สืบค้นงานวิจัย
การตรวจฮีโมไลซินยีนของเชื้อ V. parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งด้วยวิธี multiplex polymerase chain reaction
Darunee Jaisawan - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การตรวจฮีโมไลซินยีนของเชื้อ V. parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งด้วยวิธี multiplex polymerase chain reaction
ชื่อเรื่อง (EN): Detection of Vibrio parahaemolyticus hemolysin genes in frozen shrimps using multiplex polymerase chain reaction
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Darunee Jaisawan
บทคัดย่อ: การตรวจหายีนที่กำหนดการผลิตสารพิษ ldh (lecithin dependent hemolysin), tdh (thermostable direct hemolysin) และ trh (thermostable direct hemolysin - related hemolysin) ของเชื้อ Vibrio parahaemolyticus โดยวิธีการเพิ่มจำนวนสารพันธุกรรมด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เรสหลายคู่ (multiplex PCR) ได้ทำการศึกษาในตัวอย่างกุ้งแช่แข็งจำนวน 100 ตัวอย่างได้เก็บจากโรงงานอาหารทะเลแช่แข็งใน กรุงเทพมหานครและจังหวัดสมุทรสาคร ระหว่างเดือนกรกฎาคม 2545 ถึง เดือนกุมภาพันธ์ 2547 จากการศึกษา พบว่ากุ้งแช่แข็งร้อยละ 89 (89/100) มีการปนเปื้อนเชื้อแบคทีเรีย, V. parahaemolyticus, coliforms และ Escherichia coli ในระดับที่ยอมรับได้ตามเกณฑ์การประเมินคุณภาพอาหารของ Food and Environmental Hygiene วิธี multiplex PCR สามารถตรวจพบยีนทั้ง 3 ยีน (ldh, tdh, trh) ของเชื้อ V. parahaemolyticus สาย พันธุ์ VP 156-9-7-1993 ที่ปริมาณดีเอ็นเอที่น้อยที่สุด คือ 1 นาโนกรัม/ไมโครลิตร ความจำเพาะของวิธี multiplex PCR พบร้อยละ 100 เมื่อใช้ทดสอบกับวิบริโอหลายเชื้อสายและเอนเทอโรแบคทีเรียรวมทั้งหมด 19 สายพันธุ์ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมตรวจพบทั้งวิธีเพาะเชื้อและวิธี multiplex PCR วิธีละร้อยละ 14 (14/100) นอกจากนี้ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมร้อยละ 16 (16/100) ตรวจพบโดยทั้ง 2 วิธีรวมกัน ใน การศึกษาในครั้งนี้ พบว่าตัวอย่างกุ้งแช่แข็งทั้งหมดให้ผลลบต่อยีน tdh และยีน trh ด้วยวิธี multiplex PCR และ ไม่มีการผลิต TDH โดยวิธี modified Elek test และ TRH โดยวิธีทดสอบปฏิกิริยาของ urease test จากการตรวจ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่พบการปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus โดยวิธี multiplex PCR พบร้อย ละ 85.7 (12/14) ให้ผลบวกต่อยีน ldh ในทางตรงข้าม จากการตรวจตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่ไม่พบ การปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus พบร้อยละ 3 (2/65) ตรวจพบยีน ldh ในทำนองเดียวกัน การตรวจเชื้อ V. parahaemolyticus จำนวน 70 สายพันธุ์ที่แยกได้จากตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่มีการปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus จำนวน 14 ตัวอย่าง พบทุกสายพันธุ์ให้ผลบวกต่อยีน ldh และให้ผลลบต่อยีน tdh และ ยีน trh การตรวจหายีน ldh, tdh และ trh ของเชื้อ V. parahaemolyticusโดยตรงจากตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหาร เสริมด้วยวิธี multiplex PCR เมื่อเทียบกับวิธีมาตรฐาน (conventional method) พบมีความไว ความจำเพาะและ ประสิทธิภาพร้อยละ 85.7, ร้อยละ 97.7 และร้อยละ 96 ตามลำดับ ดังนั้น วิธี multiplex PCR เป็นอีกทางเลือก หนึ่งที่มีความรวดเร็ว ความไว ความจำเพาะและใช้เวลาน้อยในการตรวจและจำแนกเชื้อ V. paraharmolyticus และฮีโมไลซินยีนได้โดยตรงจากกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมและจากสายพันธุ์ที่แยกได้
บทคัดย่อ (EN): l by multiplex PCR. Examining 19 strains of Vibrio spp. and enteric bacteria with these 3 genes by multiplex PCR resulted in 100% specificity. In 14% (14/100) of frozen shrimp enrichment samples V. parahaemolyticus was detected by both the conventional method and multiplex PCR. In addition, in 16% (16/100) of samples V. parahaemolyticus was detected by the combination of both methods. All frozen shrimp samples tested negative for tdh and trh by multiplex PCR and for TDH by modified Elek test and TRH by urease activity test. Enrichment samples cultured with V. parahaemolyticus were positive for ldh gene in 85.7% (12/14). In contrast, enrichment samples not cultured with V. parahaemolyticus were positive for ldh in 3% (2/65). Similarly, 70 isolates of V. parahaemolyticus collected from 14 enrichment samples cultured with V. parahaemolyticus were positive for ldh gene and negative for tdh and trh genes. The multiplex PCR detecting for ldh, tdh and trh of V. parahaemolyticus directly from the enrichment samples showed sensitivity, specificity and efficiency that compared well with the conventional method of 85.7%, 97.7% and 96%, respectively. Thus, the multiplex PCR could be an alternative method as a sensitive, specific, and less time consuming method to detect V. parahaemolyticus and its hemolysin genes directly in frozen shrimp enrichment samples and the isolated strains.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=229&obj_id=2119
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Vibrio Parahaemolyticus
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: การตรวจหายีนที่กำหนดการผลิตสารพิษ ldh (lecithin dependent hemolysin), tdh (thermostable direct hemolysin) และ trh (thermostable direct hemolysin - related hemolysin) ของเชื้อ Vibrio parahaemolyticus โดยวิธีการเพิ่มจำนวนสารพันธุกรรมด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เรสหลายคู่ (multiplex PCR) ได้ทำการศึกษาในตัวอย่างกุ้งแช่แข็งจำนวน 100 ตัวอย่างได้เก็บจากโรงงานอาหารทะเลแช่แข็งใน กรุงเทพมหานครและจังหวัดสมุทรสาคร ระหว่างเดือนกรกฎาคม 2545 ถึง เดือนกุมภาพันธ์ 2547 จากการศึกษา พบว่ากุ้งแช่แข็งร้อยละ 89 (89/100) มีการปนเปื้อนเชื้อแบคทีเรีย, V. parahaemolyticus, coliforms และ Escherichia coli ในระดับที่ยอมรับได้ตามเกณฑ์การประเมินคุณภาพอาหารของ Food and Environmental Hygiene วิธี multiplex PCR สามารถตรวจพบยีนทั้ง 3 ยีน (ldh, tdh, trh) ของเชื้อ V. parahaemolyticus สาย พันธุ์ VP 156-9-7-1993 ที่ปริมาณดีเอ็นเอที่น้อยที่สุด คือ 1 นาโนกรัม/ไมโครลิตร ความจำเพาะของวิธี multiplex PCR พบร้อยละ 100 เมื่อใช้ทดสอบกับวิบริโอหลายเชื้อสายและเอนเทอโรแบคทีเรียรวมทั้งหมด 19 สายพันธุ์ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมตรวจพบทั้งวิธีเพาะเชื้อและวิธี multiplex PCR วิธีละร้อยละ 14 (14/100) นอกจากนี้ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมร้อยละ 16 (16/100) ตรวจพบโดยทั้ง 2 วิธีรวมกัน ใน การศึกษาในครั้งนี้ พบว่าตัวอย่างกุ้งแช่แข็งทั้งหมดให้ผลลบต่อยีน tdh และยีน trh ด้วยวิธี multiplex PCR และ ไม่มีการผลิต TDH โดยวิธี modified Elek test และ TRH โดยวิธีทดสอบปฏิกิริยาของ urease test จากการตรวจ ตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่พบการปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus โดยวิธี multiplex PCR พบร้อย ละ 85.7 (12/14) ให้ผลบวกต่อยีน ldh ในทางตรงข้าม จากการตรวจตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่ไม่พบ การปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus พบร้อยละ 3 (2/65) ตรวจพบยีน ldh ในทำนองเดียวกัน การตรวจเชื้อ V. parahaemolyticus จำนวน 70 สายพันธุ์ที่แยกได้จากตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมที่มีการปนเปื้อนเชื้อ V. parahaemolyticus จำนวน 14 ตัวอย่าง พบทุกสายพันธุ์ให้ผลบวกต่อยีน ldh และให้ผลลบต่อยีน tdh และ ยีน trh การตรวจหายีน ldh, tdh และ trh ของเชื้อ V. parahaemolyticusโดยตรงจากตัวอย่างกุ้งแช่แข็งในอาหาร เสริมด้วยวิธี multiplex PCR เมื่อเทียบกับวิธีมาตรฐาน (conventional method) พบมีความไว ความจำเพาะและ ประสิทธิภาพร้อยละ 85.7, ร้อยละ 97.7 และร้อยละ 96 ตามลำดับ ดังนั้น วิธี multiplex PCR เป็นอีกทางเลือก หนึ่งที่มีความรวดเร็ว ความไว ความจำเพาะและใช้เวลาน้อยในการตรวจและจำแนกเชื้อ V. paraharmolyticus และฮีโมไลซินยีนได้โดยตรงจากกุ้งแช่แข็งในอาหารเสริมและจากสายพันธุ์ที่แยกได้
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Darunee Jaisawan. "การตรวจฮีโมไลซินยีนของเชื้อ V. parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งด้วยวิธี multiplex polymerase chain reactionDetection of Vibrio parahaemolyticus hemolysin genes in frozen shrimps using multiplex polymerase chain reaction". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2548

Darunee Jaisawan. "การตรวจฮีโมไลซินยีนของเชื้อ V. parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งด้วยวิธี multiplex polymerase chain reactionDetection of Vibrio parahaemolyticus hemolysin genes in frozen shrimps using multiplex polymerase chain reaction". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2548. Print.



TARR Wordcloud:
การตรวจฮีโมไลซินยีนของเชื้อ V. parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งด้วยวิธี multiplex polymerase chain reaction
Darunee Jaisawan
มหาวิทยาลัยมหิดล
2548
การประเมินความเสี่ยงเชิงปริมาณของเชื้อ Vibrio parahaemolyticus ในกุ้งแช่แข็งไทย การตรวจเชื้อ Salmonella ในตัวอย่างอาหารทะเลโดยวิธี MSRV การตรวจและจำแนกเชื้อ vibrio cholerae O1, O139 และ non-O1 ในตัวอย่างอาหารทะเลโดยวิธี touch down multiplex po การเพิ่มความเข้มข้นของน้ำมะนาวด้วยวิธีแช่แข็ง การตรวจหาเชื้อ acanthamoeba keratitis ในตลับคอนแทคเลนส์โดยวิธี loop-mediated isothermal amplification method การพัฒนาการตรวจเชื้อ Listeria Monocytogenes ในอาหารทะเลแช่แข็งโดยวิธีฟลูออเรสเซนต์-พีซีอาร์ การพัฒนาวิธีมัลติเพล็คพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อสแตฟีโลค็อคคัส ออเรียส เชื้อบาซีลัส ซีเรียสและเชื้อกลุ่มซาลโมแนลลาในคราวเดียว การตรวจวิเคราะห์ยีนโปรตีนเปลือกหุ้มของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนที่ถ่ายฝากในมะละกอดัดแปรพันธุกรรม G2 การศึกษาเปรียบเทียบระหว่างกุ้งขาวแปซิฟิก Penaeus vannamei ที่รอดชีวิตกับกุ้งที่ตายภายหลังการติดเชื้อไวรัสโรคตัวเหลือง การศึกษาคุณสมบัติของยีนมะเร็งของไวรัส HPV16 : ความหลากหลายของยีน แหล่งที่อยู่และหน้าที่การกระตุ้นการแสดงออกของยีน
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair