สืบค้นงานวิจัย
การแยกและลักษณะสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งจากหัวมันสำปะหลัง Manigot esculenta CRANTZ
Wasin Sinlapawisut - จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
ชื่อเรื่อง: การแยกและลักษณะสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งจากหัวมันสำปะหลัง Manigot esculenta CRANTZ
ชื่อเรื่อง (EN): Isolation and characterization of starch debranching enzyme from tuber of cassava Manihot esculenta crantz
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Wasin Sinlapawisut
บทคัดย่อ: เอนไซม์ตัดโซ่กิ่ง (Debranching enzyme) เป็นเอนไซม์ตัวหนึ่งในกระบวนการสังเคราะห์แป้ง เอนไซม์ตัดโซ่กิ่งมีแอคติวิตีสองแบบคือ ไอโซอะไมเลส (Isoamylase) และพูลลูแลนเนส (pullulanase) ในการทดลองนี้ สกัดและศึกษาสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งในหัวสำปะหลังสายพันธุ์ 5 นาที พบแอคติวิตีของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งในส่วน parenchyma ของหัวมันเท่านั้น ได้ทำให้เอนไซม์ตัดโซ่กิ่งที่พบนี้บริสุทธิ์ขึ้นด้วยการตกตะกอน ที่ความเข้มข้นของแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัว 20-50% และวิธีคอลัมน์โครมาโตกราฟี โดยใช้ DEAE-Sepharose และ Sephadex G-150 เอนไซม์ที่เตรียมได้เป็นชนิดพูลลูแลนเนสที่มีความบริสุทธิ์ขึ้น 18 เท่า น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์นี้ซึ่งคำนวณจากการแยกด้วย Sephadex G-150 มีค่าเท่ากับ 103 กิโลดาลตัน เมื่อวิเคราะห์ด้วยอิเล็กโทรโฟเรซีสแบบเสียสภาพที่มีเอสอีเอส พบแถบโปรตีนหลักที่มีขนาด 35 กิโลดาลตัน ซึ่งคาดว่าพูลลูแลนเนสอาจประกอบด้วยหน่วยย่อยที่มีขนาดเท่ากัน 3 หน่วยและมีค่า pl เท่ากับ 4.75 พูลลูแลนเนสที่เตรียมได้สามารถเร่งปฏิกิริยาได้ดีที่ค่าความ เป็นกรด-ด่างเท่ากับ 6.0 และอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส และทนต่ออุณหภูมิในช่วง 4-40 องศาเซลเซียส เอนไซม์มีความจำเพาะต่อ พูลลูแลน (pullulan) สูงกว่า อะไมโลเพคติน และน้ำแป้ง (soluble starch) พูลลูแลนเนสมีค่า K[subscript m] ต่อพูลลูแลน เท่ากับ 0.88 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร การศึกษาผลของ sulfhydryl reagents พบว่า DTT สามารถกระตุ้นแอคติวิตีของเอนไซม์ แต่ NEM และ IAA มีผลยับยั้ง แสดงว่าหมู่ -SH มีบทบาทในการเกิดปฏิกิริยาของพูลลูแลนเนส สำหรับผลของ divalent metal ions พบว่า Ni[superscript 2+], Hg[superscript 2+] และ Cu[superscript 2+] มีผลยับยั้ง ในขณะที่ Mn[superscript 2+] และ Co[superscript 2+] มีผลกระตุ้นแอคติวิตีของพูลลูแลนเนส
บทคัดย่อ (EN): Debranching enzyme, one of enzymes involved in starch biosynthesis in plants, catalyzes the hydrolysis of alpha-1,6-glucosidic linkages specifically in alpha-glucan. The enzyme can show either pullulanase or isoamylase activity or both. Debranching enzyme was detectable in parenchyma of cassava tuber but not in cortex. Starch debranching enzyme was purified from parenchyma of cassava tuber by 20-50% saturated ammonium sulfate precipitation followed by chromatographies on DEAE-Sepharose and Sephadex G-150, which resulted in purity of 18 folds. The chromatographic profile showed a peak of pullulanase activity with molecular weight of 103 kDa on Sephadex G-150 and 35 kDa on SDS-PAGE. The debranching enzyme had a pI of 4.75, a pH optimum of 6.0, optimum temperature 37 ํC, and stable at 4-40 ํC. The enzyme showed high specificity for pullulan as a substrate, but lower activity with soluble starch and amylopectin. The K[subscript m] for pullulanase was 0.88 mg/ml. It can be activated by DTT but inhibited by NEM and IAA, indicating the involvement of SH-group on pullulanase activity. The enzyme was activated by Mn[superscript 2+] and Co[superscript 2+] but inhibited by Ni[superscript 2+], Hg[superscript 2+]and Cu[superscript 2+].
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://thailis-db.car.chula.ac.th/CU_DC/Thesis/February2006/Wasin.pdf
เผยแพร่โดย: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
คำสำคัญ (EN): Plant enzymes
เจ้าของลิขสิทธิ์: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
รายละเอียด: เอนไซม์ตัดโซ่กิ่ง (Debranching enzyme) เป็นเอนไซม์ตัวหนึ่งในกระบวนการสังเคราะห์แป้ง เอนไซม์ตัดโซ่กิ่งมีแอคติวิตีสองแบบคือ ไอโซอะไมเลส (Isoamylase) และพูลลูแลนเนส (pullulanase) ในการทดลองนี้ สกัดและศึกษาสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งในหัวสำปะหลังสายพันธุ์ 5 นาที พบแอคติวิตีของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งในส่วน parenchyma ของหัวมันเท่านั้น ได้ทำให้เอนไซม์ตัดโซ่กิ่งที่พบนี้บริสุทธิ์ขึ้นด้วยการตกตะกอน ที่ความเข้มข้นของแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัว 20-50% และวิธีคอลัมน์โครมาโตกราฟี โดยใช้ DEAE-Sepharose และ Sephadex G-150 เอนไซม์ที่เตรียมได้เป็นชนิดพูลลูแลนเนสที่มีความบริสุทธิ์ขึ้น 18 เท่า น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์นี้ซึ่งคำนวณจากการแยกด้วย Sephadex G-150 มีค่าเท่ากับ 103 กิโลดาลตัน เมื่อวิเคราะห์ด้วยอิเล็กโทรโฟเรซีสแบบเสียสภาพที่มีเอสอีเอส พบแถบโปรตีนหลักที่มีขนาด 35 กิโลดาลตัน ซึ่งคาดว่าพูลลูแลนเนสอาจประกอบด้วยหน่วยย่อยที่มีขนาดเท่ากัน 3 หน่วยและมีค่า pl เท่ากับ 4.75 พูลลูแลนเนสที่เตรียมได้สามารถเร่งปฏิกิริยาได้ดีที่ค่าความ เป็นกรด-ด่างเท่ากับ 6.0 และอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส และทนต่ออุณหภูมิในช่วง 4-40 องศาเซลเซียส เอนไซม์มีความจำเพาะต่อ พูลลูแลน (pullulan) สูงกว่า อะไมโลเพคติน และน้ำแป้ง (soluble starch) พูลลูแลนเนสมีค่า K[subscript m] ต่อพูลลูแลน เท่ากับ 0.88 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร การศึกษาผลของ sulfhydryl reagents พบว่า DTT สามารถกระตุ้นแอคติวิตีของเอนไซม์ แต่ NEM และ IAA มีผลยับยั้ง แสดงว่าหมู่ -SH มีบทบาทในการเกิดปฏิกิริยาของพูลลูแลนเนส สำหรับผลของ divalent metal ions พบว่า Ni[superscript 2+], Hg[superscript 2+] และ Cu[superscript 2+] มีผลยับยั้ง ในขณะที่ Mn[superscript 2+] และ Co[superscript 2+] มีผลกระตุ้นแอคติวิตีของพูลลูแลนเนส
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Wasin Sinlapawisut. "การแยกและลักษณะสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งจากหัวมันสำปะหลัง Manigot esculenta CRANTZIsolation and characterization of starch debranching enzyme from tuber of cassava Manihot esculenta crantz". จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. 2547

Wasin Sinlapawisut. "การแยกและลักษณะสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งจากหัวมันสำปะหลัง Manigot esculenta CRANTZIsolation and characterization of starch debranching enzyme from tuber of cassava Manihot esculenta crantz". จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. 2547. Print.



TARR Wordcloud:
การแยกและลักษณะสมบัติของเอนไซม์ตัดโซ่กิ่งจากหัวมันสำปะหลัง Manigot esculenta CRANTZ
Wasin Sinlapawisut
จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
2547
การศึกษาทางพันธุศาสตร์โมเลกุลของโปรตีนที่แสดงออกในช่วงการพัฒนาของหัวมันสำปะหลัง การแยกแบคทีเรียและการศึกษาลักษณะสมบัติในการย่อยสลาย 4-คลอโรอะนีลีน การศึกษาผลกระทบของการปรับเปลี่ยนความยาวของเครื่องกรองแบบตะแกรงโค้งต่อประสิทธิภาพของการแยกแป้งมันสำปะหลังออกจากกากอ่อนมันสำปะหลัง การผลิตเอทานอลจากเหง้ามันสำปะหลัง เอนไซม์ไฮดรอกซีไนไตรไลเอสจากหัวมันสำปะหลัง ปริมาณการสะสมคาร์บอนในมันสำปะหลังและยางพารา จังหวัดระยอง การแยกเอนไซม์ให้บริสุทธิ์และการศึกษาสมบัติทางชีวเคมีของเอนไซม์ซีรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานส์เฟอเรสจากเชื้อพลาสโมเดียมไวแวกซ์ การหาภาวะที่เหมาะสมในการผลิตนิวทรัลโปรติเอสทนร้อนจาก Bacillus cereus และลักษณะสมบัติของเอนไซม์ที่บริสุทธิ์บางส่วน การหารูปแบบทางพันธุกรรมที่จำเพาะต่อปริมาณแป้งในมันสำปะหลัง ลักษณะสมบัติระดับโมเลกุลของไซยาโนแบคทีเรีย Synechococcus sp. และสาหร่ายขนาดเล็ก Chlorella spp. ที่แยกได้ในประเทศไทย
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair