สืบค้นงานวิจัย
การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ
สิริพงษ์ ฐิตะมาดี - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ
ชื่อเรื่อง (EN): Assessment of the protective effect of multiple repeated antiviral proteins against WSSV infection in back tiger shrimp
บทคัดย่อ: งานวิจัยนี้ ได้ทำการเปรียบเทียบประสิทธิภาพในการลดอัตราการตายของกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) เนื่องจากการติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาว (WSSV)โดยการใช้ monomeric recombinant VP28 (1xrVP28) เปรียบเทียบกับ tetrameric recombinant VP28 (4xrVP28) โปรตีน โดยงานวิจัยนี้ได้เริ่มจากการสร้าง plasmids ที่มีชิ้นส่วน DNA ของ 1xrVP28 หรือ 4xrVP28 ซึ่งจะนำไปใส่ใน E. coli (BL21) เพื่อการผลิต recombinant โปรตีนนั้นๆ โดยโปรตีนดังกล่าวจะมีการเติม 6x-histidine ไว้กับ rVP28 เพื่อให้สามารถทำบริสุทธิ์ได้ด้วย Ni-NTA column ก่อนจะทำการตรวจสอบขนาดของrecombinant โปรตีนที่ผลิตได้ด้วย SDS-PAGE และ Western blot ตามลำดับ จากนั้นจึงฉีดโปรตีนที่ได้ทำบริสุทธิ์แล้วให้กับกุ้งกุลาดำ ซึ่งมีสองวิธีการคือ pre-injection และ co-injectionโดยในกลุ่ม pre-injection, กุ้งจะถูกฉีดโปรตีน 1xrVP28 หรือ 4xrVP28 เข้ากล้ามเนื้อในปริมาณ 2.5 ?g ต่อ 1 g หลังจากนั้นเป็นเวลา 2 วัน จึงนำกุ้งที่ได้รับโปรตีน rVP28 แล้วไปฉีด WSSV (100 copies) สำหรับในส่วนของ co-injection นั้นกุ้งจะถูกฉีดโปรตีน rVP28 ไปพร้อมกับ WSSV เพื่อทำการเปรียบเทียบประสิทธิภาพในการลดอัตราการตายของกุ้งกุลาดำระหว่าง 1xrVP28 และ 4xrVP28, กุ้งที่อยู่ในภาวะใกล้ตาย (moribund) และกุ้งที่รอดชีวิตจะถูกสุ่มมาเพื่อตรวจสอบการติดเชื้อ ด้วยวิธี semi-nested PCR, real-time PCR และการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อผลการวิจัยแสดงให้เห็นว่าการฉีดโปรตีน rVP28 ด้วยวิธี pre-injection ไม่ทำให้อัตรารอดตายของกุ้งสูงขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับชุดควบคุม อย่างไรก็ตามได้พบว่า rVP28 มีผลในการลดอัตราการตายอย่างมีนัยยะสำคัญเมื่อทำการฉีดด้วยวิธี co-injectionโดยค่า relative percent survival (RPS) ของกลุ่ม co-injection ด้วย 4xrVP28 และ WSSV เท่ากับ 80% ซึ่งมีค่าสูงกว่ากลุ่มที่ถูกฉีดแบบ co-injection ด้วย 1xrVP28 และ WSSV ซึ่งมีค่า RPS เท่ากับ 63% นอกจากนี้ ผลวิจัยได้แสดงถึงการลดการเพิ่มปริมาณการเพิ่มจำนวนWSSV ในเซลล์เม็ดเลือดของกุ้งที่ได้รับ rVP28 โปรตีน งานวิจัยนี้ได้ข้อสรุปว่า 4xrVP28 แสดงผลในการปกป้องกุ้งกุลาดำที่ติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวได้ดีกว่าการใช้ 1xrVP28 โปรตีน
บทคัดย่อ (EN): In this study, the efficacy of monomeric and tetrameric recombinant VP28 (rVP28) proteins were compared in WSSV challenged Penaeus monodon. First, the constructed plasmids containing monomeric recombinant VP28 (1xrVP28) or tetrameric recombinant VP28 (4xrVP28) were transformed and expressed in E. coli (BL21). The 6x-histidine-tagged rVP28 were purified using Ni-NTA column before confirming by SDS-PAGE and Western blot. Then, the intramuscular injection experiment was conducted by using pre-injection and co-injection methods. In pre-injection, shrimp was injected either with 2.5 ?g/g shrimp 1xrVP28 or 4xrVP28 prior to injection with WSSV (100 copies) 2 days after injected with the recombinant proteins. For co-injection, shrimp was simultaneously injected with either 1xrVP28 or 4xrVP28 and WSSV. To compare the protection efficiency between 1xrVP28 and 4xrVP28, the moribund and survivor shrimps were collected for semi-nested PCR, real-time PCR and histopathological analyses. The results showed no protection against WSSV by pre-injection test. However, the significant protection of rVP28 was observed in co-injection test when compared to the shrimp mortality in positive control. The relative percent survival (RPS) of co-injection of 4xrVP28 and WSSV exhibited 80% which was significantly higher than the group that was co-injected with 1xrVP28 and WSSV (63% RPS).In addition, suppression of WSSV replication at cellular level were also observed when shrimp‘s haemocyte were supplemented with rVP28. We conclude that 4xrVP28 showed improve protection efficacy against WSSV infection in P. monodon when compared to 1xrVP28 KEY WORDS: PENAEUS MONODON / WHITE SPOT SYNDROME VIRUS (WSSV) / MONOMERIC RECOMBINANT VP28 (1xrVP28) / TETRAMERIC RECOMBINANT VP28 (4xrVP28)
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ: กุ้งกุลาดำ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

สิริพงษ์ ฐิตะมาดี. "การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำAssessment of the protective effect of multiple repeated antiviral proteins against WSSV infection in back tiger shrimp". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2559

สิริพงษ์ ฐิตะมาดี. "การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำAssessment of the protective effect of multiple repeated antiviral proteins against WSSV infection in back tiger shrimp". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2559. Print.



TARR Wordcloud:
การประเมินประสิทธิภาพของการใช้เปปไทด์ต้านไวรัสแบบ multiple repeats เพื่อการป้องกัน การติดเชื้อโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ
สิริพงษ์ ฐิตะมาดี
มหาวิทยาลัยมหิดล
30 กันยายน 2559
การค้นหารูปแบบพันธุกรรมที่แสดงความสัมพันธ์กับลักษณะความต้านทานโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ การพัฒนาอาหารสำเร็จรูปเพื่อกระตุ้นการเจริญพันธุ์ของกุ้งกุลาดำเพศผู้ การวิเคราะห์ความเป็นพ่อแม่ลูกของกุ้งกุลาดำโดยใช้เครื่องหมายทางพันธุกรรมไมโครแซททัลไลซ์ การพัฒนาชุดตรวจ dual strip test สำหรับไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) และไวรัสโรคหัวเหลือง (YHV) การพัฒนาชุดตรวจ strip test ต่อโปรตีน ICP11 ของไวรัสตัวแดงดวงขาว ประสิทธิภาพของสารสกัดเปลือกมังคุด (Gracinia mangostana, Linn) ในการกำจัดจุลชีพที่ก่อให้เกิดโรคในกุ้งทะเล ประสิทธิภาพการใช้ไวรัส NPV หนอนกระทู้หอมร่วมกับไวรัส NPV หนอนกระทู้ผัก การศึกษากลไกที่เกี่ยวข้องกับการรอดตายจากการติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวของกุ้งกุลาดำ การพัฒนา recombinant 3ABC-based ELISA เพื่อวินิจฉัยสัตว์ที่ติดเชื้อไวรัสโรคปากและเท้าเปื่อยออกจากสัตว์ที่ได้รับวัคซีน การพัฒนา recombinant 3ABC-based ELISA เพื่อวินิจฉัยสัตว์ที่ติดเชื้อไวรัสโรคปากและเท้าเปื่อยออกจากสัตว์ที่ได้รับวัคซีน
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair