สืบค้นงานวิจัย
การประยุกต์ใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดอนุภาคทองคำนาโนในการตรวจสอบผลผลิตแลมป์เพื่อการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคกุ้งโตช้า
วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การประยุกต์ใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดอนุภาคทองคำนาโนในการตรวจสอบผลผลิตแลมป์เพื่อการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคกุ้งโตช้า
ชื่อเรื่อง (EN): se of gold nanoprobes combining with Loop-mediated isothermal amplification for detection of shrimp slow growth viruses
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย
บทคัดย่อ: เทคนิคแลมป์เป็นเทคนิคที่สามารถเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอโดยอาศัยการทำงานของเอนไซม์ Bst DNA polymerase ที่อุณหภูมิคงที่เพียงอุณหภูมิเดียว 60oC ถึง 65oC และใช้ไพรเมอร์ที่ออกแบบอย่างจำเพาะต่อ target sequence อย่างน้อย 4 ตัว ซึ่งประกอบด้วย 6 ตำแหน่งของ target sequence นั้น ทำให้วิธีนี้มีความจำเพาะอย่างยิ่ง โดยเทคนิคแลมป์จะใช้เวลาในการทำปฏิกิริยาสั้นมากประมาณ 30 นาที ถึง 1 ชั่วโมง และเทคนิคนี้สามารถผนวกเข้ากับการตกตะกอนอนุภาคทองคำนาโนหรือ AuNP-Pr โดยการดูสีที่เปลี่ยนไปด้วยตาเปล่าจึงเหมาะสมต่อการนำไปประยุกต์ใช้ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อไวรัสในกุ้ง โดยในงานวิจัยนี้ได้ทำการพัฒนาการตรวจไวรัสที่เป็นสาเหตุของโรคกุ้งโตช้าหรือแคระแกร็น 3 ชนิด คือไวรัส IHHNV ที่ก่อโรคโตช้าในกุ้งขาวแวนนาไม ไวรัส MBV และไวรัสแหลมสิงห์ ที่เป็นสาเหตุของโรคโตช้าในกุ้งกุลาดำ โดยหลังจากการทำปฏิกิริยาแลมป์เรียบร้อยแล้วตรวจสอบผลผลิต LAMP ด้วยเทคนิคการตกตะกอนของอนุภาคทองคำในเวลาเพียง 5-6 นาที โดยมีขั้นตอนการจับผลผลิต LAMP ด้วยตัวตรวจจับ DNA ที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโนเป็นเวลา 5 นาที และตกตะกอนอนุภาคทองคำด้วยเกลืออีกไม่เกิน 1 นาที โดยสามารถอ่านผลจากสีที่เปลี่ยนไปถ้าผลบวกจะเป็นสีแดงแต่ถ้าผลลบจะเปลี่ยนเป็นสีม่วงหรือเทา เทคนิคดังกล่าวมีความไวในการตรวจไวรัสเหล่านี้เทียบเท่ากับเทคนิค nested PCR และยังเป็นการเพิ่มความจำเพาะในการตรวจผลผลิตแลมป์อีกด้วย อีกทั้งเป็นเทคนิคที่สะดวกและรวดเร็วง่ายต่อการนำไปใช้ในภาคสนาม ไม่ต้องใช้เครื่องมือวิทยาศาสตร์ที่มีราคาแพงและสารก่อมะเร็ง
บทคัดย่อ (EN): The loop-mediated isothermal amplification (LAMP) medthod is a method for nucleic acid amplification in which the target nucleic acid is amplified by a single enzyme at a constant temperature. The LAMP method uses at least four primers that recognize six regions on the target nucleic acid, so that the specificity is extremely high. The LAMP method can be combined with a DNA-functionalized gold nanoparticles as probes for highly specific, rapid and simple visual detection of the LAMP amplicons. In this study, we have successful developed LAMP-AuNP methods for detection of Infectious hypodermal and hepatopoietic necrosis virus (IHHNV), Monodon baculovirus (MBV) and Laem-Singh virus (LSNV), slow growth in P.vanamei and P.monodon. Using the LAMP-AuNP protocol, 30-60 min amplification followed by 5 min hybridization with a red ssDNA-labled nanogold probe and by 1 min a salt induced AuNP aggregation step. After salt induction, positive samples remained red while negative samples turned blue from nanogold aggregation and eventual precipitation. Detection sensitivity was comparable to other commonly-used methods for nested PCR detection but had the additional advantages of reduced assay time, confirmation of amplicon identity by hybridization and elimination of electrophoresis with carcinogenic ethidium bromide.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): nanogold particle
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย. "การประยุกต์ใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดอนุภาคทองคำนาโนในการตรวจสอบผลผลิตแลมป์เพื่อการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคกุ้งโตช้าse of gold nanoprobes combining with Loop-mediated isothermal amplification for detection of shrimp slow growth viruses". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2557

วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย. "การประยุกต์ใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดอนุภาคทองคำนาโนในการตรวจสอบผลผลิตแลมป์เพื่อการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคกุ้งโตช้าse of gold nanoprobes combining with Loop-mediated isothermal amplification for detection of shrimp slow growth viruses". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2557. Print.



TARR Wordcloud:
การประยุกต์ใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดอนุภาคทองคำนาโนในการตรวจสอบผลผลิตแลมป์เพื่อการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคกุ้งโตช้า
วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย
มหาวิทยาลัยมหิดล
30 กันยายน 2557
การตรวจสอบการติดเชื้อไวรัสโรคพืช การศึกษาระบาดวิทยา กลไกการก่อโรค และการเรียงตัวของจีโนมของไวรัสชนิดใหม่ที่แยกได้จากกุ้งกุลาดำที่โตช้า การสร้างอนุภาคไวรัส MrNV ก่อโรคกุ้งก้ามกรามในระบบเซลล์แมลง SF9 การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในผลิตภัณฑ์อาหาร การสำรวจความหลากหลายทางชีวภาพสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม และการตรวจหาโรคติดเชื้อก่อโรคในสัตว์ป่า บริเวณพื้นที่ปกปักพันธุกรรมพืช เขาวังเขมร จังหวัดกาญจนบุรี คู่มือการตรวจวิเคราะห์และจัดการ สิ่งส่งตรวจจากผู้ป่วยสงสัย โรคติดเชื้ออีโบลา การตรวจคัดกรองเชื้อก่อโรคในฟาร์มเพาะพันธุ์และอนุบาลกุ้งทะเลของประเทศไทย เทคโนโลยี RNAi เพื่อพัฒนาให้กุ้งโตเร็วและต้านทานโรค การศึกษาปฏิสัมพันธ์ในกุ้งก้ามกรามและไวรัสก่อโรคในกลุ่ม nodavirus การพัฒนาชุดตรวจแบบแถบสีสำหรับใช้ตรวจการติดเชื้อไวรัสโรคทอร่าในกุ้ง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair