สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์โพรเจสเทอโรนในน้ำนมโคด้วยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมิวโนซอร์เบนด์แอสเสย์ : รายงานการวิจัย
ทรงจันทร์ ภู่ทอง - ไม่ระบุหน่วยงาน
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์โพรเจสเทอโรนในน้ำนมโคด้วยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมิวโนซอร์เบนด์แอสเสย์ : รายงานการวิจัย
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ทรงจันทร์ ภู่ทอง
บทคัดย่อ: โพรเจสเทอโรนเป็นสเตอรอยด์ฮอร์โมน (C21 steroid, pregn-4-ene-3, 20 dione) ซึ่งถูกผลิตและหลั่งมาอยู่ในน้าเลือดและน้านมโดยคอร์ปัสลูเทียมหลังจากการตกไข่ระหว่างวงรอบการเป็นสัด เป็นที่ทราบกันว่าระดับความเข้มข้นของโพรเจสเทอโรนสามารถใช้ระบุการเข้าสู่วงรอบการเป็นสัดและการตั้งครรภ์ของโคได้โดยมีความถูกต้องอยู่ที่ 75 – 96% ดังนั้นวิธีการตรวจหาทางระบบภูมิคุ้มกันจึงได้รับการพัฒนาและนาไปใช้ในการตรวจหาระดับฮอร์โมนโพรเจสเทอโรน โดยการใช้เทคนิค enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ซึ่งถือว่าเป็น หนึ่งในวิธีการที่เหมาะสมที่สุด เนื่องจากให้ ความไวสูง สามารถทาได้ง่าย และมีความจาเพาะสูง ในการศึกษานี้ได้พัฒนาชุดตรวจแบบ antibody-captured competitive ELISA โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดี โคลน 5/G7-F4 ที่ถูกสร้างมาจากการใช้โพรเจสเทอโรน 3-(o-carboxymethyl) oxime (P3-CMO) ในการกระตุ้น มาตรวจโพรเจสเทอโรนในรูป P3-CMO และ P4 (pregn-4-ene-3, 20 dione) จากการทดลองพบว่าความไวของการตรวจในรูปค่าความเข้มข้นในการยับยั้งที่ 50% ( IC50) และค่าขีดจากัดในการตรวจวัด (LOD) สาหรับโพรเจสเทอโรน P3-CMO มีค่า 2.18 และ 0.12 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลาดับ ในขณะที่การตรวจโพรเจสเทอโรน P4 มีค่าเท่ากับ 4.85 และ 0.5 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลาดับ ผลที่ได้นี้ ชี้ให้เห็นว่า ELISA ที่พัฒนาขึ้นมีความไวสูงพอที่จะใช้ตรวจโพรเจสเทอโรนในระหว่างรอบการเป็นสัดและการตั้งครรภ์ ( มีค่าโดยประมาณระหว่าง 1 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร และ 25 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร) ต่อมาจึงได้นา ELISA ที่พัฒนาขึ้นไปตรวจโพรเจสเทอโรน (P3-CMO) ที่ถูกเติมลงใน skim milk โดยค่าความถูกต้องของการตรวจจะแสดงในรูปของค่าร้อยละของการนากลับ (%recovery) และค่าความแม่นยาของการตรวจจะแสดงในรูปของร้อยละของสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน ( %coefficient of variation, % CV) ซึ่งพบว่ามีค่า 85-103 % และ 0.01-0.18 % ตามลาดับ จากการหาค่า %CV ของการวิเคราะห์ในการทดลองเดียวกัน (intra-variation assay) และระหว่างการทดลอง (inter-variation assay) พบว่ามีค่าอยู่ในช่วง 0.04-1 % และ 0.01-0.18 % ตามลาดับ เมื่อนา ELISA ที่พัฒนาขึ้นมาตรวจโพรเจสเทอโรนในรูป P4 ในส่วนไขมันหลัก (core fat) ที่สกัดจากน้านมดิบพบว่ามีค่าค่าร้อยละของการนากลับและร้อยละของสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวนอยู่ในช่วง 80%-118% และ 0.03%-3.33% ตามลาดับ โดยปริมาณโพรเจสเทอโรนที่ตรวจควรมีค่าอยู่ในช่วง 1-100 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร จากนั้นได้ใช้ ELISA ที่พัฒนาขึ้นตรวจปริมาณโพรเจสเทอโรนในน้านมโคดิบจากพระราชวังสวนจิตรลดา พบว่า สามารถตรวจสอบปริมาณโพรเจสเทอโรนที่อยู่ใน core fat และ skim milk ได้ แต่ปริมาณที่ตรวจได้จะให้ค่าสูงกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการตรวจด้วยชุดตรวจสอบทางการค้า อย่างไรก็ตามชุดตรวจที่พัฒนาขึ้นสามารถใช้บอกระดับการเพิ่มขึ้นหรือลดลงของโพรเจสเทอโรนในแต่ละวันได้สอดคล้องกับชุดตรวจสอบทางการค้า จากผลการทดลองชี้ให้เห็นว่า ELISA ที่พัฒนาขึ้นสามารถนามาใช้ในการตรวจสอบฮอร์โมนโพรเจสเทอโรนในนมดิบได้โดยมีความถูกต้องและแม่นยาอยู่ในช่วงที่ยอมรับได้
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/56649
คำสำคัญ: Enzyme-linked immunosorbent assay
เจ้าของลิขสิทธิ์: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ทรงจันทร์ ภู่ทอง. "การพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์โพรเจสเทอโรนในน้ำนมโคด้วยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมิวโนซอร์เบนด์แอสเสย์ : รายงานการวิจัย". ไม่ระบุหน่วยงาน. 2554

ทรงจันทร์ ภู่ทอง. "การพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์โพรเจสเทอโรนในน้ำนมโคด้วยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมิวโนซอร์เบนด์แอสเสย์ : รายงานการวิจัย". ไม่ระบุหน่วยงาน. 2554. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์โพรเจสเทอโรนในน้ำนมโคด้วยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมิวโนซอร์เบนด์แอสเสย์ : รายงานการวิจัย
ทรงจันทร์ ภู่ทอง
ไม่ระบุผู้เผยแพร่
2554
การวิจัยและพัฒนาพันธุ์ข้าวโดยใช้เทคโนโลยีชีวภาพภายใต้ความร่วมมือระหว่างกรมการข้าวกับสำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ ระยะที่ 2 การพัฒนาชุดตรวจสารฆ่าแมลงกลุ่มไพรีทรอยด์สังเคราะห์โดยเทคนิค ELISA (ต่อยอดจากปี2556) โครงการวิจัยและพัฒนาการเพาะปลูกและแปรรูปผลิตภัณฑ์จากเฮมพ์ โครงการย่อยที่ 4: การสร้างเครือข่ายวิจัยและพัฒนาเฮมพ์ ผลผลิตและคุณภาพน้ำนมจากแม่โคที่เลี้ยงด้วยหญ้าผสมถั่วในช่วงฤดูแล้ง สถานภาพด้านแร่ธาตุของโคซึ่งเลี้ยงในพื้นที่ดินพรุและดินทรายในเขตศูนย์ศึกษาการพัฒนาพิกุลทอง การพัฒนาวิธีอีไลซ่า สำหรับตรวจหาแอนติบอดี้ Neospora caninum ในโค โครงการ พัฒนาเยาวชนบนพื้นที่สูง การใช้วัสดุพลอยได้การเกษตรเลี้ยงโค การทำอาหารแร่ธาตุชนิดก้อนสำหรับเลี้ยงโค การวิจัยและพัฒนากั้งตั๊กแตนเพื่อเพิ่มมูลค่าทางเศรษฐกิจ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair