตทุกชนิดได้ โครงการวิจัยนี้จึงได้ทำการศึกษาเอนไซม์เฮลิเคส ตัวใหม่ ที่ยังไม่เคยมีรายงานการวิจัยมาก่อน โดยเริ่มตั้งแต่การโคลน การแสดงออก และวิเคราะห์คุณสมบัติทางชีวเคมีต่างๆ ของ เอนไซม์ ซึ่งเตรียมได้จาก จากยีน PfI0910w ผลการวิจัยพบว่าสามารถทำการโคลน และ แสดงออกเอนไซม์โดยใช้ระบบการแสดงออกใน อี โคไล ได้สำเร็จ เรียกเอนไซม์ที่ผลิตขึ้นมาได้ว่า PfDHA86 โดยพบว่าสามารถผลิตเอนไซม์ได้ที่ระดับ ๐.๓๙๕ มิลิกรัม ต่อ สารเลี้ยงเชื้อ ๑ ลิตร โดยเอนไซม์ ดีเอนเอ เฮลิเคส ปรับแต่งพันธุกรรมที่ผลิตขึ้นมาได้มีขนาด ๘๕.๕ กิโลดาลตัน ผลจากการวิเคราะห์คุณสมบัติในการทำกิจกรรมพบว่า สามารถทำงานได้ดีเมื่อใช้พลังงานจากการย่อย ATP, ทำงานลดลงเล็กน้อยเมื่อใช้ dATP, และทำงานได้น้อยเมื่อใช้ dCTP, dGTP, dTTP เป็นแหล่งพลังงาน อีกทั้งยังต้องการ Mg2+ ในการทำงาน และถูกยับยั้งการทำงานโดย 200 mM KCl, 200 mM NaCl และ EDTA เอนไซม์สามารถคลายเกลียว ดีเอนเอ สายคู่ ทั้งแบบสายสั้นและสายยาว จากการศึกษาผลของยา ในการทำงานของเอนไซม์พบว่า ยา ในกลุ่มแอนทราไซคลิน ได้แก่ daunorubicin และ doxorubicin สามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ได้ โดยมีค่า IC50 ของ daunorubicin และ doxorubicin เท่ากับ 30 และ 23 ?M ตามลำดับ องค์ความรู้ที่ได้นี้จะสามารถใช้เป็นพื้นฐานในการพัฒนายารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่ และยังเป็นองค์ความรู้พื้นฐานเกี่ยวกับกลไกการทำงานของเอนไซม์ เฮลิเคสในสิ่งมีชีวิต เชิงลึก อีกด้วย?
บทคัดย่อ (EN): Plasmodium falciparum is causative agent of malaria. It is one of the most important tropical diseases of public health in tropical and subtropical area. The new antimalarial drug is needed for the disease because there are still many problems, such as drug resistance, lack of effective vaccine, and mosquito resistance to insecticide. Therefore, there is an urgent need for a new drug target. DNA helicase is an essential enzyme for various DNA metabolisms that involve the separation of double stranded DNA to single stranded DNA. Therefore, this enzyme could be a competent new drug target. This aim of this study is to clone, express and characterize DNA helicase from PfI0910w gene. The yield of the recombinant enzyme was 0.395 mg/L of culture volumn. The purified recombinant enzyme was about 85.5 kDa. Unwinding of DNA helicase activity was driven by hydrolysis of ATP and slightly decreased when dATP was used as an energy source. Almost no unwinding activity was detected when ATP was replaced with dCTP, dGTP or dTTP. The unwinding activity was depended on Mg2+, and inhibited by 200 mM KCl, 200 mM NaCl and EDTA. This DNA helicase could unwind both short and long partial duplex DNA substrates. The study of drug inhibitory effect indicated that Antracycline, namely, Daunorubicin and Doxorubicin could inhibit the unwinding activity of PfI0910w, with the IC50 for Daunorubicin and Doxorubicin at 30 and 23 ?M, respectively. The knowledge obtained from this study could be the basis for the development of a novel anti-malarial drug as well as for more insight into the molecular biology and biochemistry of DNA helicases in general living organisms.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
คำสำคัญ: การวิเคราะห์คุณสมบัติ
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

พัตรา สุนทรฐิติเจริญ. "การโคลน และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ DNA Helicase จากเชื้อมาลาเรียซึ่งเป็นเป้าหมายของยารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่Cloning and Characterization of Malarial DNA Helicase : a novel anti-malarial drug target". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี. 2554

พัตรา สุนทรฐิติเจริญ. "การโคลน และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ DNA Helicase จากเชื้อมาลาเรียซึ่งเป็นเป้าหมายของยารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่Cloning and Characterization of Malarial DNA Helicase : a novel anti-malarial drug target". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี. 2554. Print.



TARR Wordcloud:
การโคลน และการศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ DNA Helicase จากเชื้อมาลาเรียซึ่งเป็นเป้าหมายของยารักษาโรคมาลาเรียตัวใหม่
พัตรา สุนทรฐิติเจริญ
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
30 กันยายน 2554
การศึกษาฤทธิ์ต้านการอักเสบและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของยาตารับริดสีดวงมหากาฬ DNA สำคัญอย่างไร การโคลนยีนไฟเตสทนร้อนจากแอคติโนไมซีท Thermomonospora sp. RC7 เพื่อพัฒนาการผลิตเอนไซม์ไฟเตสทดแทนการนำเข้าจากต่างประเทศ โครงการวิจัยและพัฒนาเพื่อแก้ปัญหาโรคใบขาวของอ้อย ผักพื้นบ้าน...อาหารเป็นยา...รักษาสุขภาพ เปรียบเทียบประสิทธิภาพการใช้ยา Imizol และยา Oxytetracycline LA ในการรักษาโรค Anaplasmosis ในโคนมจังหวัดชลบุรี ปี 2548 – 2551 2557A17002079 ผลของเพคติเนสต่อคุณสมบัติของน้ำสตาร์แอปเปิ้ล ปริมาณและคุณสมบัติของเพคตินจากเปลือกผลไม้ การทดสอบคุณสมบัติในด้านต่างๆ ของไหมลูกผสมชนิด รังสีเหลือง โครงการการพัฒนาการผลิตฟรุกโตโอลิโกแซ็กคาไรด์ผงจากน้ำเชื่อมลำไยด้วยวิธีทางเอนไซม์
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair