สืบค้นงานวิจัย
การถ่ายยีนสร้างโปรตีน cylindrical inclusion ของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนในมะละกอเข้าสู่พืช
Kittapong Tang - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การถ่ายยีนสร้างโปรตีน cylindrical inclusion ของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนในมะละกอเข้าสู่พืช
ชื่อเรื่อง (EN): Transformation and characterization of plants with PRSV CI gene
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Kittapong Tang
บทคัดย่อ: ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเป็นโรคที่สำคัญซึ่งสร้างความเสียหายเป็นอย่างมากต่อ การปลูกมะละกอทั้งในประเทศไทยและทั่วโลก การควบคุมการระบาดของโรคด้วยวิธีดั้งเดิมยังไม่ ประสบผลสำเร็จ การใช้เทคนิคการถ่ายยีนของไวรัสเข้าสู่พืช อันเนื่องมาจากแนวคิด Pathogenderived resistance เป็นวิธีใหม่ที่มีประสิทธิภาพในการสร้างพืชดัดแปรพันธุกรรมที่ต้านทานไวรัส ในการศึกษานี้ได้ทดลองใช้ยีน CI ของไวรัสใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอชนิด W ในการป้องกัน โรคไวรัสในต้นยาสูบ แตงไทย และมะละกอ โดยทำการสร้างพลาสมิดพาหะที่มีการเรียงตัวของยีน CI ในรูปแบบปกติ (direct) และกลับทิศ (inverse) แล้วนำเข้าสู่ยาสูบดังกล่าวโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA101 และนำเข้าสู่แตงไทยและมะละกอด้วยวิธียิง อนุภาคเพื่อสร้างพืชดัดแปรพันธุกรรม จากการถ่ายยีนเข้าสู่ต้นยาสูบ ได้ยาสูบแปลงพันธุ์ที มียีน CI ปกติ จำนวน 17 สายพันธุ์ และสาย พันธุ์มียีน CI กลับทิศจำนวน 19 สายพันธุ์ จากการทดสอบความต้านทานต่อเชื้อไวรัส Potato virus Y ในต้นยาสูบแปลงพันธุ์ทั้ง 36 สายพันธุ์นั้น พบว่าต้นยาสูบทั้งหมดแสดงการติดเชื้อไวรัส ในการ ถ่ายยีนเข้าสู่แตงไทย ได้ยอดแตงไทยที่มียีน CI ปกติ เพียง 1 ยอดเท่านั้น ซึ่งต่อมาได้ตายในระหว่าง การปรับสภาพเพื่อการย้ายปลูก จากการถ่ายยีนเข้าสู่มะละกอแลละคัดเลือกแคลลัส ได้แคลลัสที่มียีน CI ปกติ และยีน CI กลับทิศ อย่างละ 4 สายพันธุ์ หลังจากเลี้ยงแคลลัสทั้ง 8 สายพันธุ์บนอาหารที ไม่ มีกานามัยซิน แล้วนำมาตรวจสอบความคงอยู่ของยีน CI ด้วยวิธี Southern hybridization พบว่ามี เพียง 1 สายพันธุ์เท่านั้นที่ยังคงมียีน CI อยู่ อาจเป็นไปได้ว่ายีน CI ที่พบในแคลลัสได้สูญหายไปใน ระหว่างขั้นตอนการเพิ่มจำนวนแคลลัส เนื่องจากไม่มีการคัดเลือกโดยกานามัยซิน
บทคัดย่อ (EN): Papaya ringspot virus (PRSV) is a serious disease of papaya (Carica papaya) causing significant damage to papaya plantations in Thailand and throughout the world. The attempts to control PRSV by the conventional methods were unsuccessful. The alternative effective method based on the concept of pathogen-derived resistance was the transformation of plants with the viral gene which would confer the virus resistance. In this study, the binary vectors containing the expression cassette of direct CI gene and inverse CI gene from PRSV-W were constructed. The transformation of tobacco was performed via Agrobacterium tumefaciens strain EHA101, while Thai melon and papaya were transformed by particle gun bombardment. Seventeen lines of transgenic tobacco containing a direct CI gene and 19 lines of transgenic tobacco containing an inverse CI gene were obtained. All of them did not show heterologous resistance when challenged with Potato virus Y. Only 1 regenerated shoot of Thai melon bombarded with the direct CI-binary vector showed the presence of CI integration, but it died during the acclimatization. In the case of papaya transformation, 4 lines of kanamycin-resistant calli harboring the direct CI cassette and the inverse CI cassette were obtained in each group. These 8 lines of transgenic papaya were verified for the integration of CI gene by Southern blot hybridization after propagation on non-selective medium. Only 1 line, 28009, showed the presence of CI gene. The transgene in calli was lost presumably due to the removal of kanamycin selection during the callus propagation step.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=969&obj_id=515
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Transformation (Genetics)
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเป็นโรคที่สำคัญซึ่งสร้างความเสียหายเป็นอย่างมากต่อ การปลูกมะละกอทั้งในประเทศไทยและทั่วโลก การควบคุมการระบาดของโรคด้วยวิธีดั้งเดิมยังไม่ ประสบผลสำเร็จ การใช้เทคนิคการถ่ายยีนของไวรัสเข้าสู่พืช อันเนื่องมาจากแนวคิด Pathogenderived resistance เป็นวิธีใหม่ที่มีประสิทธิภาพในการสร้างพืชดัดแปรพันธุกรรมที่ต้านทานไวรัส ในการศึกษานี้ได้ทดลองใช้ยีน CI ของไวรัสใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอชนิด W ในการป้องกัน โรคไวรัสในต้นยาสูบ แตงไทย และมะละกอ โดยทำการสร้างพลาสมิดพาหะที่มีการเรียงตัวของยีน CI ในรูปแบบปกติ (direct) และกลับทิศ (inverse) แล้วนำเข้าสู่ยาสูบดังกล่าวโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA101 และนำเข้าสู่แตงไทยและมะละกอด้วยวิธียิง อนุภาคเพื่อสร้างพืชดัดแปรพันธุกรรม จากการถ่ายยีนเข้าสู่ต้นยาสูบ ได้ยาสูบแปลงพันธุ์ที มียีน CI ปกติ จำนวน 17 สายพันธุ์ และสาย พันธุ์มียีน CI กลับทิศจำนวน 19 สายพันธุ์ จากการทดสอบความต้านทานต่อเชื้อไวรัส Potato virus Y ในต้นยาสูบแปลงพันธุ์ทั้ง 36 สายพันธุ์นั้น พบว่าต้นยาสูบทั้งหมดแสดงการติดเชื้อไวรัส ในการ ถ่ายยีนเข้าสู่แตงไทย ได้ยอดแตงไทยที่มียีน CI ปกติ เพียง 1 ยอดเท่านั้น ซึ่งต่อมาได้ตายในระหว่าง การปรับสภาพเพื่อการย้ายปลูก จากการถ่ายยีนเข้าสู่มะละกอแลละคัดเลือกแคลลัส ได้แคลลัสที่มียีน CI ปกติ และยีน CI กลับทิศ อย่างละ 4 สายพันธุ์ หลังจากเลี้ยงแคลลัสทั้ง 8 สายพันธุ์บนอาหารที ไม่ มีกานามัยซิน แล้วนำมาตรวจสอบความคงอยู่ของยีน CI ด้วยวิธี Southern hybridization พบว่ามี เพียง 1 สายพันธุ์เท่านั้นที่ยังคงมียีน CI อยู่ อาจเป็นไปได้ว่ายีน CI ที่พบในแคลลัสได้สูญหายไปใน ระหว่างขั้นตอนการเพิ่มจำนวนแคลลัส เนื่องจากไม่มีการคัดเลือกโดยกานามัยซิน
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การถ่ายยีนสร้างโปรตีน cylindrical inclusion ของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนในมะละกอเข้าสู่พืช
Kittapong Tang
มหาวิทยาลัยมหิดล
2546
การตรวจวิเคราะห์ยีนโปรตีนเปลือกหุ้มของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนที่ถ่ายฝากในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม G2 การใช้ไวรัสใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเป็นยีนพาหะเพื่อผลิตโปรตีนแปลกปลอมในพืชแบบชั่วคราว การวิเคราะห์ยีนถ่ายทอดไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม การศึกษาโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับกลไกการควบคุมการถอดรหัสของยีนที่ไม่แสดงออกในพืชที่ผ่านการถ่ายยีน การศึกษาเกี่ยวกับจีโนมและการสร้าง infectious transcript ของไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอสายพันธุ์ w การใช้โปรตีนเรืองแสงสีเขียวในการศึกษาตำแหน่งภายในเซลล์ของโปรตีน P3 ของไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวน / Sarasate Eiamtanasate การใช้ไวรัสโรคใบด่างจุดวงแหวนในมะละกอเพื่อผลิตและนำเสนอแอนติเจนแปลกปลอมอย่างเป็นระบบ การผลิตโปรตีนจากยีนส่วนนิวคลีโอโปรตีนของเชื้อไข้หวัดใหญ่ชนิดเอ การถ่ายยีนแอนติฟริซโปรตีนดัดแปรในสตรอเบอรี การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีน
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก