สืบค้นงานวิจัย
การศึกษาความจำเพาะของเอ็นไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม (ระยะที่ 1)
สุรพงษ์ พินิจกลาง - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
ชื่อเรื่อง: การศึกษาความจำเพาะของเอ็นไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม (ระยะที่ 1)
ชื่อเรื่อง (EN): Study on Specificity of Papain from Papaya Latex for Application in Industry (Phase 1)
บทคัดย่อ: งานวิจัยนี้มีจุดประสงค์เพื่อศึกษาบริเวณเร่งปฏิกิริยาที่ตำแหน่ง S1-subsite ของเอนไซม์ ปาเปนบริสุทธิ์ด้วยสับสเตรทสังเคราะห์ที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์ โดยทำการแยกน้ำยางจากผลดิบมะละกอสายพันธุ์แขกดำ พร้อมทำการยับยั้งแอคติวิตีของเอนไซม์ด้วยสารละลาย 2,2?-dipyridyl disulphide (2PDS) อิ่มตัว เมื่อทำการแยกเอนไซม์ปาเปนให้บริสุทธิ์ด้วยเครื่อง Fast protein liquid chromatography (FPLC) โดยใช้คอลัมน์ HiLoad 26/10 SP-Sepharose HP และนำไปตรวจสอบความบริสุทธิ์และหาขนาดมวลโมเลกุลด้วยเทคนิค SDS-PAGE พบว่าปาเปนบริสุทธิ์มีขนาดมวลโมเลกุลประมาณ 29 กิโลดาลตัน จากนั้นทำการสังเคราะห์สับสเตรทที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์ ได้แก่ N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA, N-Ac-L-Phe-Arg-pNA, N-Ac-L-Phe-Phe-pNA และ N-Ac-L-Phe-Glu-pNA จากการตรวจสอบความบริสุทธิ์ด้วย thin-layer chromatography, optical rotation, nuclear magnetic resonance, mass spectroscopy และ elemental analysis พบว่าสับสเตรทที่สังเคราะห์ขึ้นมีความบริสุทธิ์สูง เมื่อเปรียบเทียบความจำเพาะบริเวณ S1-subsite ของปาเปนบริสุทธิ์โดยวิธีทางจลศาสตร์ พบว่า kcat/Km ของ N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA, N-Ac-L-Phe-Arg-pNA และ N-Ac-L-Phe-Phe-pNA มีค่าเท่ากับ 269.77, 1367.00, 1469.37 และ 473.49 M-1.S-1ตามลำดับ ส่วน N-Ac-L-Phe-Glu-pNA ไม่สามารถนำมาเปรียบเทียบได้ อย่างไรก็ตามเมื่อทำการตรวจสอบแอคติวิตีกับเอนไซม์ปาเปนบริสุทธิ์ที่ความเข้มข้นอิ่มตัว พบว่ามีแอคติวิตีเท่ากับ 0.05 dA410/min แสดงให้เห็นว่าบริเวณ S1-subsite ของ active site ของเอนไซน์ปาเปนบริสุทธิ์มีคุณสมบัติค่อนข้าง broad specificity
บทคัดย่อ (EN): The aim of the work presented in this thesis was to study active site at S1-subsite position of purified papain with synthesized p-nitroanilide derivative substrates. Papain was extracted from the latex of the unripe papaya fruits (Carica papaya L.). It was mixed with saturation 2,2?-dypyridyl disulphide (2PDS) immediately for antiautolysis. Papain was purified by the fast protein liquid chromatography (FPLC) with a Hiload 26/10 SP-Sepharose HP column and showed only one band on SDS-PAGE, with a low molecular mass of purified papain was estimated at 29 kilo-daltons. The p-nitroanilide derivative substrate, N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA, N-Ac-L-Phe-Arg-pNA, N-Ac-L-Phe-Phe-pNA and N-Ac-L-Phe-Glu-pNA were synthesized in our laboratory and proved to be pure forms by thin-layer chromatography, optical rotation, nuclear magnetic resonance, mass spectroscopy and elemental analysis. The kinetic study showed that the kcat/Km of purified papain toward NAc-L-Phe-Gly-pNA, NAc-L-Phe-Leu-pNA, NAc-L-Arg-Phe-pNA and NAc-L-Phe-Phe-pNA were 269.77, 1367.00, 1469.37 and 473.49 M-1.S-1, respectively, except NAc-L-Phe-Glu-pNA whereas papain activity toward saturated NAc-L-Phe-Glu-pNA at 0.05 dA410/min. The result reveals the broad specificity of S1-subsite pocket located inside the active site of papain
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
คำสำคัญ: มะละกอ
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

สุรพงษ์ พินิจกลาง. "การศึกษาความจำเพาะของเอ็นไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม (ระยะที่ 1)Study on Specificity of Papain from Papaya Latex for Application in Industry (Phase 1)". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2555

สุรพงษ์ พินิจกลาง. "การศึกษาความจำเพาะของเอ็นไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม (ระยะที่ 1)Study on Specificity of Papain from Papaya Latex for Application in Industry (Phase 1)". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2555. Print.



TARR Wordcloud:
การศึกษาความจำเพาะของเอ็นไซม์ปาเปนจากยางมะละกอ เพื่อประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม (ระยะที่ 1)
สุรพงษ์ พินิจกลาง
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
30 กันยายน 2555
อุตสาหกรรมอาหารไทย ปลอดภัยเชื่อถือได้ การวิจัยเชิงนโยบายเพื่อการประหยัดพลังงานและคาร์บอนไดออกไซด์ สำหรับประเทศไทยและภาคอุตสาหกรรม โครงการศึกษาสถานภาพการใช้เทคโนโลยีแก็สซิฟิเคชันสำหรับ ผลิตความร้อนและไฟฟ้าในระดับอุตสาหกรรม ชุมชน หรือ วิสาหกิจขนาดกลางและ ขนาดเล็กของประเทศไทย โครงการวิจัยการประยุกต์ใช้คอนกรีตพรุน (Porous Concrete) สำหรับการพัฒนาแหล่งน้ำ ระยะเวลาที่เหมาะสมในการใช้ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ควบคุมเชื้อรา Aspergillus flavus และสารพิษแอฟลาทอกซินในข้าวโพความชื้นสูง การผลิต Inulin และ Oligofructose จากกล้วยเพื่อใช้เป็นสารเสริมอาหาร การขยายพันธุ์มะละกอ (Carica papaya L.) สายพันธุ์ฮอลแลนด์ในสภาพปลอดเชื้อ การผลิตเอนไซม์ไลเปสจากยีสต์เพื่ออุตสาหกรรม การแปรรูปมะละกอ การพัฒนาข้าวโพดไร่สีม่วง เพื่อเพิ่มศักยภาพการใช้ประโยชน์ทางอุตสาหกรรม
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair