สืบค้นงานวิจัย
การสังเคราะห์และศึกษาผลของโปรตีนส่วนดิสอินทีกริน ของเมตาโลโปรตีนเนส จากพิษงูเข
Pon Singhamatr - จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
ชื่อเรื่อง: การสังเคราะห์และศึกษาผลของโปรตีนส่วนดิสอินทีกริน ของเมตาโลโปรตีนเนส จากพิษงูเข
ชื่อเรื่อง (EN): Expression of recombinant snake venom metalloproteinase disintegrin domain from green pit viper, trimeresurus albolabris, and characterization of its effects on human platelets
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Pon Singhamatr
บทคัดย่อ: ดิสอินทีกรินเป็นกลุ่มโปรตีนชนิดหนึ่งที่มีผลในการยับยั้ง การเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือดซึ่งมีลำดับกรดอะมิโนอาร์จีดีหรือเคจีดีในสายโปรตีน ลำดับกรดอะมิโนนี้สามารถยับยั้งกระบวนการการทำงานที่อาศัยอินทีกริน เช่น การปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ การเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือด เป็นต้น ดังนั้นดิสอินทีกรินจากพิษงูจึงอาจมีประโยชน์ในการรักษาโรคหลอดเลือดแดงอุดตัน ใช้ป้องกันการแพร่กระจายของมะเร็ง หรือในการสร้างแอนตีบอดีเพื่อใช้ในการผลิตชุดตรวจหาพิษงู วิทยานิพนธ์ฉบับนี้ศึกษาคุณสมบัติของโปรตีนส่วนดิสอินทีกรินของเมตาโลโปรตีนเนส (035 SVM) ต่อระบบเกร็ดเลือดของมนุษย์และศึกษาลำดับกรดนิวคลีอิก และลำดับกรดอะมิโนที่ครบถ้วนสมบูรณ์โดยเริ่มจากห้องสมุดซีดีเอ็นเอแรก (Primary cDNA library) ของต่อมพิษงูเขียวหางไหม้ท้องเหลือง ผลการศึกษาลำดับกรดนิวคลีอิกและลำดับกรดอะมิโนของ 035 SVM จากห้องสมุด ซีดีเอ็นเอจากต่อมพิษงูเขียวหางไหม้ท้องเหลืองโดยเทคนิค 5'-RACE พบว่า mRNA ของ 035 SVM มีจำนวนกรดนิวคลีอิกเท่ากับ 2,040 เบส และโปรตีนมีจำนวนกรดอะมิโน 484 ตัว ประกอบด้วยส่วน สัญญาณ โปรเป็ปไทด์เมตาโลโปรตีนเนส โปรตีนคั่นกลาง และดิสอินทีกริน เมื่อพิจารณาจากลำดับกรดนิวคลีอิกพบว่า 035 SVM เป็นเมตาโลโปรตีนเนส/ดิสอินทีกรินชนิดที่สองและมีลำดับเหมือน Jerdonitin จาก Trimeresurus jerdonii ซึ่งมีลำดับกรดอะมิโนเหมือนกันเท่ากับ 84% ส่วนดิสอินทีกรินของ 035 SVM ซึ่งมีจำนวนกรดอะมิโน 76 ตัว และมีลำดับกรดอะมิโนเคจีดีในสายเปปไทด์ได้ถูกผลิตในยีสต์ Pichia pastoris และแยกให้บริสุทธิ์ด้วยวิธีโครมาโตกราฟฟี่แบบจำเพาะ จากการเลี้ยงเซลล์พบว่าได้โปรตีนจำนวน 3.3 มิลลิกรัมต่อลิตร โปรตีนที่ได้จับกันเป็นคู่ (homodimer) มีขนาดประมาณ 11 และ 22 กิโลดาลตัน ในภาวะรีดิวส์และไม่รีดิวส์ ตามลำดับ และมีความสามารถในการยับยั้งการเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือดมนุษย์ เมื่อถูกกระตุ้นด้วยคอลลาเจน โดยมีค่า IC[subscript 50] เท่ากับ 976 นาโนโมล/ลิตร
บทคัดย่อ (EN): Disintegrins are involved in inhibition of platelet aggregation. They contain RGD or KGD sequences that can inhibit integrin-mediated cell-cell interactions and platelet aggregation. Therefore, snake venom disintegrins are helpful in therapy of arterial thrombosis and tumor metastasis, and producing an antibody for development of a venom diagnostic test kit. The aim of this thesis is to analyze the full-length sequence of 035 SVM from the cDNA library of Trimeresurus albolabris venom gland and characterize functions of the disintegrin domain of 035 SVM on human platelets. From the primary library, partial cDNA of 035 SVM was obtained. Using 5'-RACE method, the full-length sequence of 035 SVM was derived. Analysis of the nucleotide sequence found that the full-length sequence of 035 SVM mRNA was 2,040 bp in length. It was a type N-II snake venom metalloproteinase with 484 amino acid residues comprising signal region, pro-peptide, metalloproteinase domain, spacer region and disintegrin domain. The nucleotide sequence of 035 SVM showed 84% amino acid sequence identical to trimeresurus jerdonii jerdonitin. The disintegrin domain of 035 SVM, composed of 76 amino acids with a KGD sequence, was expressed in Pichia pastoris and purified using affinity chromatography. The yield of recombinant 035 disintegrin was 3.3 mg/liter of culture medium with molecular weight of approximately 11 kDa and 22 kDa on SDS-PAGE in reduced and non-reduced state, respectively. Recombinant 035 disintegrin was a homodimer that inhibited collagen-induced platelet aggregation with IC[subscript 50] of 976 nM
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://thailis-db.car.chula.ac.th/CU_DC/Thesis/January2006/Pon.pdf
เผยแพร่โดย: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
คำสำคัญ (EN): Blood platelets
เจ้าของลิขสิทธิ์: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
รายละเอียด: ดิสอินทีกรินเป็นกลุ่มโปรตีนชนิดหนึ่งที่มีผลในการยับยั้ง การเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือดซึ่งมีลำดับกรดอะมิโนอาร์จีดีหรือเคจีดีในสายโปรตีน ลำดับกรดอะมิโนนี้สามารถยับยั้งกระบวนการการทำงานที่อาศัยอินทีกริน เช่น การปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ การเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือด เป็นต้น ดังนั้นดิสอินทีกรินจากพิษงูจึงอาจมีประโยชน์ในการรักษาโรคหลอดเลือดแดงอุดตัน ใช้ป้องกันการแพร่กระจายของมะเร็ง หรือในการสร้างแอนตีบอดีเพื่อใช้ในการผลิตชุดตรวจหาพิษงู วิทยานิพนธ์ฉบับนี้ศึกษาคุณสมบัติของโปรตีนส่วนดิสอินทีกรินของเมตาโลโปรตีนเนส (035 SVM) ต่อระบบเกร็ดเลือดของมนุษย์และศึกษาลำดับกรดนิวคลีอิก และลำดับกรดอะมิโนที่ครบถ้วนสมบูรณ์โดยเริ่มจากห้องสมุดซีดีเอ็นเอแรก (Primary cDNA library) ของต่อมพิษงูเขียวหางไหม้ท้องเหลือง ผลการศึกษาลำดับกรดนิวคลีอิกและลำดับกรดอะมิโนของ 035 SVM จากห้องสมุด ซีดีเอ็นเอจากต่อมพิษงูเขียวหางไหม้ท้องเหลืองโดยเทคนิค 5'-RACE พบว่า mRNA ของ 035 SVM มีจำนวนกรดนิวคลีอิกเท่ากับ 2,040 เบส และโปรตีนมีจำนวนกรดอะมิโน 484 ตัว ประกอบด้วยส่วน สัญญาณ โปรเป็ปไทด์เมตาโลโปรตีนเนส โปรตีนคั่นกลาง และดิสอินทีกริน เมื่อพิจารณาจากลำดับกรดนิวคลีอิกพบว่า 035 SVM เป็นเมตาโลโปรตีนเนส/ดิสอินทีกรินชนิดที่สองและมีลำดับเหมือน Jerdonitin จาก Trimeresurus jerdonii ซึ่งมีลำดับกรดอะมิโนเหมือนกันเท่ากับ 84% ส่วนดิสอินทีกรินของ 035 SVM ซึ่งมีจำนวนกรดอะมิโน 76 ตัว และมีลำดับกรดอะมิโนเคจีดีในสายเปปไทด์ได้ถูกผลิตในยีสต์ Pichia pastoris และแยกให้บริสุทธิ์ด้วยวิธีโครมาโตกราฟฟี่แบบจำเพาะ จากการเลี้ยงเซลล์พบว่าได้โปรตีนจำนวน 3.3 มิลลิกรัมต่อลิตร โปรตีนที่ได้จับกันเป็นคู่ (homodimer) มีขนาดประมาณ 11 และ 22 กิโลดาลตัน ในภาวะรีดิวส์และไม่รีดิวส์ ตามลำดับ และมีความสามารถในการยับยั้งการเกาะกลุ่มของเกร็ดเลือดมนุษย์ เมื่อถูกกระตุ้นด้วยคอลลาเจน โดยมีค่า IC[subscript 50] เท่ากับ 976 นาโนโมล/ลิตร
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Pon Singhamatr. "การสังเคราะห์และศึกษาผลของโปรตีนส่วนดิสอินทีกริน ของเมตาโลโปรตีนเนส จากพิษงูเขExpression of recombinant snake venom metalloproteinase disintegrin domain from green pit viper, trimeresurus albolabris, and characterization of its effects on human platelets". จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. 2547

Pon Singhamatr. "การสังเคราะห์และศึกษาผลของโปรตีนส่วนดิสอินทีกริน ของเมตาโลโปรตีนเนส จากพิษงูเขExpression of recombinant snake venom metalloproteinase disintegrin domain from green pit viper, trimeresurus albolabris, and characterization of its effects on human platelets". จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. 2547. Print.



TARR Wordcloud:
การสังเคราะห์และศึกษาผลของโปรตีนส่วนดิสอินทีกริน ของเมตาโลโปรตีนเนส จากพิษงูเข
Pon Singhamatr
จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
2547
การศึกษาบทบาทของกรดอะมิโน Cysteine ต่อการม้วนพับของโปรตีนและการออกฤทธิ์ต่อลูกน้ำยุงของโปรตีนพิษ BinB จาก Bacillus sphaericus. การศึกษาคุณสมบัติระดับโมเลกุลของโปรตีนเฉพาะส่วนที่ทำให้เกิดรูรั่วบนผิวเซลล์ของโปรตีนสารพิษ Adenylate cyclase-haemolysin จากเชื้อ Bordetel การผลิตโปรตีนจากยีนส่วนนิวคลีโอโปรตีนของเชื้อไข้หวัดใหญ่ชนิดเอ พิษผลกระทบของสาร tributyltin ต่อการแสดงออกของโปรตีนในหอยนางรมปากจีบ โปรตีนลูกผสมแอลดีแอลรีเซ็ปเตอร์-จีเอสที สำหรับการพัฒนาเทคนิคการตรวจวัดระดับไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำ การใช้โปรตีนเรืองแสงสีเขียวในการศึกษาตำแหน่งภายในเซลล์ของโปรตีน P3 ของไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน / Sarasate Eiamtanasate การแสดงออกและศึกษาคุณสมบัติของชิ้นส่วนโปรตีน Domain II และ II-III ของโปรตีนฆ่าลูกน้ำยุงชนิด CRY4Ba จากเชื้อแบคทีเรีย Baci การระบุชนิด และลักษณะของโปรตีนในมนุษย์ที่ทำปฏิกิริยาโพลีโคลนอลแอนติบอดีซีเอ็ม 5 ที่จำเพาะต่อโปรตีนต้านมะเร็ง พี การเปลี่ยนแปลงยีนเพื่อศึกษากรดอะมิโนที่เกี่ยวข้องกับความเป็นพิษในบริเวณส่วนที่ 2 ของโปรตีนชนิด Cry4Ba จาก Bacillus thuringiensis การคัดกรองและการหาสภาวะที่เหมาะสมสาหรับการผลิตเอนไซม์โปรตีเอสโดยแบคทีเรียย่อยสลายโปรตีนเพื่อใช้ในการกาจัดโปรตีนในเปลือ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair