สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCR
พรเพ็ญ พัฒนโสภณ - กรมปศุสัตว์
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCR
ชื่อเรื่อง (EN): Development of multiplex PCR for detection of Streptococcus suis and serotype specific genes
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: พรเพ็ญ พัฒนโสภณ
บทคัดย่อ: เชื้อ Streptococcus suis (S. suis) จัดเป็นเชื้ออโรคติดต่อระหว่างสัตว์และคนที่สำคัญ การตรวจวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการมีความคลาดเคลื่อนสูง หรือไม่สามารถทำได้เนื่องจากมีความแตกต่างของคณสมบัติทางชีวเคมีมาก คณะผู้วิจัยจึงได้พัฒนาวิธี multiplex PCR สำหรับการตรวจวินิจฉัยเชื้อ S. suis และตรวจแยกซีโรไทป์โดยใช้ไพรเมอร์ ที่่จําเพาะต่อ 16S rRNA และ ยีนแคปซูล (capsular polysaccharide gene, cps) ซีโรไทป์ 1 (หรือ14), 2 (หรือ1/2), 7 และ 9 และ ประเมินความถูกต้องโดยใช้เชื้ออ้างอิงมาตรฐาน S. suis ซีโรไทป์ 1/2, 1 - 9 และ 14 และเชื้อที่ไม่ใช่ S. suis จำนวน 7 ชนิด ผลปรากฏว่า multiplex PCR ให้ PCR product ตรงตามเชื้ออ้างอิง ในขณะที่เชื้ออื่น ๆ ที่ไม่ใช่เชื้อ S. suis ให้ผลลบและสามารถวินิจฉัยได้ที่ความเข้มข้นเชื้อตั้งแต่ 104 cfu/ml ขึ้นไป เมื่อทดลองใช้วิธี multiplex PCR ตรวจวินิจฉัยเชื้อ S. suis สายพันธุ์ท้องถิ่นที่แยกได้จากสุกรป่วยร่วมกับวิธีทางซีรั่มวิทยา เชื้อ S. suis จากสุกรป่วยทั้งหมด 47 สายพันธุ์ซึ่งทำการวินิจฉัยเบื้องต้นด้วยวิธีทางจุลชีววิทยา และตรวจยืนยันโดยใช้ API? 20 Strep ว่าเป็น S. suis 1 และS. suis 2 จำนวน 6 และ 41 สายพันธุ์ตามลำดับ ผลการตรวจด้วย multiplex PCR ให้ผลเป็น S. suis ทุกสายพันธุ์แต่ผลการแยกซีโรไทป์ด้วยวิธี PCR มีความสอดคล้องกับ API 20 Strep ในระดับต่ำ กล่าวคือ เชื้อ S. suis ที่วิเคราะห์ว่าเป็น S. suis 2 โดย API 20 Strep และผลการแยกซีโรไทป์ด้วยวิธี PCR เป็นไทป์ 2 (หรือ 1/2) มีเพียง 34.1% (14/41) ในขณะที่ผลการแยกซีไทป์ด้วยวิธี PCR ให้ผลสอดคล้องกับวิธีทางซีรั่มวิทยาทุกตัวอย่าง คือเป็นซีโรไทป์ 2 และ 1/2 จำนวน 7 และ 7 สายพันธุ์ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบซีโรไทป์ 9 จำนวน 11 สายพันธุ์ซึ่งวินิจฉัยโดย API 20 Strep ว่าเป็น S. suis 1 และ S. suis 2 จำนวน 2 และ 9 สายพันธุ์ตามลำดับ สวนในสุกรปกติ ทำการตรวจวินิจฉัย S. suis เป็นเบื้องต้นก่อนด้วย PCR เดี่ยวแล้วจึงใช้วิธี multiplex PCR ตรวจหาซีโรไทป์เนื่องจากตัวอย่างที่เก็บมีจำนวนถึง 1,427 ตัวอย่าง ผลการตรวจพบเชื้อ S. suis จำนวน 346 สายพันธุ์เป็นซีโรไทป์ 1 (หรือ 14) และไทป์ 2 (หรือ 1/2) จำนวน 1 และ 4 สายพันธุ์ ตามลำดับ เมื่อตรวจยืนยันทางซีรั่มวิทยาพบว่าเป็นซีโรไทป์ 1, 2 และ 1/2 จำนวน 1, 3 และ 1 สายพันธุ์ตามลำดับ วิธี multiplex PCR ที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถให้ผลที่ถูกต้อง รวดเร็ว และประหยัด
บทคัดย่อ (EN): Streptococcus suis (S. suis) is an important zoonotic agent. Because of the variable biochemical characteristics, the organism is often either misdiagnosed or undiagnosed. Hence multiplex PCR assay for diagnosis of Streptococcus suis (S. suis) and S. suis serotypes was developed and evaluated. This multiplex PCR is based on the amplification of 16S rRNA gene encoding the capsular polysaccharide genes (cps) of S. suis serotypes 1(or 14), 2(or 1/2), 7 and 9. To evaluate the specificity of the test, reference strains of S. suis serotypes 1/2, 1 - 9 and 14, and 7 other bacterial species were analyzed. The multiplex PCR assay can diagnose the target genes, as shown by PCR products of the predicted sizes, and can detected at 104 cfu/ml bacteria concentration or above. No amplification products were obtained from any other bacterial species. The multiplex PCR assay was then applied to the identification of S. suis isolated from diseased pigs and apparently healthy pigs together with serological tests. All of the 47 S. suis isolates (6 and 41 of S. suis 1 and 2 isolates, respectively) from diseased pigs as identified by conventional method and rapid API? 20 Strep were positive with 16S rRNA. However only 34.1%(14/41) of S. suis serotype 2 which identified by API? 20 Strep was serotype 2 (or 1/2) by multiplex PCR, while serological tests revealed the agreement with the later (7 isolates each were serotypes 2 and 1/2,). More over 2 and 9 isolates of S. suis 1 and S. suis 2 as identified by API? 20 Strep were serotype 9 by multiplex PCR. In case of the identification of bacterial cultures from 1,427 samples collected from apparently healthy pigs, the monoplex PCR was used for screening of S. suis. Then multiplex PCR assay was done in order to minimize the cost and labor. It was found that 346 samples was S. suis positive, they were serotype 1(or 14) and type 2(or 1/2) 1 and 4 isolates respectively. Finally they were identified serologically as serotype 1, 2 and 1/2 (1, 3 and 1 isolates respectively). The multiplex PCR assays developed was shown to be sensitive, rapid and low cost.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://www.tnrr.in.th/?page=result_search&record_id=10465400
เผยแพร่โดย: กรมปศุสัตว์
คำสำคัญ: ซีโรไทป์
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

พรเพ็ญ พัฒนโสภณ. "การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCRDevelopment of multiplex PCR for detection of Streptococcus suis and serotype specific genes". กรมปศุสัตว์. 2552

พรเพ็ญ พัฒนโสภณ. "การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCRDevelopment of multiplex PCR for detection of Streptococcus suis and serotype specific genes". กรมปศุสัตว์. 2552. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อ ซีโรไทป์โดยใช้เทคนิค multiplex PCR
พรเพ็ญ พัฒนโสภณ
กรมปศุสัตว์
30 กันยายน 2552
กรมปศุสัตว์
การพัฒนาการตรวจหา เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส และยีนที่จำเพาะต่อซีโรไทป์ โดยใช้เทคนิค multiplex PCR การพัฒนา multiplex PCR สำหรับตรวจหาซีโรไทป์ และความรุนแรงของเชื้อพาสเจอเรลลา มัลโตซิดา ที่แยกได้จากสุกร การตรวจหา Suilysin และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของ เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วย สุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคและคนที่เกี่ยวข้องโดยใช้เทคนิค PCR การตรวจหายีนที่ควบคุมความรุนแรง: suilysin, muramidase-released protein และ extracellular factor ของเชื้อสเตรป โตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วยและสุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคโดยใช้เทคนิค multiplex PCR การตรวจหา Suilysin และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของเชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วย สุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคและคนที่สัมผัสกับสุกรโดยใช้เทคนิค PCR การตรวจหาเชื้อปรสิตที่ติดต่อผ่านทางดินโดยใช้เทคนิคทางโมเลกุล ในพื้นที่มี การปลูกยางพารา ในภาคเหนือตอนล่างของประเทศไทย การตรวจหาเชื้อไวรัสและแบคทีเรียก่อโรคอุจจาระร่วงเฉียบพลัน 19 ชนิด ในการทดสอบเดียว ด้วยเทคนิค Multiplex real-time PCR Detection of 19 types of virus and bacteria causing acute diarrhea in single test b การตรวจหาฤทธิ์ทางชีวภาพในด้านเครื่องสำอางของน้ำส้มควันไม้ยูคาลิปตัส การตรวจหาสายพันธุ์ของงาม้อนได้อย่างรวดเร็วในการผลิต กรดไขมันไม่อิ่มตัว การพัฒนาเทคนิค Reverse dot blot hybridization สำหรับตรวจหาความผิดปกติของยีน β-thalassemia Developments of Reverse dot blot hybridization technique for detection of β-thalassemia mutation
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair