สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ทางซีรัมวิทยา
สุรีย์ ธรรมศาสตร์ - กรมปศุสัตว์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ทางซีรัมวิทยา
ชื่อเรื่อง (EN): Development ELISA test kit for sero-diagnosis of melioidosis in livestock
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: สุรีย์ ธรรมศาสตร์
บทคัดย่อ: ที่มาของการศึกษา: ปัจจุบันการการชันสูตรโรคเมลิออยด์ในห้องปฏิบัติการของกรมปศุสัตว์โดยวิธีทางซีรัมวิทยาใช้วิธี indirect hemaemagglutination (IHA) ซี่งมีขั้นตอนที่ซับซ้อนยุ่งยาก การอ่านผลค่อนข้างยากต้องใช้ผู้มีประสบการณ์และความชำนาญสูง อีกทั้งหลีกเลี่ยงการใช้สัตว์ทดลองเนื่องจากต้องใช้เลือดแกะในกระบวนการทดสอบโรค ดังนั้นการพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่า จึงเป็นอีกวิธีหนึ่งที่สามารถชันสูตรโรคเมลิออยด์ หรือใช้ทดแทนวิธี IHA ได้ เนื่องจาก ELISA เป็นวิธีที่ใช้ในการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อ Burkholderia pseudomallei ที่อ่านผลได้ชัดเจน และมีความความไวและความจำเพาะสูงกว่าหรือเท่ากับวิธี IHA วิธีการ: เตรียมแอนติเจนจากเชื้อ B. pseudomallei ที่เพาะแยกเชื้อได้จากตัวอย่างสัตว์ป่วยตายด้วยโรคเมลิออยด์ ที่ผ่านการตรวจยืนยันด้วยวิธี PCR แล้วทำ checkerboard titration เพื่อหาสภาวะที่เหมาะสม ได้แก่ ชนิดของ blocking ระดับความเข้มข้นของแอนติเจน ซีรัม conjugate และระยะเวลาที่เหมาะสมในการ incubate แต่ละขั้นตอน และนำวิธี ELISA ที่พัฒนาขึ้นมาทดสอบซีรัมสัตว์จำนวน 15,081 ตัวอย่าง เปรียบเทียบกับวิธี IHA และ เพาะเชื้อจากตัวอย่างจากการผ่าซาก 35 ตัวอย่าง จากผลบวกโดยวิธี ELISA หรือ IHA แล้วคำนวณหาประสิทธิภาพ โดยหาความไว ความจำเพาะ และ ความถูกต้องของวิธี ELISA ผล: ชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าที่พัฒนาขึ้นสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยด์ในปศุสัตว์ เปรียบเทียบกับวิธี IHA มีค่าความไว 70.39% ความจำเพาะ 99.46% และความถูกต้อง 99.11% และให้ผลบวกตรงกับการเพาะแยกเชื้อ 19 ตัว จาก 21 ตัวอย่าง คิดเป็น 90% สรุป: ชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าที่พัฒนาขึ้นสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ มีประโยชน์ต่อการทดสอบโรคสำหรับการติดเชื้อแบบเรื้อรัง โดยควรใช้ร่วมกับการตรวจทางซีรัมวิทยาวิธีอื่น เช่นวิธี IHA การนำชุดทดสอบไปใช้จะมีความคุ้มค่า และเหมาะสมสำหรับใช้ในประเทศ อย่างไรก็ตามชุดทดสอบนี้ยังต้องพัฒนาให้มีความความไว ความจำเพาะ และความถูกต้อง สูงขึ้น เพื่อใช้คัดกรองโรคอีกต่อไ
บทคัดย่อ (EN): s: Melioidosis is an infectious disease caused by Burkholderia pseudomallei. It is public health importance in endemic areas, particularly in northeast Thailand. The most widely use method for serodiagnosis is the indirect hemagglutination assay (IHA), but interpretation in endemic areas is difficult because of the presence of antibodies in apparently healthy individuals. Moreover, the IHA assay is poorly standardised, with variation in B. pseudomallei strains. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is considered more favourably as rapid and reliable tools for diagnosis of melioidosis. Methods: The study was used the crude protein extracted from B. pseudomallei as antigen. A total of 35 sera from confirmed infection were screened for the presence of specific antibodies ELISA. Sera from aniamals for B. pseudomallei, as well as sera from healthy individuals, were also included as non-melioidosis controls. The sensitivity, specificity and the relative values were calculated to validation the test for the presence of specific antibodies towards these proteins using ELISA. Results: The agreement between ELISA and IHA was 70.39% sensitivity, 99.46% specificity and 99.11% accuracy. The relative values between ELISA and culture was 90%. Conclusions: ELISA is mostly use in the laboratory and the crude antigen preparation for this technique is simple method and the crude antigen is simple to prepare. However, the goal remains to improve the accuracy of serological tests for the diagnosis of melioidosis. Devising an assay that has a clinically useful degree of predictive accuracy in areas of high endemicity where antibody levels are high in the healthy animals. More specific antigens are currently considered as a candidate to facilitate early serological diagnosis. As the results, i-ELISA and IHA should be used in combination for serodiagnosis of melioidosis.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: กรมปศุสัตว์
คำสำคัญ: ปศุสัตว์
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปอีไลซ่าสำหรับชันสูตรโรคเมลิออยโดซิสในปศุสัตว์ทางซีรัมวิทยา
กรมปศุสัตว์
30 กันยายน 2552
กรมปศุสัตว์
การพัฒนาชุดทดสอบสำเร็จรูปสำหรับชันสูตรโรคเคเอชวีในปลาคาร์พในประเทศไทย การพัฒนาชุดทดสอบ Multiplex PCR สำหรับจำแนกชนิดเชื้อ Mycobacterium bovis และMycobacterium tuberculosis การศึกษาทางซีรัมวิทยาของโรคบรูเซลโลซีสและเมลิออยโดซีสใน แพะที่เลี้ยงในภาคใต้ของประเทศไทย การศึกษากระบวนการที่เหมาะสมสำหรับการผลิตรังนกพร้อมชง โครงการวิจัยและพัฒนาเพื่อแก้ปัญหาโรคใบขาวของอ้อย การพัฒนาชุดทดสอบโรคในสุกรที่สำคัญโดยใช้หลักการอิมมูโนโครมาโตรกราฟฟี การพัฒนาวิธีอีไลซ่า สำหรับตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อ Neospora caninum ในโค การพัฒนาชุดทดสอบยาปฎิชีวนะเพนนิซิลีนจีที่ตกค้างในน้ำนม พัฒนาการผลิตชุดตรวจสอบโรคปากและเท้าเปื่อย โดยวิธี อี ไล ซ่า การพัฒนาวิธีอีไลซ่า สำหรับตรวจหาแอนติบอดี้ Neospora caninum ในโค
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก