สืบค้นงานวิจัย
การโคลนและศึกษาคุณสมบัติของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โพรแอนโทไซยานิดินในเมล็ดข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าว
แสงทอง พงษ์เจริญกิต - มหาวิทยาลัยแม่โจ้
ชื่อเรื่อง: การโคลนและศึกษาคุณสมบัติของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โพรแอนโทไซยานิดินในเมล็ดข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าว
ชื่อเรื่อง (EN): Cloning and characterization of genes involved in proanthocyanidin biosynthesis in rice seeds for the use as molecular markers for rice improvement
บทคัดย่อ: ข้าวกล้องมีเยื่อหุ้มเมล็ดสีแดงและน้ำตาลมีโปรแอนโทไซยานิดินในปริมาณสูงสะสมอยู่บริเวณเยื่อหุ้มเมล็ดชั้นนอก ในข้าวมียีน Rc เป็นยีนควบคุมที่สำคัญซึ่งเป็นรหัสของโปรตีนทรานสคริพชันแฟคเตอร์ควบคุมการแสดงออกของยีนโครงสร้างในวิถีการสังเคราะห์โปรแอนโทไซยานิดิน ทำให้เกิดสีน้ำตาลหรือแดงของเมล็ดข้าว อย่างไรก็ตาม กลไกการควบคุมการสังเคราะห์โปรแอนโทไซยานิดินโดยการทำงานของยีนควบคุมและยีนโครงสร้างในข้าวยังไม่ทราบแน่ชัด งานวิจัยนี้เป็นงานต่อเนื่องจากโครงการวิจัยที่ได้รับทุนอุดหนุนวิจัย ประจำปี 2558 ซึ่งได้ทำการโคลนยีน Rc ศึกษาโครงสร้างและการแสดงออกของยีนในข้าวพันธุ์ต่าง ๆ ดังนั้น งานวิจัยนี้จึงได้นำยีน Rc ที่โคลนได้จากข้าวที่มีเยื่อหุ้มเมล็ดสีแดงพันธุ์หอมแดงสุโขทัย 1 มาทำการสร้างชุดยีนที่ประกอบด้วยยีน Rc ภายใต้การควบคุมของ dual 35S promoter และ nos terminator และนำชุดยีนดังกล่าวมาสร้างพลาสมิดชุดยีน (gene construct) โดยใช้ pCAMBIA1305.1 เป็น binary vector ซึ่งมียีน gus เป็นยีนรายงานผล และมียีน hptII เป็นยีนเครื่องหมายคัดเลือก แล้วส่งถ่าย construct ดังกล่าว เข้าสู่อะโกรแบคทีเรียมสำหรับใช้ถ่ายยีนเข้าสู่ข้าว เพื่อศึกษาหน้าที่ของยีน Rc และทดสอบการใช้เป็นยีนเครื่องหมายในระบบการถ่ายยีนในข้าว จากการถ่ายยีนเข้าสู่แคลลัสของข้าวที่มีเยื่อหุ้มเมล็ดสีขาวพันธุ์ Kitaake เมื่อตรวจสอบด้วยวิธี GUS assay พบว่า แคลลัสที่ได้รับการถ่ายยีนเกิดจุดสีฟ้าสูงสุดคิดเป็น 30 เปอร์เซ็นต์ และแคลลัสมีเปอร์เซ็นต์รอดบนอาหารคัดเลือกสูงสุด คิดเป็น 80 เปอร์เซ็นต์ เมื่อนำแคลลัสที่รอดมาชักนำให้เกิดต้นบนอาหารคัดเลือก พบว่า เกิดจุดเขียว 5 เปอร์เซ็นต์ และพัฒนาเป็นต้นได้ 7 ต้น แต่ต้นที่ได้ไม่สามารถเจริญเติบโตต่อไปได้ ซึ่งอาจเนื่องจากความเข้มข้นของสารปฏิชีวนะไฮโกรมัยซินที่ใช้คัดเลือกในการถ่ายยีนไม่เหมาะสม เมื่อนำจีโนมิกดีเอ็นเอจากแคลลัสที่เกิดจุดเขียวมาตรวจสอบด้วยเทคนิคพีซีอาร์ พบว่า มีการแทรกตัวของชุดยีน Rc ที่ถ่ายเข้าสู่ข้าว อย่างไรก็ตาม แคลลัสดังกล่าวไม่เกิดจุดแดง อาจเนื่องจากการทำงานของยีน Rc ต้องทำงานร่วมกับยีนโครงสร้างอื่น เพื่อให้เกิดการสังเคราะห์โปรแอนโทไซยานิดิน ดังนั้น ควรศึกษาการทำงานของยีน Rc ร่วมกับยีนโครงสร้างอื่น ๆ ที่สำคัญในการสังเคราะห์โปรแอนโทไซยานิดิน เพื่อให้เข้าใจการทำงานของยีนควบคุมการสังเคราะห์โปรแอนโทไซยานิดินในข้าว และประยุกต์ใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าวระดับโมเลกุลและเทคนิคพันธุวิศวกรรมได้ในอนาคต คำสำคัญ: ยีน Rc, ข้าว, โปรแอนโทไซยานิดิน, การถ่ายยีน, อะโกรแบคทีเรียม
บทคัดย่อ (EN): Proanthocyanidins were accumulated in pericarp of red and brown rice grains. Rc gene encodes a Myc-type basic-helix-loop-helix (bHLH) transcription factor that regulates expression of structural genes in proanthocyanidin biosynthesis pathway in rice. However, the mechanism of proanthocyanidin biosynthesis is not yet clearly understood. This study was continued from the project supported by the grant of 2015 from the Office of Agricultural Research and Extension, Maejo University which conducted the cloning of Rc gene and study of structure and expression of this gene among various rice varieties. Therefore, in the present study, the cloned Rc gene from rice variety, Hom Dang Sukhothai 1 with red pericarp was made of the gene cassette under the control of dual 35S promoter and nos terminator. The gene cassette was then constructed into the binary vector, pCAMBIA1305.1 which has gus and hptII as reporter gene and selectable marker gene, respectively. The construct was transformed into Agrobacterium tumefaciens for rice transformation in order to study function of Rc gene and examine this gene as marker gene in rice transformation system. The transformation of white rice variety, Kitaake, was performed using Agrobacterium. The GUS assay showed 30 percent of GUS-positive transformed calli. Eighty percent of hygromycin-resistant calli survived on selection medium. Five percent of surviving calli could develop green spots and regenerate to seven plantlets. However, the transformed rice plants could not survive, probably due to inappropriate concentration of hygromycin during selection. The genomic DNA of calli developing green spots was subjected to PCR. The results showed that the transformed Rc gene was integrated into rice calli, but calli with the red color resulting from proanthocyanidin biosynthesis were not found. These might be because the Rc gene must be co-functioned with other structural genes for proanthocyanidin biosynthesis. Thus, the study of gene function of the Rc gene and other important structural genes in proanthocyanidin biosynthesis has to be investigated to understand the mechanism of gene regulation in proanthocyanidin biosynthesis in rice which will be useful for applications of the regulatory gene as a marker gene in molecular breeding and genetic engineering. Keywords: Rc gene, Rice (Oryza sativa), Proanthocyanidins, Transformation, Agrobacterium
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยแม่โจ้
คำสำคัญ: อะโกรแบคทีเรียม
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

แสงทอง พงษ์เจริญกิต. "การโคลนและศึกษาคุณสมบัติของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โพรแอนโทไซยานิดินในเมล็ดข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าวCloning and characterization of genes involved in proanthocyanidin biosynthesis in rice seeds for the use as molecular markers for rice improvement". มหาวิทยาลัยแม่โจ้. 2559

แสงทอง พงษ์เจริญกิต. "การโคลนและศึกษาคุณสมบัติของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โพรแอนโทไซยานิดินในเมล็ดข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าวCloning and characterization of genes involved in proanthocyanidin biosynthesis in rice seeds for the use as molecular markers for rice improvement". มหาวิทยาลัยแม่โจ้. 2559. Print.



TARR Wordcloud:
การโคลนและศึกษาคุณสมบัติของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โพรแอนโทไซยานิดินในเมล็ดข้าวเพื่อใช้เป็นยีนเครื่องหมายในการปรับปรุงพันธุ์ข้าว
แสงทอง พงษ์เจริญกิต
มหาวิทยาลัยแม่โจ้
30 กันยายน 2559
การปรับปรุงพันธุ์ข้าว กข 15 ขาวดอกมะลิ 105สังข์หยดพัทลุงให้ปลูกได้ทุกฤดูเพื่อเตรียมรับการเปลี่ยน แปลงสภาพภูมิอากาศ ข้าวให้พลังงานผสานคุณค่าอาหาร การใช้ยีนสร้างแอนโทไซยานินเป็นยีนเครื่องหมายสำหรับการถ่ายยีนในพืชและเป็นยีนเป้าหมายเพื่อเพิ่มมูลค่าพืชเศรษฐกิจ โรคไหม้ในข้าวและสถานการณ์ปัจจุบันของงานวิจัยด้านยีนต้านทานโรคไหม้ในข้าว การประเมินลักษณะทนน้ำท่วมฉับพลันเบื้องต้นในข้าวเจ้าหอมสายพันธุ์ปรับปรุง BC2F3 ที่มียีน Sub1 ปัจจัยในการปรับปรุงสภาพเมล็ดพันธุ์ที่มีผลกระทบต่อคุณภาพเมล็ดพันธุ์ข้าว การใช้เครื่องหมายดีเอ็นเอสำหรับศึกษาความหลากหลายทางพันธุกรรมและการปรับปรุงพันธุ์ข้าว การใช้ค่าวิเคราะห์ดิน ผลผลิตที่คาดหวัง และธาตุอาหารหลักในผลผลิตเพื่อกำหนดอัตราการใส่ปุ๋ยสำหรับข้าว ตำบลบ้านกร่าง อำเภอเมือง จังหวัดพิษณุโลก ผลการตอบสนองต่อความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นที่เกิดจากความเค็มในสายพันธุ์ต่าง ๆ ของข้าวไทย การเพิ่มผลผลิตข้าวนาหว่านน้ำตมภายใต้การจัดการปุ๋ยในชุดดินพัทลุง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair