สืบค้นงานวิจัย
การตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY gene
ณัฐนันท์ ศิริรัตนธัญญะกุล - กรมปศุสัตว์
ชื่อเรื่อง: การตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY gene
ชื่อเรื่อง (EN): TSPY gene for sex determination of bovine embryos by one step Real-Time PCR
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ณัฐนันท์ ศิริรัตนธัญญะกุล
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Janejira Kongpunvijit
บทคัดย่อ: วัตถุประสงค์ของการศึกษาในครั้งนี้เพื่อพัฒนาการตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยการนำเทคนิค Real-Time PCR ร่วมกับ testis-specific protein Y (TSPY) gene ให้มีความไว แม่นยำและรวดเร็ว เพื่อใช้ในการผลิตตัวอ่อนแช่แข็งแยกเพศ ทำการศึกษาโดยการเก็บตัวอย่างเลือดโคเพศผู้และเพศเมีย เพศละ 5 ตัวเพื่อใช้เป็น positive control และหาปริมาณดีเอ็นเอน้อยที่สุดที่สามารถตรวจแยกเพศได้ โดยการเก็บรังไขโคจากโรงฆ่าสัตว์ เพื่อมาผลิตตัวอ่อนด้วยวิธี IVF (In Vitro Fertilization) นำเซลล์ตัวอ่อนโคที่เจริญถึงระยะ 8-16 เซลล์ (days 2-4 post insemination) จำนวน 30 ตัวอ่อน เจาะเก็บแยกเซลล์บลาสโตเมียร์ (blastomere) ในแต่ละตัวอ่อน เป็น 4 กลุ่ม คือ กลุ่มจำนวน 1 2 4 เซลล์ และเซลล์ที่เหลือ แยกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส สกัดดีเอ็นเอและตรวจแยกเพศด้วยไพร์เมอร์ติดสารเรืองแสง (fluorogenic probe primers) จำนวน 2 ชุดที่ความจำเพาะต่อโครโมโชม X และโครโมโซม Y ด้วยเทคนิค Real-Time PCR ผลการศึกษาพบว่า ค่ความเข้มข้นดีเอ็นเอต่ำที่สุดจากเลือดโคที่สามารถตรวจแยกเพศได้มีค่าเท่ากับ 0.001 นาโนกรัม/ไมโครลิตร จำนวนเซลล์ blastomere ทั้ง 4 กลุ่ม ให้ผลการตรวจเหมือนกับเซลล์ที่ได้มาจากตัวอ่อนตัวเดียวกัน โดยประสิทธิภาพในการตรวจแยกเพศของจำนวนเซลล์ blastomere 100.00 (30/30) เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ สรุปว่าการตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY gene สามารถตรวจที่ความเข้มข้นของดีเอ็นเอต่ำสุดที่ระดับ 0.001 นาโนกรัม/ไมโครลิตร และจำนวนเซลล์ blastomere ตั้งแต่ 4 เซลล์ขึ้นไป ให้ผลความถูกต้องร้อยเปอร์เซ็นต์ แต่ให้ผลไม่ต่างกับเซลล์ blastomere 1 และ 2 เซลล์
บทคัดย่อ (EN): This study was performed in order to develop a novel, rapid and sensitive method for sex determination of bovine embryos using TSPY (testis-specific protein Y) gene by one step Real-Time polymerase chain reaction (PCR) technique for produced frozen sex-embryo. Blood sample were collected from 5 male and female cows for positive control and test sensitivity of Real-Time PCR at the lowest target DNA concentration. Bovine embryos were produced by IVF (In Vitro Fertilization) method. A total of 30 bovine embryos at 8–16 cells stage were removed and blastomeres were separated in 4 groups 1, 2, 4 and remaining cells then kept in 0.2 ml tube and stored at -20 C until PCR analysis. DNA was extracted from the embryonic cells and analysed in Real-Time PCR utilizing two different sets of Y-specific chromosome (TSPY gene) and X-specific chromosome (K-Casein gene) and fluorogenic probe primers. The results showed that could be detected at lowest DNA concentration of 0.001 ng/ul blood DNA template. Amount of Blastomeres in 4 groups of the same embryo were concordant in all cases and sexing efficiency was 86.67 (26/30), 93.33 (28/30), 100.00 (30/30) and 100.00 (30/30) when 1, 2, 4 and remaining cells, respectively. In conclusion, sex determination of bovine embryos with TSPY gene by Real-Time PCR technique could be detected at lowest DNA concentration at 0.001 ng/ul and up 4 blastomere cells was 100 % accurate.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://biotech.dld.go.th/webnew/images/Journal/2564/BBLP-Journal2021.pdf
เผยแพร่โดย: กรมปศุสัตว์
คำสำคัญ: ยีนทีเอสพีวาย
คำสำคัญ (EN): TSPY gene
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ณัฐนันท์ ศิริรัตนธัญญะกุล. "การตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY geneTSPY gene for sex determination of bovine embryos by one step Real-Time PCR". กรมปศุสัตว์. 2553

ณัฐนันท์ ศิริรัตนธัญญะกุล. "การตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY geneTSPY gene for sex determination of bovine embryos by one step Real-Time PCR". กรมปศุสัตว์. 2553. Print.



TARR Wordcloud:
การตรวจแยกเพศตัวอ่อนโคโดยวิธี Real-Time PCR ด้วย TSPY gene
ณัฐนันท์ ศิริรัตนธัญญะกุล
กรมปศุสัตว์
2553
กรมปศุสัตว์
การใช้วัสดุพลอยได้การเกษตรเลี้ยงโค การพัฒนาตัวอ่อนจากการปฏิสนธิภายนอกร่างกายโดยใช้น้ำเชื้อ แยกเพศในโคนม การศึกษาเบื้องต้นการใช้ใบกระถินณรงค์เป็นอาหารเสริมสำหรับการเลี้ยงโค การทดสอบการเสริม Urea Molasses Multinutrient Block (UMMB) แก่โครีดนมในฟาร์มเกษตรกร การพัฒนาวิธีอีไลซ่า สำหรับตรวจหาแอนติบอดี้ Neospora caninum ในโค ผลการใช้แร่ธาตุต่อความเข็มข้นของระดับแร่ธาตุในเลือดโคที่ปล่อยแทะเล็มในสภาพทุ่งหญ้าธรรมชาติ ประสิทธิภาพของวิธีการฝากตัวอ่อนโคแช่แข็งแบบ Direct transfer การจำแนกเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ก่อโรค 5 สปีชีส์ด้วยวิธีมัลติเพล็กซ์เรียลไทม์พีซีอาร์ร่วมกับการวิเคราะห์การคลายเกลียวของสายดีเอ็นเอ Identification and differentiation of five pathogenic Campylobacter spec ผลของสายพันธุ์โคตัวรับต่ออัตราการตั้งท้องหลังการย้ายฝากตัวอ่อนโคแช่แข็งโดยวิธี Direct transfer เปรียบเทียบความเข้มข้นของปริมาณดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดโคในการตรวจแยกเพศ ด้วยวิธี PCR โดยใช้ TSPY GENE
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair