สืบค้นงานวิจัย
การผลิตโพลีโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวเทลโลเจนินในพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้า (Plectropomus maculatus)
ชุติมา ถนอมสิทธิ์ - มหาวิทยาลัยบูรพา
ชื่อเรื่อง: การผลิตโพลีโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวเทลโลเจนินในพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้า (Plectropomus maculatus)
ชื่อเรื่อง (EN): Production of polyclonal antibodies specifics to plasma vitellogenin of blue-spotted grouper (Plectropomus maculatus)
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ชุติมา ถนอมสิทธิ์
บทคัดย่อ: ไวเทลโลเจนินเป็น Biomarker ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาถึงกลไกการทำงานของต่อมไร้ท่อ ไวเทล โลเจนินเป็นโปรตีนหลักในโยล์คที่ถูกควบคุมโดยฮอร์โมนเอสโตรเจนที่ผลิตโดยรังไข่และถูกลำเลียงมาตามกระแสเลือดกระตุ้นให้เซลล์ตับผลิตและหลั่งไวเทลโลเจนินออกมาในปลากะรังจุดฟ้า (Plectropomus maculatus) กระบวนการสังเคราะห์ไวเทลโลเจนินเกิดขึ้นได้ เมื่อมีการฉีดกระตุ้นด้วยฮอร์โมน 17 เบต้า-เอสตราไดออลจำนวน 2 มิลลิกรัมต่อน้ำหนักปลา 1 กิโลกรัม ไวเทลโลเจนินสามารถแยกได้โดยใช้ Ion-Exchange Chromatography และ Gel-Filtration Chromatography โดยใช้คอลัมน์ไฮดรอกซิลอะพาไทต์และคอลัมน์ เซฟาคริลเอส-300 หลังจากทำการศึกษาด้วยเอสดีเอสโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีสพบว่า ไวเทลโลเจนินที่แยกได้ มีน้ำหนักโมเลกุลเป็น 102 และ 94 กิโลดาลตัน ตามลำดับ เนื่องจากไวเทลโลเจนินบริสุทธิ์ที่แยกได้มีปริมาณน้อยไม่เพียงพอในการนำไปใช้ในการปลูกภูมิคุ้มกันให้กับหนูขาวเพราะฉะนั้นจึงใช้โปรตีนในพีคที่ 3 ที่แยกได้จากคอลัมน์ไฮดรอกซิลอะพาไทต์มาใช้ในการฉีดกระตุ้นแทน และเมื่อทำการศึกษาถึงความจำเพาะของโพลีโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตไดโดยใช้เทคนิค Western Blot และ Immunodiffusion พบว่าโพลีโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตได้จากหนูขาวทำปฏิกิริยากับพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้าเพศเมียที่ได้รับการกระตุ้นด้วยฮอร์โมน 17 เบต้า-เอสตราไดออลและไวเทลโลเจนินบริสุทธิ์ แต่ไม่ทำปฏิกิริยากับพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้าเพศเมีย ที่ไม่ได้รับการฉีดกระตุ้นและพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้าเพศผู้ เมื่อศึกษาโดยใช้เทคนิค Western Blot พบว่าแถบโปรตีนที่แยกได้จากไวเทลโลเจนินบริสุทธิ์มีน้ำหนักโมเลกุลเป็น 94, 75, 70, 68 และ 50 กิโลดาลตัน ตามลำดับ ซึ่งแตกต่างจากการศึกษาโดยใช้เทคนิค เอสดีเอสโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีส ระดับความเข้มข้นของโพลีโคลนนอลแอนติบอดีที่สามารถเกิดปฏิกิริยาเมื่อศึกษาโดยใช้เทคนิค Dot Blot คือ 1: 10,000
บทคัดย่อ (EN): Vitellogenin (VTG) is a widely used biomarker in the studies on regulation of endrocrine gland. Vitellogenin is a yolk precusor protein, which is synthesized and secreted in the liver in response to circulating estrogen. In blue-spotted grouper (Plectropomus maculatus), vitellogenin synthesis was induced by injection of 2 mg/Kg of 17 B-estradiol. Vitellogenin was isolated from phasma by ion-exchange chromatography and self-filltration chromatography on hydroxylapatite column and sephacryl S-300 column, respectively. After performing SDS-PAGE, vitellogenin was identified at the molecular weight of 102 and 94 kDa. Due to in sufficientamount of purified vitellogenin, protein in the thir peak which segregated from hydroxylapatite was used instead. The specificity of polyclonal antibody to vitellogenin was assessed by western blot and immunodiffusion analysis. The polychlonal antibody had crossreactivity with E2-injected female and purified vitellogenin. However, the crossreactivity was not observed in the plasma of intact females and plasma from blue-spotted grouper males. When using western blot techniques, the vitellogenin was identified at molecular weight of 94, 75, 70, 68 and 50 kDa which were different from SDS-PAGE technique. By using dot blot techniques, the suitable antibody titer for polyclonal antibody was 1 : 10,000
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=95&RecId=14443&obj_id=112321
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยบูรพา
คำสำคัญ: แอนตี้บอดี้
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยบูรพา
รายละเอียด: Vitellogenin (VTG) is a widely used biomarker in the studies on regulation of endrocrine gland. Vitellogenin is a yolk precusor protein, which is synthesized and secreted in the liver in response to circulating estrogen. In blue-spotted grouper (Plectropomus maculatus), vitellogenin synthesis was induced by injection of 2 mg/Kg of 17 B-estradiol. Vitellogenin was isolated from phasma by ion-exchange chromatography and self-filltration chromatography on hydroxylapatite column and sephacryl S-300 column, respectively. After performing SDS-PAGE, vitellogenin was identified at the molecular weight of 102 and 94 kDa. Due to in sufficientamount of purified vitellogenin, protein in the thir peak which segregated from hydroxylapatite was used instead. The specificity of polyclonal antibody to vitellogenin was assessed by western blot and immunodiffusion analysis. The polychlonal antibody had crossreactivity with E2-injected female and purified vitellogenin. However, the crossreactivity was not observed in the plasma of intact females and plasma from blue-spotted grouper males. When using western blot techniques, the vitellogenin was identified at molecular weight of 94, 75, 70, 68 and 50 kDa which were different from SDS-PAGE technique. By using dot blot techniques, the suitable antibody titer for polyclonal antibody was 1 : 10,000
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การผลิตโพลีโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวเทลโลเจนินในพลาสมาของปลากะรังจุดฟ้า (Plectropomus maculatus)
มหาวิทยาลัยบูรพา
2550
โครงสร้างประชากรปลาบริเวณป่าชายเลนชุมชนบ้านเปร็ดในจังหวัดตราด การผลิตลูกชิ้นปลาจากเนื้อปลาสองชนิด การหาปริมาณโลหะหนักบางชนิดในปลาทะเลที่มีคุณค่าทางเศรษฐกิจที่ได้จากสะพานปลาบ้านเพ จังหวัดระยอง การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ Vibrio alginolyticus การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไกลโคลิปิดที่จำเพาะของเชื้อวัณโรค การระบุชนิด และลักษณะของโปรตีนในมนุษย์ที่ทำปฏิกิริยาโพลีโคลนอลแอนติบอดีซีเอ็ม 5 ที่จำเพาะต่อโปรตีนต้านมะเร็ง พี การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดที่จำเพาะต่อเชื้อ Aeromonas Hydrophila ที่ก่อโรคในปลา การสร้างและศึกษาโพลีโคลนอลแอนติบอดีต่อตัวตอบรับสารสื่อประสาทในกลุ่มเอมีนจากกุ้งกุลาดำ การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อเม็ดเลือดกุ้งกุลาดำ Penaeus monodon ปริมาณโลหะหนักบางชนิดในเนื้อเยื่อส่วนต่าง ๆ ของปลาทะเลที่มีคุณค่าทางเศรษฐกิจ จากสะพานปลาคลองสังเขป จังหวัดชลบุรี
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก