สืบค้นงานวิจัย
การกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis)ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่
รัตรา ชัยกล้าหาญ - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
ชื่อเรื่อง: การกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis)ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่
ชื่อเรื่อง (EN): Mutation of Spirulina platensis and Selection for Its Mutants Defective in Fatty Acid Desaturation
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: รัตรา ชัยกล้าหาญ
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Ratana Chaiklahan
บทคัดย่อ: วิทยานิพนธ์เป็นการศึกษาการกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง(Spirulina platensis C1)สายพันธุ์ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่ โดยวิธีการกลายพันธุ์ด้วย Ethylmethanesulfonat (EMS)และใช้อุณหภูมิต่ำ (25 องศาเซลเซียส และ 20 องศาเซลเซียส)เป็นตัวคัดเลือก โดยใช้ เซลล์สาหร่ายเกลียวทอง 2 แบบ คือ แบบที่เป็น trichome สายยาว และแบบ trichome สายสั้น (2-3 เซลล์) โดยการ sonication พบว่าการ sonicate เป็นเวลา 45 วินาที เป็นเวลาที่เหมาะสมที่สุด เนื่องจากได้ fraagments ที่มีขนาด 2-3 เซลล์ ประมาณร้อยละ 80 ซึ่งสามารถเจริญเป็นโคโลนีบน อาหารแข้งได้ร้อยละ 91 หลังจากบ่มในอาหารเหลวเป็นเวลา 6 วัน และการกลายพันธุ์โดยการใช้ EMS สามารถใช้ได้ทั้งที่ความเข้มข้น 0.1Mบ่มเป็นเวลา 70 นาที และ 0.3 M บ่มเป็นเวลา 40 นาที โดยมีอัตราการรอดชีวิตร้อยละ 0.5 และ 0.36 ตามลำดับ ส่วนการใช้trichome สายยาวนั้นใช้ EMS ความเข้มข้น 0.4M บ่มเป็นเวลา 60 นาที และมีอัตราการรอดชีวิตอยู่ใน ช่วงร้อยละ 0.1-1 จากวิธีการกลายพันธุ์สาหร่ายเกลียวทองทั้ง 2 แบบ พบว่าการใช้เซลล์ที่เป็น trichome สายยยาวสามารภคัดเลือก mutants ที่มีองค์ประกอบของกรดไขมันแตกต่างไปจากสาพันธุ์ดั้งเดิม ได้ 3 สายพันธุ์ คือ S.platensis สายพันธุ์ I18 I22 และ I30 ซึ่งคิดเป็นค่าความถี่ของ การกลายพันธุ์ได้าเท่ากับ 4*10^ ผลการวิเคราะห์องค์ประกอบของกรดไขมันของสายพันธุ์ ทั้ง 3 พบว่า สัดส่วนของ y-linolenic acid (GLA,C18:3^)ลดลงจากสายพันธุ์ดั้งเดิม (มี สัดส่วน GLA อยู่ร้อยละ 18.7 ของกรดไขมันทั้งหมด)เหลือร้อยละ 13.5 9.9 และ10 ของ กรดไขมันทั้งหมด ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบอีกว่าในสายพันธุ์ I22 มีสัดส่วยของ C16:0 และ C18:1 เปลียนแปลงไป คือสัดส่วยของC16:0 เพิ่มขึ้นเป็นร้อยละ 49.7 เมื่อเทียบกับสายพันธุ์ ดั้งเดิมที่มีร้อยละ 44.3 ของกรดไขมันทั้งหมด และสัดส่วนของC18:1 ลดลงเป็นร้อยละ 4 ขณะที่สายพันธุ์ดั้งเดิมมีร้อยละ 8.6 ของกรดไขัมทั้งหมด โดยอัตราการเจริญเติบโตที่อุณภูมื 35องศาเซลเซียส ของ mutants ทั้ง 3 สายพันธุ์ (I18 I22 และ I30)มีค่าใกล้เคียงกับสายพันธุ์ดั้งเดิม (0.019)คือ0.019 0.017 และ 0.018 h^ตามลำดับ เมื่อศึกษาผลของอณหภูมืต่อองค์ประกอบของกรดไขมัน mutants เปรียบเทียบกับ สายพันธุ์ดั้งเดิม พบว่า การเลี้ยเซลล์ที่อุณหภูมิต่ำ (25 องศาเซลเซียส และ 20 องศาเซลเซียส) องค์ประกอบของกรด- ไขมันของสายพันธุ์ I18 มีคาใกล้เคียงกับสายพันธุ์ดั้งเดิม ส่วนสายพันธุ์ I30 มีการสะสมของ C18:2 และสายพันธุ์ I22 สัดส่วนของC18:3 เพิ่มจึ้นมาใกล้เคียงกับสายพันธุ์ดั้งเดิมเฉพาะที่ อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส แต่ไม่สามารถเจริญเติบโตได้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสและเมื่อนำ mutantsทั้ง 3 สายพันธุ์มาวัดอัตราการสังเคราะห์แสง พบว่า มีเพืยงสายพันธุ์ I22 ที่มีค่า Light saturationและ ค่า Maximal rate of light saturated photosynthesis (Pmax)ต่ำกว่าสายพันธุ์ดั้งเดิมประมาณ ร้อยละ 20 และ 62 ตามลำดับ ผลการทดลองทั้งหมดนี้แสดงให้เห็นว่าmutantsทั้ง 3 สายพันธุ์ เกิดความผิดปกติในตำแหน่งที่แตกต่างกัน กล่างคือ สายพันธุ์ I18อาจเกิดความผิดปกติในการ เติมพันธะคู่ที่ตำแหน่ง^6แบบชั่วคราว เนื่องจากเมื่อนำเซลล์ไปเลี้ยงที่อุณหภูมิต่ำความผิดปกติ นั้นหายไป ส่วนสายพันธุ์ I22 ความผิดปกติในการเติมพันธะคู่เกิดในลักษณะที่คล้ายกับสายพันธุ์ I18 แต่นอกจากจะมีการเปลียนแปลงที่การเติมพันธะคู่แล้วยังเกิดความผิดปกติในกระบวนการ สังเคราะห์แสงด้วย และสำหรับสายพันธุ์ I30 เป็นสายพันธุ์เดียวที่แสดงให้เห็นว่าการเติมพันธะคู่ ในตำแหน่ง ^6ผิดปกติทั้งที่อุณหภูมิกปกติและอุณหภูมิต่ำ ทั้งนี้อาจเกิดจากการทำงานที่ผิดไป ของ ^6-desaturase
บทคัดย่อ (EN): This thesis describes about the mutagenic treatment of Spirulina platensis Cl with ethylmethanesulfonate (EMS) and the selection for its mutants defective in fatty acid desaturation by low temperature (25 C and 20 C) incubation. Two types of cells, fIlamentous and sonicated trichomes were used. To obtain the suitable sonicated trichomes and conditions for EMS treatment, period of time for sonication and concentration of EMS were studied. The optimal incubation time for generating 80 % of fragments consisting 2-3 cells was 45 min. High plate efficiency (91 %) was obtained when the sonicated trichomes were preicubated in liquid medium for 6 days. Mutagenic treatment with 0.1 M EMS for 70 min and 0.3 M for 40 min resulted in 0.5 % and 0.36 % of cell survival, respectively. In the case of fIlamentous trichomes, 0.1-1 % of cell survival was obtained following 0.4 M EMS treatment for 60 min. By using these two methods, three mutants, designated 118, 122 and 130, were obtained from the fIlamentous trichomes treated one. These mutants recovered from EMS treatment at a frequency of 4 x 10 . The content of y-linolenic acid (GLA, C18:3 ) of the mutants decreased from the wild type level (18.7 % of total fatty acid, TFA) to 13.5 %, 9.9 % and 10 % of TFA, respectively. Moreover, in U2, the proportion of C16:0 and C18:1 changed from 49.7 % and 8.6 % of TFA (wild type level) to 44.3 % and 4 %. The specific growth rate of the mutants (118, U2 and 130) grown at 35 C, insignificant differed from that of the wild type (0.019 h ) were 0.019, 0.017 and 0.018 h respectively. The effect of low temperature (25 C and 20 C) on fatty acid composition of the mutants was also examined. 118 exhibited its fatty acid composition at similar level to that of wild type. C18:2 was accumulated in the cells of 130. The proportion of GLA of 122 reversed back to the wild type level when the cells were grown at 25 C. However, this strain could not grow at 20 C. The significant decrease in photosynthetic activity (as measured in terms of light saturation and maximal rate of light saturated photosynthesis. Pmax) was observed only in 122. These findings suggest that the mutation of these three mutants existed at different positions. Mutation of 118 might result from the partial defecting in fatty acid desaturation at^6 position. Whereas, in 122, the mutation not only occurred in the pathway of fatty acid desaturation, it also took place in the photosynthetic machinery. 130 was only a strain that showed the persistent level of GLA. This might be due to the incomplete function of ^6-desaturase.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=54&RecId=9239&obj_id=26605
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
คำสำคัญ: กรดแกรมม่าลิโนลินิก
คำสำคัญ (EN): y-linolenic acid
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
รายละเอียด: This thesis describes about the mutagenic treatment of Spirulina platensis Cl with ethylmethanesulfonate (EMS) and the selection for its mutants defective in fatty acid desaturation by low temperature (25 C and 20 C) incubation. Two types of cells, fIlamentous and sonicated trichomes were used. To obtain the suitable sonicated trichomes and conditions for EMS treatment, period of time for sonication and concentration of EMS were studied. The optimal incubation time for generating 80 % of fragments consisting 2-3 cells was 45 min. High plate efficiency (91 %) was obtained when the sonicated trichomes were preicubated in liquid medium for 6 days. Mutagenic treatment with 0.1 M EMS for 70 min and 0.3 M for 40 min resulted in 0.5 % and 0.36 % of cell survival, respectively. In the case of fIlamentous trichomes, 0.1-1 % of cell survival was obtained following 0.4 M EMS treatment for 60 min. By using these two methods, three mutants, designated 118, 122 and 130, were obtained from the fIlamentous trichomes treated one. These mutants recovered from EMS treatment at a frequency of 4 x 10 . The content of y-linolenic acid (GLA, C18:3 ) of the mutants decreased from the wild type level (18.7 % of total fatty acid, TFA) to 13.5 %, 9.9 % and 10 % of TFA, respectively. Moreover, in U2, the proportion of C16:0 and C18:1 changed from 49.7 % and 8.6 % of TFA (wild type level) to 44.3 % and 4 %. The specific growth rate of the mutants (118, U2 and 130) grown at 35 C, insignificant differed from that of the wild type (0.019 h ) were 0.019, 0.017 and 0.018 h respectively. The effect of low temperature (25 C and 20 C) on fatty acid composition of the mutants was also examined. 118 exhibited its fatty acid composition at similar level to that of wild type. C18:2 was accumulated in the cells of 130. The proportion of GLA of 122 reversed back to the wild type level when the cells were grown at 25 C. However, this strain could not grow at 20 C. The significant decrease in photosynthetic activity (as measured in terms of light saturation and maximal rate of light saturated photosynthesis. Pmax) was observed only in 122. These findings suggest that the mutation of these three mutants existed at different positions. Mutation of 118 might result from the partial defecting in fatty acid desaturation at^6 position. Whereas, in 122, the mutation not only occurred in the pathway of fatty acid desaturation, it also took place in the photosynthetic machinery. 130 was only a strain that showed the persistent level of GLA. This might be due to the incomplete function of ^6-desaturase.
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

รัตรา ชัยกล้าหาญ. "การกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis)ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่Mutation of Spirulina platensis and Selection for Its Mutants Defective in Fatty Acid Desaturation". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2540

รัตรา ชัยกล้าหาญ. "การกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis)ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่Mutation of Spirulina platensis and Selection for Its Mutants Defective in Fatty Acid Desaturation". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2540. Print.



TARR Wordcloud:
การกลายพันธุ์และการคัดเลือกสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis)ที่มีความผิดปกติในการเติมพันธะคู่
รัตรา ชัยกล้าหาญ
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
2540
ผลของไอออนโลหะหนักต่อการเจริญของสาหร่าย การผลิตปุ๋ยกากตะกอนน้ำเสียอุตสาหกรรมผลิตเส้นก๋วยเตี๋ยวเพื่อการเพาะเลี้ยงสาหร่ายเกลียวทอง ทรานสฟอร์เมชั่นของสาหร่ายเกลียวทอง (Spirulina platensis) ผลของสารตะกอนที่มีต่อการเก็บเกี่ยวสาหร่ายและการเจริญหลังการเก็บเกี่ยว การคัดเลือกประชากรข้าวลูกผสมรวมหมู่ระหว่างข้าวพันธุ์เหมยนองพื้นเมืองทนทานแมลงบั่วและพันธุ์ปทุมธานี 1 ในสภาพแวดล้อมแตกต่างกัน การใช้ไมโครเวฟช่วยสกัดและการหาลักษณะเฉพาะของลิปิดจากสาหร่ายเทา ความแตกต่างระหว่างพันธุ์ข้าวไทยในการปรับตัวต่อสภาพดินไม่ขังน้ำ การประเมินความเป็นพิษของสาหร่ายไก (Cladophora glomerata Kutzing and Microspora floccosa Thuret) ในหนูขาว การหาสภาวะที่เหมาะสมต่อการผลิตคาโรตินอยด์ของสาหร่ายคลอเรลลา ผลของความเข้มแสงและความเป็นกรด-เบสต่อการเจริญของ Spirulina platensis และ Chlorella vulgaris
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair