สืบค้นงานวิจัย
การกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธทในเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์
นิศาชล เครื่องจันทร์ - กรมวิชาการเกษตร
ชื่อเรื่อง: การกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธทในเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์
ชื่อเรื่อง (EN): Acetolactate Synthase Gene Mutation Conferring lmazapyr-Resistant Sugarcane Cell Line
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: นิศาชล เครื่องจันทร์
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Nisachol Khruangchan
บทคัดย่อ: การคัดเลือกเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยต้านทานสารอิมาซาเพอร์ ได้ดำเนินการเพื่อพิจารณไกลพื้นฐานทางชีวเคมี และชีวโมเลกุลว่ามีการกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธท (ALS) เกิดขึ้นในเซลล์อ้อยที่ต้านทานสารหรือไม่ ทำการทดลองที่ห้องปฏิบัติการของหน่วยวิจัยด้านพืชศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ วิทยาเขตกำแพงแสน จ.นครปฐม ในการคัดเลือกเซลล์อ้อยต้านทานสารอิมาซาเพอร์ ได้ชักนำแคลลัสจากส่วนม้วนใบอ่อนของอ้อยพันธุ์ K 97-32 จากนั้นชักนำให้เกิดเป็นเซลล์แขวนลอยโดยใช้สูตรอาหาร MS ดัดแปลงที่ประกอบด้วย น้ำมะพร้าว 10%/ล. Caseim hydrolysate 0.5 ก./ล. myo-inositol 0.1 ก./ลิตร และ 2,4-D 3มก./ลิตร โดยเริ่มต้นทำการคัดเลือกเซลล์อ้อยต้านทานสารอิมาซาเพอร์ จากระดับความเข้มข้นของสารอิมาซาเพอร์ตั้งแต่ 0.1 ถึง1 ไมโครโมลาร์ ใช้เวลาในการคัดเลือกนาน 378 วัน เซลล์ที่รอดจากการคัดเลือกจะทำการเปลี่ยนอาหารใหม่ในช่วงทุกๆ 14 วัน ซึ่งมีดัชนีของความต้านทานสารเป็น 918 เท่าของเซลล์อ้อยปกติ การศึกษากลไกทางชีวเคมีของความต้านทานสารอิมาซาเพอร์โดยพิจารณาจากการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมของเอนไซม์ ALS ในเซลล์อ้อยที่ต้านทานสารและเซลล์อ้อยปกติ เมื่อพิจารณาจากค่า I50 แสดงว่าในเซลล์อ้อยที่ต้านทานสารมีกิจกรรมของเอนไซม์ ALS มากกว่าเซลล์อ้อยปกติ 10.8 เท่า นอกจากนี้ได้ทำการพิจารณาในระดับชีวโมเลกุลของยีน ALS ซึ่งเป็นตำแหน่งเป้าหมายในการเข้าทำลายของสารกำจัดวัชพืช โดยทำการโคลนยีนและหาลำดับเบสในส่วนที่ครอบคลุมบริเวณ(domain) B และ E ของยีน ALS ขนาด 455 คู่เบส จากเซลล์อ้อยปกติและเซลล์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์ ซึ่งได้ทำการขึ้นทะเบียนใน Genbank รหัส EU 243998 และ EU 243999 ตามลำดับเมื่อตรวจสอบลำดับเบสของยีน ALS ในเซลล์อ้อยที่ต้านทานสาร พบว่ามีการกลายพันธุ์เฉพาะจุดเกิดขึ้นที่เป็นแบบการหายไป(deletion) ของกรดอะมิโนอะลานีน(alanine) เกิดขึ้นที่ตำแหน่ง 666 เมื่อเปรียบเทียบกับตำแหน่งลำดับกรดอะมิโนของ Arabidopsis thaliana (GenBank accession number X 51514) จากการศึกษาในครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า ในเซลล์อ้อยที่ต้านทานสารจะมีการกลายพันธุ์เฉพาะจุดเกิดขึ้นภายในยีน ALS ที่ เป็นแบบการหายไป ซึ่งอาจจะส่งผลทำให้มีการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมขอเอนไซม์ ALS ที่เป็นแบบการตอบสนองน้อย(less sensitivity) ต่อสารอิมาซาเพอร์
บทคัดย่อ (EN): Selection of sugarcane cell line resistant to imazapyr was conducted to investigate whether the biochemical and molecular basis of resistance was acetolactate synthase (ALS) gene mutation in resistant sugarcane cells. The experiment was conducted at the Laboratory of Plant Research Group, National Centre for Genetic Engineering and Biotechnology, Kasetsart University, Kamphaeng Saen Campus, Nakhon Pathom province. Selection of sugarcane cells resistant to imazapyr was carried out using callus and cell suspension induced from the tight young furled leaves of sugarcane clone K 97-32. The cell suspension was cultured in modified liquid MS medium supplemented with coconut water 10%/L, casein hydrolysate 0.5 g/l, myo-inositol 0.1 g/l and 2,4-D 3mg/l. A sugarcane cell resistant to 1µM imazapyr was obtained after 378 days of selection, using a stepwise selection with increasing concentraltions of imazapvr from 0.1 to 1µM. Surviving cells were sub-cultured at 14 days interval. This indicates that the resistant cells was 918-fold more resistant to imazapyr than the normal cells. To establish the biochemical mechanism of resistance to imazapyr, ALS activity of the resistant cells was 10.8-fold higher than that of the normal cells. In addition, to investi-gate the molecular of ALS gene at target site responsible for the herbicide activity, the partial of ALS gene region covering 455 bp of domain B and E from the normal and resistant cells was amplified and sequenced. The partial sequence of ALS gene of the normal and resistant cells was deposited in the GenBank database with accession number EU 243998 and EU 243999, respectively. The ALS gene sequence of the resistant cells showed the point mutant a form deletion of alanine (A) at 666 position, numbering based on Arabidopsis thaliana (GenBank accession number X 51514). This result suggested that the partial of ALS gene was occurred the point mutant a form deletion resulting in the alteration at target site, based on the ALS activity, leading to less sensitivity to imazapyr.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: กรมวิชาการเกษตร
คำสำคัญ: อ้อย
คำสำคัญ (EN): sugarcane
เจ้าของลิขสิทธิ์: กรมวิชาการเกษตร
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

นิศาชล เครื่องจันทร์. "การกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธทในเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์Acetolactate Synthase Gene Mutation Conferring lmazapyr-Resistant Sugarcane Cell Line". กรมวิชาการเกษตร. 2552

นิศาชล เครื่องจันทร์. "การกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธทในเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์Acetolactate Synthase Gene Mutation Conferring lmazapyr-Resistant Sugarcane Cell Line". กรมวิชาการเกษตร. 2552. Print.



TARR Wordcloud:
การกลายพันธุ์ของยีนอะซิโตแลคเตทซินเธทในเซลล์ของสายพันธุ์อ้อยที่ต้านทานสารอิมาซาเพอร์
นิศาชล เครื่องจันทร์
กรมวิชาการเกษตร
2552
กลไกทางชีวเคมีและชีวโมเลกุลในพันธุ์อ้อยต้านทานสารอิมาซาเพอร์ การติดตามตรวจสอบสารกลุ่มโพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนในอากาศริมถนนโดยใช้ใบไม้ในเขตจังหวัดนนทบุรี เปรียบเทียบการใช้ชนิดและปริมาณปุ๋ยอินทรีย์ในการปลูกอ้อยเพื่อเกษตรกรรายย่อยใน อำเภอศรีเทพ จังหวัดเพชรบูรณ์ โครงการ : การทดสอบผลผลิตอ้อยโคลนก้าวหน้าในระดับภูมิภาค (อ้อยตอปีที่ 1) อ้อยพันธุ์ ชัยนาท 1 การจำแนกสายพันธุ์และความต้านทานต่อโรค Streptococcosis ของปลานิล (Oreochromis niloticus Linnaeus) โรคเหี่ยวเน่าของอ้อยพันธุ์สุพรรณ 1 อ้อยคั้นน้ำพันธุ์สุพรรณบุรี 50 อ้อยอเนกประสงค์โคลนพันธุ์ SRS2000-5-14 โครงการวิจัยการศึกษาศักยภาพการรับไนโตรเจนทางชีวภาพ กลุ่มแบคทีเรียตรึงไนโตรเจนที่สำคัญและปฏิกิริยาสัมพันธ์ระหว่างแบคทีเรียตรึงไนโตรเจนกับอ้อยในอ้อยสายพันธุ์ไทย
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair