คลังข้อมูลการวิจัยการเกษตรไทย

ผู้แต่ง จณิศรา ฤดีอเนกสิน

เผยแพร่โดย

สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science

เผยแพร่เมื่อ 2563

หน่วยงาน สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science

คัดลอก URL

ชื่อเรื่อง:	การพัฒนาวิธีการตรวจโรคเมลิออยโดสิสด้วย loop-mediated isothermal amplification (LAMP) Development of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for diagnosing melioidosis
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ:	จณิศรา ฤดีอเนกสิน
บทคัดย่อ:	เมลิออยโดสิสเป็นโรคติดเชื้อที่เกิดจากแบคทีเรีย Burkholderia pseudomallei มักพบการติดเชื้อที่ผิวหนังปอดในกระแสเลือดและอวัยวะภายใน ผู้ป่วยเสียชีวิตได้หากไม่ได้รับการรักษาทันเวลา การศึกษาวิจัยนี้พัฒนาวิธี loop-mediated isothermal amplification (LAMP) สำหรับตรวจหาดีเอ็นเอของเชื้อ B. pseudomallei ได้ผลเร็ว โดยการเพิ่มดีเอ็นเอของเชื้อในสภาวะอุณหภูมิคงที่ 65°ซ ผลการพัฒนาโดยเลือกใช้ไพรเมอร์ 2 คู่ที่จำเพาะต่อตำแหน่งดีเอ็นเอเป้าหมายร่วมกับการใช้น้ำยา in-house LAMP และสีตรวจสอบที่เตรียมขึ้น โดยปรับสภาวะให้เหมาะสมในเวลาประมาณ 1 ชั่วโมง สามารถตรวจสอบดีเอ็นเอที่เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วได้ด้วยตาเปล่า วิธี LAMP ที่พัฒนาขึ้นมีความจำเพาะเมื่อทดสอบกับเชื้อแบคทีเรียต่างๆ 30 สปีชีส์และจำนวนเชื้อ B. pseudomallei ต่ำสุดที่ตรวจได้ 290 CFU/ml เมื่อสกัดดีเอ็นเอของเชื้อที่เติมลงในตัวอย่างเลือดด้วยชุดน้ำยาสำเร็จรูป เหมาะสมที่จะใช้ตรวจในจุดบริการผู้ป่วยโดยไม่ใช้เครื่องมือซับซ้อน จะทำการพัฒนาและประเมินวิธีการตรวจนี้ต่อไป Melioidosis is an infectious disease caused by bacteria, Burkholderia pseudomallei. The infection commonly involved skin, lung, blood and internal organs. Patients are at risk of deaths if there is a delay of the initial treatment. This study aimed to develop loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for the rapid detection of B. pseudomallei DNA by isothermal amplification at 65°C. Two sets of primers targeting B.pseudomallei specific DNA, in-house LAMP reagents and a detecting dye were applied and the reaction was optimized. As a result, large amounts of amplified products were obtained within an hour and could be easily detected by naked eyes. The specificity was achieved when tested against 30 bacterial species. By using a commercial extraction kit, B. pseudomallei DNA could be prepared from blood spiked specimens and subsequently detected by LAMP analysis as low as 290 CFU/ml. The method is simple without the requirement of sophisticated equipment and, hence, suitable to be used as point-of-care testing. Further development and evaluation will be continued.
บทคัดย่อ:	ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN):	th
เอกสารแนบ:	http://nih.dmsc.moph.go.th/research/showimgdetil.php?id=712
เผยแพร่โดย:	สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุข กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ National Institute of Health, Department of Medical Science
คำสำคัญ:	Melioidosis
เจ้าของลิขสิทธิ์:	สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์สาธารณสุขกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์