สืบค้นงานวิจัย
การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่สามารถควบคุมเชื้อราที่ปนเปื้อนบนแผ่นยางพารา
เสาวลักษณ์ พงษ์ไพจิตร - มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
ชื่อเรื่อง: การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่สามารถควบคุมเชื้อราที่ปนเปื้อนบนแผ่นยางพารา
ชื่อเรื่อง (EN): Screening of antagonistic microorganisms for controlling fungal contaminations on pararubber sheet
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: เสาวลักษณ์ พงษ์ไพจิตร
บทคัดย่อ: บทคัดย่อ วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้เพื่อคัดเลือกเชื้อแบคทีเรียปฏิปักษ์ในกลุ่มเชื้อ Bacillus spp. และ actinomycetes เพื่อนำมายับยั้งเชื้อราที่ปนเปื้อนบนแผ่นยางพารา โดยทำการแยกเชื้อ Bacillus spp. จำนวน 206 ไอโซเลทและ actinomycetes 151 ไอโซเลท จากตัวอย่างดินและตัวอย่างยางพาราแผ่น นำมาทดสอบความสามารถเบื้องต้นในการยับยั้งเชื้อราที่ปนเปื้อนบนแผ่นยางพาราในภาคใต้ของไทยจำนวน 6 ไอโซเลท ซึ่งประกอบด้วย Aspergillus spp. 2 ไอโซเลท Penicillium sp. 1 ไอโซเลท Fusarium sp. 1 ไอโซเลท Rhizopus sp. 1 ไอโซเลท และ Cladosporium sp. 1 ไอโซเลท ด้วยวิธี dual culture technique พบว่า 85% ของเชื้อ actinomycetes สามารถยับยั้งเชื้อราได้อย่างน้อย 1 ไอโซเลท ในขณะที่เชื้อ Bacillus spp. เพียง 16% ที่แสดงฤทธิ์ต้านรา ดังนั้นจึงคัดเลือกเฉพาะเชื้อ actinomycetes ที่สามารถยับยั้งเชื้อราได้ดีที่สุดจำนวน 30 ไอโซเลท มาเพาะเลี้ยงในอาหารเหลว ISP-2 นำน้ำเลี้ยงเชื้อมาทดสอบฤทธิ์ต้านราด้วยวิธี agar dilution พบว่าน้ำเลี้ยงเชื้อ actinomycetes AC41 และ AC51 สามารถยับยั้งเชื้อราทุกไอโซเลทได้มากกว่า 80% น้ำเลี้ยงเชื้ออีกส่วนหนึ่งได้นำไปสกัดด้วย ethyl acetate แล้วนำสารสกัดหยาบมาหาค่า minimum inhibitory concentration (MIC) ด้วยวิธี broth microdilution สารสกัดจากเชื้อปฏิปักษ์ actinomycetes 8 ไอโซเลท คือ AC37, AC41, AC51, AC70, AC72, AC74, AC78 และ AC84 สามารถยับยั้งเชื้อราทดสอบได้ทั้ง 6 ไอโซเลท โดยมีค่า MIC อยู่ในช่วง 8-200 ?g/ml ซึ่งเชื้อ AC41 และ AC51 ให้ค่า MIC ดีที่สุดอยู่ในช่วง 16-64 ?g/ml มีค่าใกล้เคียงกับสารต้านราพาราไนโตรฟีนอลที่ให้ค่า MIC ในช่วง 32-128 ?g/ml เมื่อศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการสร้างสารต้านเชื้อราของ AC41 และ AC51 โดยศึกษาปัจจัยที่เกี่ยวข้อง 3 ปัจจัย คือ การเขย่า พีเอช และอุณหภูมิ พบว่าสภาวะที่ดีที่สุดในการสร้างสารต้านเชื้อรา คือ เลี้ยงเชื้อแบบไม่เขย่า อาหารเลี้ยงเชื้อมีค่าพีเอชเริ่มต้น 7 และอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เชื้อปฏิปักษ์ actinomycetes ทั้ง 8 ไอโซเลทที่สามารถยับยั้งเชื้อราทดสอบได้ทุกตัว ได้นำมาจำแนกด้วยวิธีทางสัณฐานวิทยาและวิธีทางชีวโมเลกุล พบว่าจัดอยู่ในจีนัส Streptomyces เมื่อทดสอบประสิทธิภาพของน้ำเลี้ยงเชื้อและสารสกัดจาก Streptomyces sp. AC41 และ AC51 ในการควบคุมการเจริญของเชื้อราบนยางแผ่นโดยการชุบสารและหยดเชื้อ Aspergillus sp. SR9 และ Penicillium sp. PR02 ลงไปบนแผ่นยาง พบว่าน้ำเลี้ยงเชื้อ Streptomyces sp. AC41 และ AC51 ไม่สามารถควบคุมการเจริญของเชื้อราได้ ส่วนสารสกัดความเข้มข้น 1 mg/ml สามารถควบคุมการเจริญของเชื้อราได้ประมาณ 9 วัน ใกล้เคียงกับสารต้านราพาราไนโตรฟีนอล ซี่งดีกว่าชุดควบคุมที่ไม่ได้เติมสารที่สังเกตพบการเจริญของเชื้อราในวันที่ 5 เมื่อนำแผ่นยางชุบสาร iii สกัด AC51 ความเข้มข้น 16 MIC (512 ?g/ml) ในสภาพธรรมชาติ สามารถควบคุมการเจริญของเชื้อราได้ 32 วัน ส่วนการเติมสารสกัด AC51 ในขั้นตอนการตกตะกอนของการเตรียมยางแผ่นและหยดเชื้อบนยางแผ่นที่เตรียมได้พบว่าที่ความเข้มข้น 32 MIC ไม่สามารถควบคุมการเจริญของเชื้อรา Aspergillus sp. SR9 ได้ แต่สามารถควบคุม Penicillium sp. PR02 ได้ใกล้เคียงกับสารต้านราพาราไนโตรฟีนอล ความเข้มข้น 8 MIC สำหรับในสภาพธรรมชาติพบว่าสารสกัด ความเข้มข้น 32 MIC สามารถควบคุมการเจริญของเชื้อราได้ใกล้เคียงกับสารต้านราพาราไนโตรฟีนอล ความเข้มข้น 32 MIC และเมื่อศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอนชนิดส่องกราด พบว่าสารสกัด Streptomyces sp. AC51 ทำลายผนังเซลล์ของเชื้อราทำให้มีการรั่วไหลของสารออกมานอกเซลล์ ทำการแยกสารจากส่วนสกัดหยาบเอธิลอะซิเตทจากน้ำเลี้ยงเชื้อ Streptomyces sp. AC51 แยกได้สาร tetrangulol methyl ester เป็นสารหลัก และสาร 8-O-methyltetrangomycin และ tetrangulol
บทคัดย่อ (EN): ABSTRACT The aim of this study was to isolate Bacillus spp. and actinomycetes and screen for their antagonistic activity against fungi contaminated on para rubber sheet. Total of 206 Bacillus spp. and 151 actinomycetes from soils and para rubber sheets were screened for antagonistic activity by dual culture technique against six fungi (2 Aspergillus spp., 1 Penicillium sp., 1 Fusarium sp., 1 Rhizopus sp. and 1 Cladosporium sp.) commonly found on contaminated para rubber sheets in southern Thailand. Eighty-five percents of actinomycetes exhibited antifungal activity against at least one fungal isolate, whereas only 16% of Bacillus isolates was active. Thus, the top 30 actinomycetes having antifungal activity were selected for fermentation in ISP-2 broth. The culture filtrates were tested for antifungal activity by agar dilution. Actinomycetes isolates AC41 and AC51 showed >80% inhibitory activity against all tested fungi. The culture filtrates were also extracted with ethyl acetate and the crude extracts were tested for their minimal inhibitory concentrations (MICs) by broth microdilution. Extracts from 8 actinomycetes AC37, AC41, AC51, AC70, AC72, AC74, AC78 and AC84 exhibited antifungal activity against all tested fungi with MICs ranging from 8-200 ?g/ml. The best MICs were in the range of 16-64 ?g/ml by AC41 and AC51 which appeared to be comparable to p-nitrophenol, a control antifungal agent (32-128 ?g/ml). The effect of agitation, initial pH and temperature on the production of antifungal metabolites by the isolates AC41 and AC51 was investigated. The optimum conditions for AC41 and AC51 were observed at the static condition, pH7 and temperature 30oC. The top 8 antagonistic actinomycetes were identified by morphological characteristics and molecular technique (16S rDNA). All of these actinomycetes are in the genus Streptomyces. Para rubber sheet soaked with culture broths of Streptomyces sp. AC41 and AC51 and challenged with Aspergillus sp. SR9 และ Penicillium sp. PR02 could not control fungal growth while crude extracts (1 mg/ml) could control fungal growth for 9 days which was similar to the result obtained from p-nitrophenol. In natural infection experiment, para rubber sheet soaked with crude extract of Streptomyces sp. AC51 (16 MIC, 512 ?g/ml) could control fungal growth for 32 days. Para rubber sheet supplemented with crude extract of Streptomyces sp. AC 51 (32MIC) and challenged with fungi could not control the growth of Aspergillus sp. SR9 but could v control Penicillium sp. PR02 comparable to the use of p-nitrophenol (8MIC). However, in natural infection, AC51 (32MIC) was as effective as p-nitrophenol (32MIC). Electron microscopic study revealed that AC51 destroyed fungal cells resulting in the leaking of cell components. Tetrangulol methyl ester was the main component isolated from the crude ethyl acetate extract of Streptomyces sp. AC51 along with other two compounds, 8-O-methyltetrangomycin and tetrangulol.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
คำสำคัญ (EN): pararubber sheet
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การคัดเลือกเชื้อจุลินทรีย์ที่สามารถควบคุมเชื้อราที่ปนเปื้อนบนแผ่นยางพารา
มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
30 กันยายน 2553
การใช้ไคโตซานเป็นสารยับยั้งเชื้อราบนแผ่นยางพารา การควบคุมเชื้อรา Phytophthora parasitica Dastur. สาเหตโรคใบร่วงยางพารา โดยเชื้อจุลินทรีย์ปฏิปักษ์ ความสามารถของเชื้อราเอนโดไฟท์จากมะเขือเทศ ส้ม และยางพารา ในการยับยั้งการเจริญของเชื้อรา โครงการวิจัยการควบคุมการปนเปื้อนจุลินทรีย์และสารพิษจากเชื้อราในกระบวนการผลิตผลิตผลเกษตรหลังการเก็บเกี่ยว การคัดเลือกเชื้อราเอนโดไฟท์ที่สามารถควบคุมโรคเน่าที่เกิดจากเชื้อรา Rhizoctonia solani ของต้นกล้ายูคาลิปตัส การคัดเลือกสายพันธุ์และการศึกษาเพื่อจำแนกเชื้อราปฏิปักษ์ Trichoderma spp. ที่มีศักยภาพในการควบคุมเชื้อราสาเหตุโรคพืชที่สำคัญ การควบคุมกระบวนการผลิตเพื่อป้องกันการปนเปื้อนจากเชื้อจุลินทรีย์ในโรงงานเส้นก๋วยเตี๋ยวแห้ง เชื้อราในกะปิ ผลของการใช้เชื้อจุลินทรีย์ร่วมกับไคโตซานในการควบคุมเชื้อสาเหตุโรครากเน่าโคนเน่าของยางพารา การคัดเลือกเชื้อ actinomycetes เบื้องต้นเพื่อควบคุมเชื้อรา Lasiodiplodia sp. สาเหตุโรคปลีเน่าในดอกหน้าวัว
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก