สืบค้นงานวิจัย
การคัดเลือกมิโมโทปจากเปปไทด์ฟาจไลบรารี่แบบสุ่มที่จำเพาะกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีของเชื้อ
Narisorn Na-Ngam - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การคัดเลือกมิโมโทปจากเปปไทด์ฟาจไลบรารี่แบบสุ่มที่จำเพาะกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีของเชื้อ
ชื่อเรื่อง (EN): Mimotope identification from monoclonal antibodies of burkholderia pseudomallei using random peptide phage libraries and the immune responses of the selected phagotopes
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Narisorn Na-Ngam
บทคัดย่อ: การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์ในการใช้ เปปไทด์ไลบรารี่แบบสุ่มที่แสดงผลบนผิวของแบคเทอริ โอฟาจ T7 และ M13 เพื่อหาลำดับอะมิโนแอซิดของมิโมโทปจากโมโนโคลนอล แอนติบอดี 4 ตัวอย่าง ที่จำเพาะต่อเชื้อ B. pseudomallei ฟาจแต่ละตัวที่จับกับโมโนโคลนอล แอนติบอดีนี้จะถูกคัดเลือกมา ทดสอบ binding specificity ด้วยวิธี ELISA แล้วฟาจที่ให้ผล ELISA บวก จะถูกนำไปเพิ่มจำนวน ทำให้ บริสุทธ์ ตรวจหาลำดับอะมิโนแอซิดของฟาจ เปปไทด์ โดยวิธี PCR และ DNA sequencing พบว่าฟาจ 75 ตัวจาก 90 ตัว (83.3%) ให้ผล ELISA บวก และพบว่าลำดับเป็บไตด์ของทั้ง 75 มิโมโทป (100%) ตรง กับลำดับโปรตีนของ Burkholderia spp. จาก GenBank มิโมโทปที่พบมากที่สุดคือ TPxGRTRVT (13.3%), ตามด้วย LTPCGRTxD (8%), AREVTLL (6.7%), NxVxKVVSR (5.3%), PCAPRSS (4%), LGRVLAN (4%), RNPKKA (2.7%) และ CPYPR (2.7%) ตามลำดับ และพบว่า GenBank matched proteins ชื่อ hypothetical protein BPSL2046 of B. pseudomallei K96243 (ตรงกับ CGRTxD), hypothetical protein BpseP_02000035 (ตรงกับ LGRVLAN), hypothetical protein BPSS0784 of B. pseudomallei K96243 (ตรงกับ CPYPR), hypothetical protein BURPS1710b_1104 of B. pseudomallei 1710b (ตรงกับ CARQY), TonB-dependent siderophore receptor of B. cenocepacia H12424 (ตรงกับ CVRxxLTPC and TPCRxRT) อยู่ในส่วนของ outer membrane โปรตีนของ Burkholderia spp. ภูมิคุ้มกันที่สร้างจาก Phagotopes ที่คัดเลือกไว้มีระดับที่สูงกว่าของกลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ และทำ ปฏิกิริยากับ B. pseudomallei LPS จากการศึกษานี้สรุปได้ว่าสามารถใช้ ฟาจ ดิสเพลย์ แรนดอม เปป ไตด์ ไลบราลี่ ในการวิเคราะห์หามิโมโทปที่จับกับโมโนโคลนอล แอนติบอดีของ B. pseudomallei ซึ่ง จะเป็นประโยชน์ต่อการพัฒนาวัคซีนในระยะต่อไป
บทคัดย่อ (EN): This study aimed to use random peptide libraries, displayed by bacteriophage T7 and M13, to identify mimotopes from 4 monoclonal antibodies (MAbs) specific to B. pseudomallei. Bound phages, selected from fourth-round panning with each MAb, were tested for binding specificity with each MAb using ELISA, before being further amplified and checked for phage peptide sequence using PCR and DNA sequencing. 75 of 90 phages (83.3%) were ELISApositive with each MAb. Mimotopes from all 75 phages (100%) were found to match protein sequences of Burkholderia spp. from GenBank. The predominant mimotopes were mimotope TP-GRTRVT found in 13.3%, followed by LTPCGRTxD (8%), AREVTLL (6.7%), NxVxKVVSR (5.3%), PCAPRSS (4%), LGRVLAN (4%), RNPKKA (2.7%), and CPYPR (2.7%). The GenBank-matched proteins, i.e. hypothetical protein BPSL2046 of B. pseudomallei K96243 (matched with mimotope CGRTxD), hypothetical protein BpseP_02000035 (matched with LGRVLAN), hypothetical protein BPSS0784 of B. pseudomallei K96243 (matched with CPYPR), hypothetical protein BURPS1710b_1104 of B. pseudomallei 1710b (matched with CARQY), TonB-dependent siderophore receptor of B. cenocepacia H12424 (matched with CVRxxLTPC and TPCRxRT), were found to locate at the outer membrane of Burkholderia spp. The immune responses from all selected phagotopes were significantly higher than those of the control groups, and could react with native antigen of B. pseudomallei LPS. The study demonstrated the feasibility of identifying important mimotopes for vaccine development through screening of phage-displayed random peptide libraries with B. pseudomallei MAbs.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=4254&obj_id=4460
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Peptide Library
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์ในการใช้ เปปไทด์ไลบรารี่แบบสุ่มที่แสดงผลบนผิวของแบคเทอริ โอฟาจ T7 และ M13 เพื่อหาลำดับอะมิโนแอซิดของมิโมโทปจากโมโนโคลนอล แอนติบอดี 4 ตัวอย่าง ที่จำเพาะต่อเชื้อ B. pseudomallei ฟาจแต่ละตัวที่จับกับโมโนโคลนอล แอนติบอดีนี้จะถูกคัดเลือกมา ทดสอบ binding specificity ด้วยวิธี ELISA แล้วฟาจที่ให้ผล ELISA บวก จะถูกนำไปเพิ่มจำนวน ทำให้ บริสุทธ์ ตรวจหาลำดับอะมิโนแอซิดของฟาจ เปปไทด์ โดยวิธี PCR และ DNA sequencing พบว่าฟาจ 75 ตัวจาก 90 ตัว (83.3%) ให้ผล ELISA บวก และพบว่าลำดับเป็บไตด์ของทั้ง 75 มิโมโทป (100%) ตรง กับลำดับโปรตีนของ Burkholderia spp. จาก GenBank มิโมโทปที่พบมากที่สุดคือ TPxGRTRVT (13.3%), ตามด้วย LTPCGRTxD (8%), AREVTLL (6.7%), NxVxKVVSR (5.3%), PCAPRSS (4%), LGRVLAN (4%), RNPKKA (2.7%) และ CPYPR (2.7%) ตามลำดับ และพบว่า GenBank matched proteins ชื่อ hypothetical protein BPSL2046 of B. pseudomallei K96243 (ตรงกับ CGRTxD), hypothetical protein BpseP_02000035 (ตรงกับ LGRVLAN), hypothetical protein BPSS0784 of B. pseudomallei K96243 (ตรงกับ CPYPR), hypothetical protein BURPS1710b_1104 of B. pseudomallei 1710b (ตรงกับ CARQY), TonB-dependent siderophore receptor of B. cenocepacia H12424 (ตรงกับ CVRxxLTPC and TPCRxRT) อยู่ในส่วนของ outer membrane โปรตีนของ Burkholderia spp. ภูมิคุ้มกันที่สร้างจาก Phagotopes ที่คัดเลือกไว้มีระดับที่สูงกว่าของกลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ และทำ ปฏิกิริยากับ B. pseudomallei LPS จากการศึกษานี้สรุปได้ว่าสามารถใช้ ฟาจ ดิสเพลย์ แรนดอม เปป ไตด์ ไลบราลี่ ในการวิเคราะห์หามิโมโทปที่จับกับโมโนโคลนอล แอนติบอดีของ B. pseudomallei ซึ่ง จะเป็นประโยชน์ต่อการพัฒนาวัคซีนในระยะต่อไป
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การคัดเลือกมิโมโทปจากเปปไทด์ฟาจไลบรารี่แบบสุ่มที่จำเพาะกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีของเชื้อ
Narisorn Na-Ngam
มหาวิทยาลัยมหิดล
2550
การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อเชื้อ vibrio parahaemolyticus โดยเน้นการวินิจฉัย serotype การค้นหามิโมโทปจากโมโนโคลนัลแอนติบอดีและซีรัมผู้ป่วยที่จำเพาะต่อพยาธิตัวจี๊ด โดยใช้เทคโนโลยีการแสดงเปปไ ลักษณะทางฟีโนไทป์ของเชื้อ Burkholderia thailandensis ก่อนและหลังจากติดเชื้อ bacteriophage ที่แยกได้จากเชื้อ Burkholder การคัดเลือกเชื้อ Enterococcus faecium ที่แยกได้จากไก่พื้นเมืองที่มีศักยภาพใช้เป็นโปรไบโอติกโดยการทดสอบคุณภาพทางห้องปฏิบัติการ การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไกลโคลิปิดที่จำเพาะของเชื้อวัณโรค การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดที่จำเพาะต่อเชื้อ Aeromonas Hydrophila ที่ก่อโรคในปลา การปรับปรุงพันธุ์เบญจมาศโดยการคัดเลือกจากความแปรปรวนของเซลล์ การผลิตแอนติบอดีจำเพาะต่อฮีโมโลลบินสายแกมม่าจากไข่ไก่และการผลิตโมโนโคลนอลจำเพาะต่อฮีโมโกลบินบาร สมบัติต้านเชื้อราของสารสกัดจากพืชบางชนิดต่อโรคที่เกิดจากเชื้อราในกุหลาบและเบญจมาศ การติดเชื้อ Flavobacterium columnare ของปลาดุกบิ๊กอุยที่ได้รับเชื้อจากปลาดุกอเมริกัน
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก