สืบค้นงานวิจัย
การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interference
สุรินทร์ ปิยะโชคณากุล, อมรา ทองปาน, สมพิศ สามิภักดิ์ - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interference
ชื่อเรื่อง (EN): Functional analysis of curcuminoid biosynthetic gene in turmeric by RNA interference
บทคัดย่อ: จากการตรวจเอกสารทราบว่า การสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์เกิดจากการทำงานร่วมกันของเอนไซม์ 2 ชนิด คือ diketide-CoA synthase (DCS) และ curcumin synthase (CURS) ทำให้ทราบวิถีการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ และมีรายงานการโคลนยีนทั้ง 2 ยีน ดังกล่าวแล้ว จึงออกแบบไพรเมอร์เพื่อเพิ่มปริมาณส่วนของยีน DCS และ CURS นำแต่ละยีนมาเชื่อมต่อกันแบบกลับทิศทางในพลาสมิดโดยใช้ระบบ Gateway recombination ถ่ายยีนเข้าสู่ขมิ้นโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่มีพลาสมิด pSTARGATE ที่ตัดต่อยีนเรียบร้อยแล้ว เพื่อตรวจสอบการทำงานของยีนโดย RNA interference จากการถ่ายยีน DCS เข้าสู่ยอดอ่อนขมิ้นชันที่เพาะเลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม BA 2มก./ล.สามารถคัดเลือกและตรวจพบต้นที่ได้รับการถ่ายยีนโดยวิธี PCR 3 ต้น มีแถบดีเอ็นเอต่างจากต้นที่ไม่ได้รับการถ่ายยีน ส่วนการถ่ายยีน CURS ยอดขมิ้นที่ได้ยังไม่มีการขยายตัว จึงยังไม่สามารถตรวจสอบดีเอ็นเอได้ และขมิ้นที่ได้รับการถ่ายยีนทั้งหมดเจริญเติบโตช้า จึงยังไม่สามารถตรวจสอบการแสดงออกของยีนได้ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสามารถเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อขมิ้นชันให้ปลอดเชื้อและขยายยอดจำนวนมากสำหรับการถ่ายยีน และกระตุ้นให้มีการสร้างสารเคอร์คูมินอยด์ที่บริเวณโคนต้น แต่ไม่สามารถชักนำให้เกิดการสร้างเหง้าได้ จากการตรวจเอกสารทราบว่า การสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์เกิดจากการทำงานร่วมกันของเอนไซม์ 2 ชนิด คือ diketide-CoA synthase (DCS) และ curcumin synthase (CURS) ทำให้ทราบวิถีการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ และมีรายงานการโคลนยีนทั้ง 2 ยีน ดังกล่าวแล้ว จึงออกแบบไพรเมอร์เพื่อเพิ่มปริมาณส่วนของยีน DCS และ CURS นำแต่ละยีนมาเชื่อมต่อกันแบบกลับทิศทางในพลาสมิดโดยใช้ระบบ Gateway recombination ถ่ายยีนเข้าสู่ขมิ้นโดยใช้เชื้อ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 ที่มีพลาสมิด pSTARGATE ที่ตัดต่อยีนเรียบร้อยแล้ว เพื่อตรวจสอบการทำงานของยีนโดย RNA interference จากการถ่ายยีน DCS เข้าสู่ยอดอ่อนขมิ้นชันที่เพาะเลี้ยงในอาหาร MS ที่เติม BA 2มก./ล.สามารถคัดเลือกและตรวจพบต้นที่ได้รับการถ่ายยีนโดยวิธี PCR 3 ต้น มีแถบดีเอ็นเอต่างจากต้นที่ไม่ได้รับการถ่ายยีน ส่วนการถ่ายยีน CURS ยอดขมิ้นที่ได้ยังไม่มีการขยายตัว จึงยังไม่สามารถตรวจสอบดีเอ็นเอได้ และขมิ้นที่ได้รับการถ่ายยีนทั้งหมดเจริญเติบโตช้า จึงยังไม่สามารถตรวจสอบการแสดงออกของยีนได้ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสามารถเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อขมิ้นชันให้ปลอดเชื้อและขยายยอดจำนวนมากสำหรับการถ่ายยีน และกระตุ้นให้มีการสร้างสารเคอร์คูมินอยด์ที่บริเวณโคนต้น แต่ไม่สามารถชักนำให้เกิดการสร้างเหง้าได้
บทคัดย่อ (EN): Pathway of curcuminoids biosynthesis in Curcuma longa was reported. They are synthesized by the coordination of two enzyme clusters, diketide-CoA synthase (DCS) and curcumin synthase (CURS). These two genes have been cloned. Therefore, specific primers were designed to amplify the fragment of DCS and CURS genes from turmeric. The fragment from each gene was separately joined in the inverted orientation for the construction of the plasmid for RNA interference technique using Gateway recombination system. The plasmid pSTARGATE harboring the DCS or CURS gene in the RNAi construct was transformed to turmeric shoots. Cocultivaion of Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 and turmeric shoot tissue was done followed by in vitro propagation of turmeric shoot on MS medium supplemented with 2 mg/l BA. The putative DCS transformed plants were obtained and 3 clones were confirmed by PCR. The putative CURS transformed plants were obtained, however, the shoots were small and not suitable for PCR analysis. The growth of all transformed shoots were very slow making them not capable for expression study yet. For tissue culture part, multiple shoots of turmeric could be produced for gene transformation. Curcuminoids biosynthesis could also be induced at base of the shoots but the induction into rhizome was failed. Pathway of curcuminoids biosynthesis in Curcuma longa was reported. They are synthesized by the coordination of two enzyme clusters, diketide-CoA synthase (DCS) and curcumin synthase (CURS). These two genes have been cloned. Therefore, specific primers were designed to amplify the fragment of DCS and CURS genes from turmeric. The fragment from each gene was separately joined in the inverted orientation for the construction of the plasmid for RNA interference technique using Gateway recombination system. The plasmid pSTARGATE harboring the DCS or CURS gene in the RNAi construct was transformed to turmeric shoots. Cocultivaion of Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 and turmeric shoot tissue was done followed by in vitro propagation of turmeric shoot on MS medium supplemented with 2 mg/l BA. The putative DCS transformed plants were obtained and 3 clones were confirmed by PCR. The putative CURS transformed plants were obtained, however, the shoots were small and not suitable for PCR analysis. The growth of all transformed shoots were very slow making them not capable for expression study yet. For tissue culture part, multiple shoots of turmeric could be produced for gene transformation. Curcuminoids biosynthesis could also be induced at base of the shoots but the induction into rhizome was failed.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ:
  1. ขมิ้นชัน
  2. ยีน
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

สุรินทร์ ปิยะโชคณากุล, อมรา ทองปาน, สมพิศ สามิภักดิ์. "การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interferenceFunctional analysis of curcuminoid biosynthetic gene in turmeric by RNA interference". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2553

สุรินทร์ ปิยะโชคณากุล, อมรา ทองปาน, สมพิศ สามิภักดิ์. "การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interferenceFunctional analysis of curcuminoid biosynthetic gene in turmeric by RNA interference". มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. 2553. Print.



TARR Wordcloud:
การวิเคราะห์การทำงานของยีนที่ใช้ในการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชันโดย RNA interference
สุรินทร์ ปิยะโชคณากุล อมรา ทองปาน สมพิศ สามิภักดิ์
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2553
การโคลนยีนและตรวจสอบการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์สารเคอร์คูมินอยด์ในขมิ้นชัน กลุ่มยีนย่อยสลายไม้ที่สามารถสังเคราะห์สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพโดยใช้เทคนิคพันธุวิศวกรรมเพื่อประยุกต์ใช้ทางด้านเทคโนโลยีชีวภาพ(ระยะที่ 2) การใช้ยีน MyD88 เป็นยีนติดตาม (gene Marker) ประสิทธิภาพสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันในปลากะพงขาว (lates calcarifer) การใช้ยีนสร้างแอนโทไซยานินเป็นยีนเครื่องหมายสำหรับการถ่ายยีนในพืชและเป็นยีนเป้าหมายเพื่อเพิ่มมูลค่าพืชเศรษฐกิจ การตรวจสอบความเป็นพิษต่อยีนและฤทธิ์ยับยั้งการกลายพันธุ์ของสารสกัดจากลองกองโดยใช้แบคทีเรีย Salmonella การสร้างแอพพลิเคชั่นเพื่อตรวจวัดสารเคอร์คูมินในสมุนไพรขมิ้นชันพร้อมกันทีละหลายตัวอย่างแบบทราบผลทันที การคัดเลือกพันธุ์ข้าวไทยที่ทนทานต่ออุณหภูมิสูง เพื่อใช้ในการวิเคราะห์หากลุ่มยีนที่ตอบสนองต่ออุณหภูมิสูงโดยใช้เทคนิค cDNA-SRAP การชักนำความแปรปรวนทางพันธุกรรมในขมิ้นชันโดยใช้รังสีแกมมา การศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของยีนควบคุมการสังเคราะห์แอนโทไซยานินในข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าวให้มีคุณค่าทางโภชนาการสูงขึ้น การปรับปรุงประสิทธิภาพระบบการส่งถ่ายดีเอ็นเอของ Spirulina platensis C1 ด้วยการใช้ยีน methylase และการยับยั้งการทำงานของ restriction enzyme
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair