สืบค้นงานวิจัย
การสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรียที่ก่อโรคในปลานิลและการค้นหาและทดสอบสารต้านหรือยับยั้งการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อดังกล่าวจากสารสกัดธรรมชาติเพื่อนามาทดแทนการใช้ยาปฏิชีวนะ ปีที่ 2
ดร. ชุมพร สุวรรณยาน - สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
ชื่อเรื่อง: การสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรียที่ก่อโรคในปลานิลและการค้นหาและทดสอบสารต้านหรือยับยั้งการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อดังกล่าวจากสารสกัดธรรมชาติเพื่อนามาทดแทนการใช้ยาปฏิชีวนะ ปีที่ 2
ชื่อเรื่อง (EN): Biofilm formations by bacteria that cause diseases in tilapia and screening and testing for inhibitors of these bacteria biofilms from natural products to replace the use of antibiotics, Second Year
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ดร. ชุมพร สุวรรณยาน
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
บทคัดย่อ: การก่อโรคของแบคทีเรียในคนและสัตว์ส่วนใหญ่มักจะมีความสัมพันธ์หรือขึ้นกับความสามารถ ในการเกาะและการสร้างโบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรียที่ก่อโรคเหล่านั้นในหรือบนตัวสัตว์หรือในสิ่งแวดล้อมที่ สัตว์อาศัยอยู่ วีธีการควบคุมโรคที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรียวิธีหนึ่งคือการยับยั้งการสร้างโบโอฟิล์มของ แบคทีเรียโดยใช้สารที่ไม่ฆ่าหรือยับยั้งการเจริญของแบคทีเรียก่อโรคชนิดนั้นแต่ไปกวนการสื่อสารของ แบคทีเรียทำให้แบคทีเรียไม่สามารถสร้างหรือลดการสร้างไบโอฟิล์ม เอนไซม์หรือสารพิษที่เป็นอันตรายต่อ สัตว์ ในปีที่สองของโครงการนี้คณะผู้วิจัยได้พัฒนาวิธีการเพาะเลี้ยงไบโอฟิล์มของเชื้อก่อโรคในปลานิล เพิ่มเติมอีกสอง isolates ได้แก่เชื้อ Froncisella noatunensis และ Streptoccus agalactice serotype 10 (ซึ่งเป็นสายพันธ์ที่ท่านผู้ทรงคุณวุฒิแนะนำให้ทำเพิ่มเติมจากเดิมที่ทดสอบเพียง group B serotype 3 เพียง serotype เดียว) จากปีก่อนหน้าที่ได้ทำสำเร็จไปแล้ว 6 ชนิด 7 isolates รวมทั้งสิ้น 9 isolates ซึ่งประกอบด้วยสองเชื้อข้างต้นและเชื้อ Aeromonas iondoei. A. veronii, A hydrophila. S. ogaloctice, และ Flovobocterium columnore โดยเลี้ยงบนพื้นผิวของถาดหลุมพลาสติกชนิด polystyrene ทั้งที่เคลือบและไม่เคลือบด้วย pelatin ที่แยกจากหนังปลานิลหรือ chitosan ที่แยกจาก เปลือกกุ้ง สำหรับเชื้อ Fran. nootunensis ได้ทดลองเลี้ยงด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อที่ต่างกันรวม 7 สูตร จากนั้น ได้นำวิธีที่พัฒนาได้ไปทดสอบและคัดกรองหาสารที่มีฤทธิ์ยับยั้งการสร้างไบโอฟิล์มแต่ไม่ยับยั้งการ เจริญเติบโตในอาหารเหลวของเชื้อดังกล่าว โดยในปีนี้ได้คัดกรองหาสารที่ยับยั้งไบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรีย ก่อโรคเพิ่มอีก 6 isolotes ได้แก่ เชื้อ A. hydrophila, S. agoloctice serotype 10, Fla. columnore จำนวน 3 isolates และ Fran. nootunensis นอกจากนี้แล้วยังได้ทำการทดสอบเพื่อหาวิธีทำให้ปลานิลติด เชื่อ (infection models) ที่เหมาะสมสำหรับเชื่อ Fla. columnare, A veronii, A. jondaii uaะ A. hydrophilo ก่อนจะนำ infection models ที่ได้ได้ไปทดสอบผลของการให้สารสกัดที่มีฤทธิ์ยับยั้งการสร้างไบ โอฟิล์มของเชื้อทั้งสี่ดังกล่าว โดยการนำสารหรือเชื้อที่ยับยั้งโบโอฟิล์มของเชื้อก่อโรคไปผสมอาหารให้ปลานิลกินก่อนและหลังการทำให้ปลาติดเชื้อ ผลการทดสอบที่ได้คือสารสกัดเหล่านี้สามารถปกป้องหรือทำให้ปลา นิลให้รอดตายได้มากขึ้นเช่นเดียวกับการให้สารยับยั้งไบโอฟิล์มของเชื้อ 5. ogoloctice ที่ทดสอบในปีแรก ของโครงการ ยกเว้นของ A. hydrophila ที่ยังไม่สามารถสรุปได้เพราะปลาที่ทดลองมีอัตราการตายที่ต่ำ มากผลที่ได้จึงไม่ต่างกันอย่างมีนัยยะสำคัญ จากตรวจดูการแสดงออกของยืนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างไบโอ ฟิล์มของเชื้อ Fla, columngre isolate 15 เมื่อได้รับน้ำเลี้ยงเชลล์ของเชื้อ Leนconostoc pseudomesenteroides SC1 ซึ่งเป็นแลคติกแอชิดแบคทีเรียชนิดหนึ่ง พบว่า SC1 ยับยั้งการแสดงออกของ ยืนหลายยืนที่เกี่ยวข้องกับการนำเหล็กสู่ตัวเซลล์ (Iron acquisition) และ Quorum sensing ซึ่งก็คล้ายกับ S. opoloctioe ที่ได้รับสารสกัดจากถั่วเหลืองหมัก (ที่หมักด้วย Bocillus subtis BSN1) ที่การแสดงออกของยืน ที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของเชื้อหลายยืนรวมถึงยืน (uxS ซึ่งเป็นยืนที่เกี่ยวข้องกับการสร้าง autoinducer 2 ใน quorum sensing pathway มีการแสดงออกที่ลดลง โดยสรุปแล้วจากผลการศึกษาที่ได้โนโครงการนี้เรา พบว่าเราสามารถลดอัตราการตายของปลานิลจากการติดเชื้อแบคทีเรียส่วนใหญ่ได้ด้วยสารที่ไม่ฆ่าเชื้อแบคทีเรียก่อโรคหรือไม่ใช่ยาปฏิชีวนะ แต่เป็นสารที่มีฤทธิ์ยับยั้ง Quourum sensing ที่ควบคุบคุมการสร้างไบโอฟิล์มและยืนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของเชื้อก่อโรค แหล่งที่มาของสารเหล่านี้มาจากทั้งพืชและ จุลินทรีย์ในกลุ่มที่ใช้ผลิตอาหารคนเช่นถั่วหมักและใช้เป็นโปรไบโอติกที่สามารถผลิตได้ง่ายและราคาไม่แพง ดังนั้นจึงมีความเป็นไปได้สูงที่จะนำไปประยุกต์ใช้จริงในฟาร์มเกษตรกร
บทคัดย่อ (EN): Pathogenicity of bacterial pathogens in men and animals is most often associated with or depends on the binding ability and biofilm formation of the pathogenic bacteria in or on the animal or in the environment where they live. Therefore, one way to control bacterial diseases is to inhibit the biofilm formation of bacteria by using substances that do not kill or inhibit the growth of pathogenic bacteria but interfere with bacterial communication, which also controls bacterial biofilm formation. In this project, our team developed methods for culturing biofilms of two more tilapia pathogenic bacterial isolates, Francisella noatunensis and Streptococcus agalactiae group B serotype 1a (as suggested by one of the committees in addition to group B serotype 3 done in the previous year). In addition to the 7 isolates developed in the last year, 9 isolates of 6 tilapia-pathogenic bacterial species, consisting of the above two and Aeromonas jandaei, A. veronii, A. hydrophila, and Flavobacterium columnare. These bacterial biofilms were cultured on the surface of 96-well polystyrene plastic trays, both coated and uncoated, with either gelatin extracted from tilapia skins or chitosan isolated from shrimp shells using different culture media formulas. For Fran. noatunensis, which is an intracellular bacterium and very difficult to culture; a total of 7 recipes, including two with ferric iron supplementations, were tested. Optimal biofilm culture conditions obtained for each bacterial isolate were then used for substances with biofilm-inhibiting activities screening. In this year’s project, biofilm inhibitors of 6 tilapia-pathogenic bacterial isolates, namely A. hydrophila, S. agalactiae serotype 1a, three isolates of Fla. columnare, and Fran. noatunensis were screened, and some potent biofilm inhibitors that do not inhibit the growth of their respective bacteria in the liquid medium were short-listed for tilapia infection experiments/feeding trials. Before infection experiments, tilapia immersion infection models were first determined for these four bacteria, including Fla. columnare, A. veronii, A. jandaii, and A. hydrophila. The obtained infection models were then used to determine if the respective biofilm inhibitors could protect the fish from infection or if they could reduce the fish mortality from their pathogens. Each inhibitor was mixed with tilapia feed and fed to the fish before and after the fish were infected with the respective pathogen using the obtained infection models. The results showed that these extracts could protect the fish, as indicated by their increased survival rates, as were the biofilm inhibitors of S. agalactiae tested in the previous year. Except for the biofilm inhibitor of A. hydrophila, which the fish tried had a meager mortality rate; the results were not significantly different from the uninfected control fish. From the gene expression study in the Fla. columnare isolate 15 biofilm, which received culture supernatant of a lactic acid bacteria, Leuconostoc pseudomesenteroides isolates SC1), several genes involved in Quorum sensing and iron acquisition were found to be down-regulated. Down-regulation of many virulence-related genes, including the luxS gene (the gene responsible for autoinducer 2 synthesis in the quorum sensing pathway), was also observed in S. agalactiae biofilm that received cell-free culture supernatant of fermented soybean(using Bacillus subtilis BSN1 that inhibits S. agalactiae biofilm and protect the tilapia from S. agalactiae infection). All in all, from the results obtained in this project, we were able to reduce the mortality of tilapia from most bacterial infections by using substances that do not kill the pathogenic bacteria or that are not antibiotics but a substance that inhibits the biofilm formation of pathogens. These compounds come from plants and human food microorganisms such as fermented soybeans and have been used as probiotics that can be easily produced and inexpensively. Hence, there is a high probability of being applied on real farms.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
คำสำคัญ: สารสกัดธรรมชาติ
คำสำคัญ (EN): the survival rate
เจ้าของลิขสิทธิ์: ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรียที่ก่อโรคในปลานิลและการค้นหาและทดสอบสารต้านหรือยับยั้งการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อดังกล่าวจากสารสกัดธรรมชาติเพื่อนามาทดแทนการใช้ยาปฏิชีวนะ ปีที่ 2
สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
2565
การสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อแบคทีเรียที่ก่อโรคในปลานิลและการค้นหาและทดสอบสารต้านหรือยับยั้งการสร้างไบโอฟิล์มของเชื้อดังกล่าวจากสารสกัดธรรมชาติเพื่อนามาทดแทนการใช้ยาปฏิชีวนะ การพัฒนาวิธีการตรวจโรคไวรัสอุบัติใหม่และแยกเชื้อทิลาเปียพาร์โวไวรัสในฟาร์มปลานิลและปลานิลแดง การวิจัยและพัฒนาสารสกัดมะละกอ สําหรับผู้ป่วยที่มีภาวะเกล็ดเลือดต่ําในอนาคต ระยะที่ 2 ฤทธิ์ของสารสกัดกัญชงต่อการป้องกันและรักษาการอักเสบ: แนวทางเพื่อการรักษาผู้ป่วยติดเชื้อ COVID19 การตรวจสอบประโยชน์ทางเภสัชวิทยาและการเป็นอาหารเสริมของสารสกัดจากปลิงทะเล การทดลองเลี้ยงปลานิลโดยใช้หญ้าเนเปียร์ของเกษตรกร อำเภอพาน จังหวัดเชียงราย ปรับปรุงพันธุ์ปลานิลทนโรคสเตรปโตคอคโคซิส (ต่อเนื่อง) และการทดสอบพันธุ์ การพัฒนาวัคซีนอนุภาคนาโนแบบแช่เพื่อใช้ในการป้องกันโรคติดเชื้อแบคทีเรียคอรัมนาริสและโรคติดเชื้อแบคทีเรียสเตรปโตคอคคอซิสในปลานิล การควบคุมแบคทีเรียก่อโรคพืชโดยน้ำหมักชีวภาพและสารสกัดจากใบคตสัง (Combretum trifoliatum Vent.) และฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน การต่อยอดผลงานวิจัยเรื่องกลไกการก่อโรคของเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) เพื่อนำไปใช้ในการควบคุมการระบาดของเชื้อในกุ้ง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก