สืบค้นงานวิจัย
การศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียม
ช่อทิพา สกูลสิงหาโรจน์ - มหาวิทยาลัยแม่โจ้
ชื่อเรื่อง: การศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียม
ชื่อเรื่อง (EN): Studies on Callus Culture of Glutinous Thai Rice Varieties in the North of Thailand and Agrobacterium Mediated Transformation of the Glutinous Rice
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ช่อทิพา สกูลสิงหาโรจน์
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
  1. มหาวิทยาลัยแม่โจ้
บทคัดย่อ: เทคนิคพันธุวิศวกรรมสามารถนำมาใช้ในการปรับปรุงพันธุ์ข้าวโดยการถ่ายยืนในข้าว การศึกษาการถ่ายยืนในข้าวจำเป็นที่จะต้องมีสภาวะในการเพาะเลี้ยงแคลลัส และการชักนำให้เกิดต้นที่เหมาะสมเพื่อให้มีประสิทธิภาพการถ่ายยืนสูง ในงานวิจัยนี้ได้ศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวหลายสายพันธุ์และการถ่ายยืนโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียม การทดลองเพาะเลี้ยงแคลลัสจากเมล็ดแก่ของข้าวเหนียวบนอาหารสูดร N6D ที่มีความเข้มข้นของโพรลีนและ 2,4-D ต่างๆกัน, พบว่าข้าวเหนียวเกิดแคลลัสได้ดีเมื่อใช้โพรลืนความเข้มข้น 1.44 หรือ 2.88 ก./ล. ส่วนความเข้มข้นของ 2,4-D ที่เหมาะสมคือ 2 หรือ 4 มก./ล. เมื่อนำแคลลัสไปชักนำให้เกิดเป็นตันบนอาหารสูดร MS ที่มี NAA และไคเนดิน พบว่าแคลลัสของข้าวเหนียวส่วนใหญ่ที่ใช้ทดลองสามารถจริญเป็นต้นได้ ยกเว้นข้าวเหนียวแพร่ และกข 10 การศึกษาประสิทธิภาพของการถ่ายยีนในข้าวเหนียวสันป่าตอง โดยศึกษาความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมสำหรับการคัดเลือกแคลลัส พบว่า ไฮโกรมัยซินที่ความเข้มข้น 50 มิลลิกรัมต่อลิตร หมาะสมสำหรับใช้ในการคัดเลือกแคลลัสที่ได้รับการถ่ายยืน นอกจากนี้ได้ ศึกษาการส่งถ่ายยืนสู่ข้าวเหนียวโดยเชื้ออโกรแบคที่เรียม สายพันธุ์ AGL1 ที่มี binary vector PCAMBIA 1303 ซึ่งมียีน hptll เป็นยีนคัดเลือก และมียืน gusA เป็นยีนรายงานผล พบว่าช่วงเวลาที่เหมาะสมสำหรับการบ่มแคลลัสในสารละลายอโกรแบคที่เรียม คือ 15 นาที โดยให้แคลลัสที่ต้านยาไฮโกรมัยชินสูงถึง 54.37 เปอร์เซ็นด์ แคลลัสที่ต้านยาไฮโกรมัยชิน มีการแสดงออกของยืน gusA และสามารถพัฒนาเป็นต้นได้ จากการวิเคราะห์ต้นข้าวในระดับโมเลกุลด้วยเทคนิคพีซีอาร์โดยใช้โนมิกดีเอ็นเอที่สกัดจากใบข้าว และใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อยีน gusA และ hptll พบว่า มีการแทรกของยืนในจีโนมของตันข้าวดัดแปลงพันธุกรรม การศึกษาประสิทธิภาพการถ่ายยืนในข้าวเหนียวกข พบว่าไฮโกรมัยชินที่ความเข้มขัน 15 มก./ล. เหมาะสมที่จะใช้กัดเลือกแคลลัสที่ได้รับยืน เมื่อทำการศึกษาการถ่ายยืนในข้าวเหนียวพันธุ์ กข 6 โดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียม สายพันธุ์ AGL1 (PCAMBIA 1303) พบว่ามีแคลลัสประมาณ 24.24 เปอร์เซ็นต์ เจริญได้บนอาหารคัดเลือกที่มียาไฮโกรมัยชินเป็นเวลานาน 2 สัปดห์ และแคลลัสที่ต้านทานต่อยาไฮโกรมัยซินมีการแสดงออกของยีนสร้าง เอนไซม์ β - glucuronidase เมื่อตรวจสอบดีเอ็นเอที่สกัดจากแคลลัสและต้นข้าวที่ต้านทานต่อยาปฏิชีวนะไฮโกรมัยชินด้วยเทคนิค PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อยีน hptll พบว่ามียีนแทรกอยู่ในจีโนมของข้าว แสดงว่าสามารถถ่ายยืนในข้าวเหนียวพันธุ์ กข 6 ได้ จากผลการวิจัยนี้แสดงให้เห็นว่าสามารถสร้างต้นข้าวเหนียวสันป่าตองและกข 6 ดัดแปลงพันธุกรรม และได้ข้อมูลที่เป็นประโยชน์สำหรับการปรับปรุงพันธุ์ข้าวเหนียวด้วยเทคนิคพันธุวิศวกรรมโดยถ่ายยืนที่สำคัญและพัฒนาให้ข้าวเหนียวมีผลผลิตสูงและมีคุณภาพที่ดีตามต้องการในอนาคตได้
บทคัดย่อ (EN): Genetic engineering can be used to improve rice varieties by gene transfer techniques. Transformation of indica rice (Oryza sativa L.) requires suitable conditions for callus culture and plant regeneration for high transformation efficiency. In this study, callus culture of several Thai glutinous rice varieties and Agrobacterium-mediated transformation were investigated. Mature rice seeds were cultured on: N6D medium containing different combinations of proline and 2, 4-D concentrations. The results showed that all varieties studied produced high percentage of callus formation at 1.44 or 2.88 g/l proline and 2 or 4 mg/l 2, 4-D. The calli were regenerated on MS medium containing NAA and kinetin. It was found that all varieties except Phare and RD 10 were able to be regenerated into plantlets. Agrobacterium-mediated gene transfer for glutinous rice cv. Niaw Sanpahtawng were performed. The effects of certain factors on rice transformation were studied to improve transformation efficiency. It was found that the antibiotic hygromycin concentration for selection of transformed Niaw Sanpahtawng calli was 50 mg/l which inhibited growth of untransformed calli about 92%. Agrobacterium. tumefaciens strain AGL1 harboring binary vector pCAMBIA1303 containing genes for hygromycin resistance (hptll) and B-glucuronidase (gusA) were used for transformation. The infection time Of 15 min produced the highest percentage (54.37%) of hygromycin-resistant calli. The calli showed the expression of gusA gene and were developed to rice plants. PCR analysis of leaf genomic DNA from transformed plants was conducted using primers specific to gusA and hptll genes. The result indicated that that the hptll and gusA genes were integrated into the rice genome. The first transgenic Niaw Sanpahtawng was normally grown in the greenhouse. Transformation of rice cv. RD 6 was studied. Hygromycin concentration at 15 mg/l was suitable for selection of transformed calli. Transformation of RD 6 by Agrobacterium tumefaciens were performed using Agrobacterium strain AGL1 (PCAMBIA 1303). We found that 24.24 percentage of calli surviving on media supplemented with hygromycin. Hygromycin-resistant calli were GUS positive. PCR analysis of genomic DNA from hygromycin-resistant calli and plants using primers specific to hptll gene indicated the stable integration of genes in transformed calli and rice plants. Overall, the transgenic glutinous rice plants varieties, Niaw Sanpahtawng and RD 6, were developed. This research provided the promising results for future improvement of Thai rice varieties with increased yields and quality by genetic engineering
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://webpac.library.mju.ac.th:8080/mm/fulltext/research/2552/Chotipa_Sakulsingharoj_2549/abstract.pdf
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยแม่โจ้
คำสำคัญ: การคัดเลือกแคลลัส
คำสำคัญ (EN): Agrobacterium Mediated Transformation
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยแม่โจ้
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ช่อทิพา สกูลสิงหาโรจน์. "การศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียมStudies on Callus Culture of Glutinous Thai Rice Varieties in the North of Thailand and Agrobacterium Mediated Transformation of the Glutinous Rice". มหาวิทยาลัยแม่โจ้. 2548

ช่อทิพา สกูลสิงหาโรจน์. "การศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียมStudies on Callus Culture of Glutinous Thai Rice Varieties in the North of Thailand and Agrobacterium Mediated Transformation of the Glutinous Rice". มหาวิทยาลัยแม่โจ้. 2548. Print.



TARR Wordcloud:
การศึกษาการเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรียม
ช่อทิพา สกูลสิงหาโรจน์
มหาวิทยาลัยแม่โจ้
2548
การเพาะเลี้ยงแคลลัสของข้าวเหนียวพันธุ์ต่างๆ ที่ปลูกทางภาคเหนือและการถ่ายยีนในแคลลัสของข้าวเหนียวโดยใช้เชื้ออโกรแบคทีเรีย ศึกษาการแสดงออกของยีนที่แตกต่างกันของปทุมมาที่ปลูกภายใต้วันสั้นและวันยาวโดยการวิเคราะห์ลำดับเบสของ RNA ศึกษาลักษณะสัณฐานวิทยาของมะม่วงพันธุ์ต่างๆ ผลของอุณหภูมิในการเก็บรักษาต่อการเปลี่ยนแปลงความหนืด ของข้าวพันธุ์ต่างๆ ผลของ 2,4-D ต่อการเพาะเลี้ยงชิ้นส่วนต่างๆ ของยางพาราในสภาพปลอดเชื้อ ผลของสูตรอาหารและสารควบคุมการเจริญเติบโตต่อการชักนำให้เกิดแคลลัสในข้าวไร่พันธุ์ดอกพะยอม สมดุลธาตุอาหารในระบบการปลูกปลูกหมุนเวียนข้าว - ถั่ว บนพื้นที่สูงใน ภาคเหนือของประเทศไทย ศักยภาพการจัดการกลุ่มวิสาหกิจชุมชนผลิตภัณฑ์ข้าวเหนียวในจังหวัดสกลนคร ผลของการใช้แบคทีเรียละลายฟอสเฟตในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของข้าวในสภาพแอโรบิก วิธีการผสมผสานในการจำแนกเชื้อ Xanthomanas axonopodis pv. citri ที่แยกจากมะนาว และมะกรูดในเขตจังหวัดมหาสารคาม
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair