คลังข้อมูลการวิจัยการเกษตรไทย

ผู้แต่ง ภาณุพงศ์ นุตทะบัติ

เผยแพร่โดย

1 สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 2 สถาบันชีววิทยาศาสตร์ทางการแพทย์ กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 3 ศูนย์วิจัยธาลัสซีเมีย สถาบันชีววิทยาศาสตร์โมเลกุล มหาวิทยาลัยมหิดล 1 National Institute of Health, Department of Medical Sciences 2 Medical Life Sciences Institute, Department of Medical Sciences 3 Thalassemia Research Center Institute of Molecular Biosciences Mahidol University

เผยแพร่เมื่อ 2561

หน่วยงาน 1 สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 2 สถาบันชีววิทยาศาสตร์ทางการแพทย์ กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 3 ศูนย์วิจัยธาลัสซีเมีย สถาบันชีววิทยาศาสตร์โมเลกุล มหาวิทยาลัยมหิดล 1 National Institute of Health, Department of Medical Sciences 2 Medical Life Sciences Institute, Department of Medical Sciences 3 Thalassemia Research Center Institute of Molecular Biosciences Mahidol University

งานวิจัยที่แนะนำ การประเมินความถูกต้องของวิธี PCR-Reverse Dot Blot Hybridization ในการตรวจวินิจฉัยความผิดปกติของยีน β-thalassemia Development of Mayaro virus detection by real-time RT-PCR and retrospective surveillance of incident in Thailand during 2016-2019 การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCR การตรวจหา Suilysin และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของ เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วย สุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคและคนที่เกี่ยวข้องโดยใช้เทคนิค PCR การใช้เทคนิค PCR ตรวจสอบลักษณะพันธุกรรม Malignant Hyperthermia ในสุกรพันธุ์เปียแตรง การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interference การพัฒนาวิธีการจำแนกเชื้อเลปโตสไปรา ด้วยเทคนิคทางอณูชีววิทยา การพัฒนาชุดทดสอบสำหรับตรวจหาเชื้อ Burkhloderia pseudomallei โดยเทคนิค Paper Chromatography Dot Blot Hybridization การพัฒนาการใช้ไหมอีรี่เป็นอาหารกุ้งก้ามกราม การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อซีโรไทป์ โดยใช้เทคนิค multiplex PCR

คัดลอก URL

ชื่อเรื่อง:	การพัฒนาเทคนิค Reverse dot blot hybridization สำหรับตรวจหาความผิดปกติของยีน β-thalassemia Developments of Reverse dot blot hybridization technique for detection of β-thalassemia mutation
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ:	ภาณุพงศ์ นุตทะบัติ
บทคัดย่อ:	β-thalassemia ส่วนใหญ่เกิดจากการมีเบสเปลี่ยนแปลงไปเฉพาะจุดหรือเบสไม่กี่ตัวขาดหายไป การตรวจวินิจฉัยนิยมใช้เทคนิค Allele specific PCR (ASPCR) ซึ่งจำเป็นต้องใช้ Primer หลายชนิด เทคนิค DNA sequencing ซึ่งมีหลายขั้นตอน ทำให้ค่อนข้างยุ่งยาก การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาเทคนิค PCR-Reverse dot blot hybridization สำหรับตรวจหาความผิดปกติของยีน β-thalassemia ที่พบบ่อยในประชากรไทย จำนวน 9 ชนิด ได้แก่ -28 (A>G), Codon 17 (A>T), Codon 19 (A>G), Codon 26 (G>A), IVS I-1 (G>T), IVS I-5 (G>C), Codon 41/42 (-TCTT), Codon 71/72 (+A), IVS II-654 (C>T) โดยคัดเลือก Primer/allele specific oligonucleotide (ASO) probe ยึดติดกับแผ่นไนลอนนำไปทำปฏิกิริยา hybridization กับ PCR Product ของดีเอ็นเอตัวอย่างซึ่งมี Biotin ติดอยู่กับ primer ที่อุณหภูมิ 45oC, 45 นาที ตรวจสอบปฏิกิริยาด้วยเอนไซม์ Alkaline Phosphatase และ substrate NBT/BCIP ผลการศึกษาในตัวอย่าง DNA จำนวน 250 ตัวอย่าง มีค่า Sensitivity, Specificity และ Accuracy ร้อยละ 100 ทั้งหมด เมื่อเปรียบเทียบกับเทคนิค DNA Sequencing สามารถตรวจหาความผิดปกติได้ 9 ชนิดในการทำปฏิกิริยาเพียงครั้งเดียว เป็นวิธีที่ไม่ยุ่งยาก ราคาไม่แพงและไม่ต้องใช้เครื่องมือที่สลับซับซ้อน เหมาะสำหรับนำไปใช้ตรวจวิเคราะห์ในงานประจำ เพื่อสนับสนุนการควบคุมและป้องกันโรคธาลัสซีเมียในเขตบริการสุขภาพได้อย่างมีประสิทธิภาพ β-thalassemia are caused by point mutation or small deletion. Most detection technique for β -thalassemia mutations are allele specific PCR (ASPCR) and DNA sequencing. ASPCR is challenged by using a great number of primers. DNA sequencing is rather complicate and requires multiple steps. The aims of study are to developments and validate the reliable of reverse dot blot hybridization technique for detection of nine common β-thalassemia mutations in Thai population including, -28 (A>G), codon 17 (A>T), codon 19 (A>G), codon 26 (G>A), codon 41/42 (-TCTT), codon 71/72 (+A), IVS I-1 (G>T), IVS I-5 (G>C), and IVS II-654 (C>T). Set of selected allele oligonucleotide (ASO) probes were immobilized on a single nylon membrane strip and hybridization of the strip to biotin-labeled PCR products at 45oC for 45 min. The streptavidin-alkaline phosphatase conjugate can be used to detect biotin and then detection by substrate NBT/BCIP. We found sensitivity, specificity and accuracy of 100% in β-thalassemia diagnosis by reverse dot blot hybridization compare with DNA sequencing. This method provides a rapid, simple, and cost-effective. In addition, it enables to diagnose several mutations with a single hybridization reaction. Therefore, reverse dot blot hybridization may be appropriate to identify common β-thalassemia genotypes and help to control andprevention of severe β-thalassemia disease in area health services.
บทคัดย่อ:	ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN):	th
เอกสารแนบ:	http://nih.dmsc.moph.go.th/research/showimgdetil.php?id=650
เผยแพร่โดย:	1 สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 2 สถาบันชีววิทยาศาสตร์ทางการแพทย์ กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ 3 ศูนย์วิจัยธาลัสซีเมีย สถาบันชีววิทยาศาสตร์โมเลกุล มหาวิทยาลัยมหิดล 1 National Institute of Health, Department of Medical Sciences 2 Medical Life Sciences Institute, Department of Medical Sciences 3 Thalassemia Research Center Institute of Molecular Biosciences Mahidol University
คำสำคัญ:	Reverse dot blot hybridization
เจ้าของลิขสิทธิ์:	สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุขกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์