สืบค้นงานวิจัย
การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีน
Nitima Yookongkaew - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีน
ชื่อเรื่อง (EN): Transgene repeat formation and promoter methylation in transgenic plants
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Nitima Yookongkaew
บทคัดย่อ: ปัญหาในการสร้างพืชดัดแปลงพันธุกรรมที่สำคัญคือการเกิด silencing หรือการไม่แสดงออกของยีน งานวิจัยนี้จึงมุ่งเน้นศึกษาอิทธิพลของการจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นต่อการแสดงออกของยีน gus ที่อยู่ภายใต้การควบคุมของ CaMV 35S โปรโมเตอร์ในพืชต้นแบบคือ ยาสูบ (Nicotiana tabacum cv. Samson NN) ข้าว japonica (Oryza sativa ssp. japonica cv. Taichung) และ ข้าว indica (Oryza sativa ssp. indica cv. KDML105) จากการถ่ายยีนสู่ยาสูบด้วยเทคนิค Agrobacterium-mediated transformation และ particle bombardment พบว่าพืชทุกต้นที่ได้จากการถ่ายยีนด้วยวิธี Agrobacterium มีการแสดงออกของ gus ในขณะที่วิธีที่สองทำให้เกิด silencing ถึง 70% อันเป็นผลมาจากการขาดหายไปของชิ้นส่วนของยีน gus นอกจากนี้ได้ทดลองใช้ Agrobacterium ถ่ายยีนเข้าสู่แคลลัสของข้าว japonica พบต้นพืชที่มีการแสดงออกของ gus จำนวน 43% และปรากฏว่าเกิดการขาดหายไปของ gus และ CaMV 35S โปรโมเตอร์ในข้าวบางต้นที่ไม่มีการแสดงออกของยีน ในข้าว indica ได้พัฒนาการถ่ายยีนเข้าสู่ shoot apical meristem ในระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่มีการชักนำให้เกิด multiple shoots เมื่อใช้เชื้อ Agrobacterium ในการถ่ายยีนพบว่าสายพันธุ์ EHA105 มีประสิทธิภาพมากกว่า AGL1 การใส่ acetosyringone ไม่มีผลต่อการเพิ่มความสามารถในการถ่ายยีนของเชื้อ แต่การใช้ sonication เป็นเวลา 10 วินาทีพบการแสดงออกของ gus เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ผู้วิจัยได้ศึกษาปัจจัยต่างๆในการถ่ายยีนด้วยวิธี particle bombardment เช่น แรงดัน ระยะทาง และจำนวนครั้งของการยิง พบว่าปัจจัยเหล่านี้ไม่ทำให้การเกิด multiple shoots เปลี่ยนแปลง จากผลการทดลองในพืชที่ไม่มีการขาดหายไปของชิ้นส่วนของยีนโดยใช้เทคนิค Southern blot analysis และ RT-PCR ปรากฏว่าจำนวน copy ไม่มีผลต่อการแสดงออกของยีน gus ในขณะที่ระดับการสร้าง mRNA จะลดลงจากพืชที่มีการแสดงออกของ gus มาก ปานกลาง และไม่แสดงออกตามลำดับ เมื่อศึกษาการเกิดเมทิลเลชั่นที่บริเวณ CaMV 35S โปรโมเตอร์ด้วยวิธี bisulfite genomic sequencing PCR พบเมทิลเลชั่นสูงทั้งในบริเวณที่เป็น symmetrical and asymmetrical sequences ของพืชที่ไม่มีการแสดงออกของยีน ซึ่งแสดงถึงการเกิด silencing ที่ระดับ transcription การศึกษาบทบาทของการจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นต่อการแสดงออกของยีนจะนำไปสู่การพัฒนาวิธีสร้างพืชดัดแปลงพันธุกรรมที่มีประสิทธิภาพต่อไปในอนาคต
บทคัดย่อ (EN): however, the number of transgenes had no effect on the level of gus expression. RT-PCR analysis showed that the levels of gus transcripts decreased from the intensive, moderate and silent GUS-expressing plants, respectively. Using bisulfite genomic sequencing PCR, a high level of DNA methylation in the CaMV 35S promoter of transgenic plants was observed in all silent lines. Indeed, the methylations in both symmetrical and asymmetrical sequences were crucial for transgene inactivation at the transcription level. The investigation of regulation of transgene expression in relation to transgene integration and DNA methylation may provide more information for potential manipulation of transgenic plants
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=3106&obj_id=2709
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Genetic
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: ปัญหาในการสร้างพืชดัดแปลงพันธุกรรมที่สำคัญคือการเกิด silencing หรือการไม่แสดงออกของยีน งานวิจัยนี้จึงมุ่งเน้นศึกษาอิทธิพลของการจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นต่อการแสดงออกของยีน gus ที่อยู่ภายใต้การควบคุมของ CaMV 35S โปรโมเตอร์ในพืชต้นแบบคือ ยาสูบ (Nicotiana tabacum cv. Samson NN) ข้าว japonica (Oryza sativa ssp. japonica cv. Taichung) และ ข้าว indica (Oryza sativa ssp. indica cv. KDML105) จากการถ่ายยีนสู่ยาสูบด้วยเทคนิค Agrobacterium-mediated transformation และ particle bombardment พบว่าพืชทุกต้นที่ได้จากการถ่ายยีนด้วยวิธี Agrobacterium มีการแสดงออกของ gus ในขณะที่วิธีที่สองทำให้เกิด silencing ถึง 70% อันเป็นผลมาจากการขาดหายไปของชิ้นส่วนของยีน gus นอกจากนี้ได้ทดลองใช้ Agrobacterium ถ่ายยีนเข้าสู่แคลลัสของข้าว japonica พบต้นพืชที่มีการแสดงออกของ gus จำนวน 43% และปรากฏว่าเกิดการขาดหายไปของ gus และ CaMV 35S โปรโมเตอร์ในข้าวบางต้นที่ไม่มีการแสดงออกของยีน ในข้าว indica ได้พัฒนาการถ่ายยีนเข้าสู่ shoot apical meristem ในระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่มีการชักนำให้เกิด multiple shoots เมื่อใช้เชื้อ Agrobacterium ในการถ่ายยีนพบว่าสายพันธุ์ EHA105 มีประสิทธิภาพมากกว่า AGL1 การใส่ acetosyringone ไม่มีผลต่อการเพิ่มความสามารถในการถ่ายยีนของเชื้อ แต่การใช้ sonication เป็นเวลา 10 วินาทีพบการแสดงออกของ gus เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ผู้วิจัยได้ศึกษาปัจจัยต่างๆในการถ่ายยีนด้วยวิธี particle bombardment เช่น แรงดัน ระยะทาง และจำนวนครั้งของการยิง พบว่าปัจจัยเหล่านี้ไม่ทำให้การเกิด multiple shoots เปลี่ยนแปลง จากผลการทดลองในพืชที่ไม่มีการขาดหายไปของชิ้นส่วนของยีนโดยใช้เทคนิค Southern blot analysis และ RT-PCR ปรากฏว่าจำนวน copy ไม่มีผลต่อการแสดงออกของยีน gus ในขณะที่ระดับการสร้าง mRNA จะลดลงจากพืชที่มีการแสดงออกของ gus มาก ปานกลาง และไม่แสดงออกตามลำดับ เมื่อศึกษาการเกิดเมทิลเลชั่นที่บริเวณ CaMV 35S โปรโมเตอร์ด้วยวิธี bisulfite genomic sequencing PCR พบเมทิลเลชั่นสูงทั้งในบริเวณที่เป็น symmetrical and asymmetrical sequences ของพืชที่ไม่มีการแสดงออกของยีน ซึ่งแสดงถึงการเกิด silencing ที่ระดับ transcription การศึกษาบทบาทของการจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นต่อการแสดงออกของยีนจะนำไปสู่การพัฒนาวิธีสร้างพืชดัดแปลงพันธุกรรมที่มีประสิทธิภาพต่อไปในอนาคต
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Nitima Yookongkaew. "การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีนTransgene repeat formation and promoter methylation in transgenic plants". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2547

Nitima Yookongkaew. "การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีนTransgene repeat formation and promoter methylation in transgenic plants". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2547. Print.



TARR Wordcloud:
การจัดเรียงตัวของยีนและการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชั่นบนโปรโมเตอร์ในพืชที่ผ่านกระบวนการถ่ายยีน
Nitima Yookongkaew
มหาวิทยาลัยมหิดล
2547
การศึกษาโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับกลไกการควบคุมการถอดรหัสของยีนที่ไม่แสดงออกในพืชที่ผ่านการถ่ายยีน การออกแบบดีเอ็นเอไพรเมอร์เพื่อโคลนยีนไคทิเนสจาก Bacillus licheniformis PR-1 การพิสูจน์ยืนยันดีเอ็นเอของไก่ โดยใช้ไพรเมอร์ ที่จำเพาะต่อยีนไซโตโครม บี การศึกษาคุณสมบัติของยีนมะเร็งของไวรัส HPV16 : ความหลากหลายของยีน แหล่งที่อยู่และหน้าที่การกระตุ้นการแสดงออกของยีน ผลของแคดเมียมต่อโปรตีนจีเอพีดีเอชและการแสดงออกของยีนนีโมในส่วนที่มีความสัมพันธ์กับยีนของเอ็นไซม์จี-6-พีดีในเซลล์เฮปจี2 การตรวจหายีน CTX ของ Vibrio cholerae ด้วยวิธีควอทซ์คริสตัลไมโครบาลานซ์ ดีเอ็นเอเซ็นเซอร์ การแยกโปรโมเตอร์ของยีน heat shock จากแบคทีเรียแลคติกโดยใช้ Green Fluorescent Protein (GFP) เป็นยีนแสดงผล การถ่ายยีนสร้างโปรตีน cylindrical inclusion ของเชื้อไวรัสจุดวงแหวนในมะละกอเข้าสู่พืช การควบคุมการทำงานและลำดับเบสของโปรโมเตอร์ที่ตอบสนองต่อแสงของยีน ORF76 ของไซยาโนแบคทีเรีย ซึ่งทับซ้อนกับ terminator ของยีน htpG การโคลนยีนจากพยาธิใบไม้ในตับชนิด Opisthorchis Viverrini และการวิเคราะห์โปรตีนที่ได้จากยีนต้นแบบ
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair