สืบค้นงานวิจัย
การระบุและศึกษาลักษณะสมบัติของฟิโคลินในกุ้งกุลาดำ
ราตรี วงศ์ปัญญา - มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
ชื่อเรื่อง: การระบุและศึกษาลักษณะสมบัติของฟิโคลินในกุ้งกุลาดำ
ชื่อเรื่อง (EN): Identification and characterization of ficolin in the black tiger shrimp, Penaeus monodon
บทคัดย่อ: ฟิโคลินเป็นโปรตีนที่สามารถจับกับคาร์โบไฮเดรตบนผิวเซลล์ได้ โปรตีนนี้จึงมีบทบาทสำคัญในการจดจำและกำจัดเชื้อโรคในภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติของสิ่งมีชีวิต ในการศึกษานี้ได้มีการระบุและแยกลักษณะยีนฟิโคลินจากกุ้งกุลาดำ Penaeus monodon การวิเคราะห์ความยาวเต็มโดยใช้เทคนิค Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) พบว่าความยาวตลอดสายของยีนประกอบด้วย 1,007 bp พบว่า 918 bp เป็นรหัสกรดอะมิโน 306 ตัว โดยโปรตีนประกอบด้วยส่วน signal peptide ส่วน unknown และส่วนที่คล้าย fibrigenogen และเมื่อตรวจสอบการแสดงออกของยีนในอวัยวะต่างๆ ด้วยเทคนิค semi-quantitative RT-PCR พบว่ายีนมีการแสดงออกหลักในลำไส้จากนั้นทำการผลิตและทำให้บริสุทธิ์โปรตีน recombinant เพื่อศึกษาการทำงานของโปรตีนฟิโคลิน โดยยีนฟิโคลินถูกโคลนเข้าพลาสมิด 3 ชนิด ได้แก่ pET28b-ficolin, pET32a-ficolin และ pET43-ficolin ตามลำดับ ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่อยู่ในพลาสมิด pET28b-FLP และ pET32a-FLP สามารถสร้างโปรตีนในรูปตกตะกอนได้ ซึ่งรูปแบบนี้ไม่สามารถจะนำไปศึกษาสมบัติของโปรตีนได้ อย่างไรก็ตามการผลิตโปรตีนที่ติดฉลาก Nus (rPmficolin) โดย pET43-ficolin สามารถผลิตโปรตีนในรูปที่ละลายได้ ซึ่งโปรตีนที่ผลิตได้จะนำมาการวิเคราะห์ด้วย western blot ทำบริสุทธิ์โปรตีนและการวิเคราะห์คุณสมบัติโปรตีน ต่อไป ผลจากการศึกษาครั้งนี้สามารถให้ความรู้พื้นฐานเกี่ยวกับฟิโคลินที่อาจเป็นประโยชน์ในการทำความเข้าใจเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันที่เกิดจากกุ้งได้
บทคัดย่อ (EN): Ficolin is carbohydrate binding proteins that play an important role in recognizing and eliminating pathogens in innate immunity. In the present study, ficolin-like protein from black tiger shrimp Penaeus monodon was identified and characterized. Full-length analysis using Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) revealed that the gene consists of 1,007 bp. An open reading frame of 918 bp was found encoding for 306 amino acids. The protein comprises of a signal peptide, unknown domain, and a fibrinogen-like domain. Semi-quantitative RT-PCR revealed that the main expression of PmFLP transcript was an intestine. To study the protein function, PmFLP was cloned into expression vectors pET28b-ficolin, pET32a-ficolin, and pET43-ficolin, respectively, for a recombinant protein production and purification. The results showed that the recombinant proteins using pET28b-FLP and pET32a-FLP could produce an inclusion form of the protein. Fortunately, NUS tagged-ficolin protein (rPmficolin) by pET43-ficolin was successfully produced as a soluble form. Therefore, western blot analysis, protein purification and protein properties analysis will be carried out. The result of this study could provide a basic knowledge on the Pmficolin that might be useful for better understanding of shrimp innate immunity.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
คำสำคัญ: กุ้งกุลาดำ
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การระบุและศึกษาลักษณะสมบัติของฟิโคลินในกุ้งกุลาดำ
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
30 กันยายน 2560
การศึกษาลักษณะสมบัติและการแสดงออกของยีน asialoglycoprotein receptor จากกุ้งกุลาดำPenaeus monodon การค้นหารูปแบบพันธุกรรมที่แสดงความสัมพันธ์กับลักษณะความต้านทานโรคตัวแดงดวงขาวในกุ้งกุลาดำ การหาลักษณะเฉพาะของชุมชนแบคทีเรียในลำไส้ในกุ้งกุลาดำและกุ้งขาวแปซิฟิกเมื่อได้รับเชื้อ Vibrio harveyi การศึกษาลักษณะและหน้าที่ของโปรตีน Argonaute ในการเจริญของเซลล์สืบพันธุ์และการพัฒนาตัวอ่อนของกุ้งกุลาดำ การศึกษากลไกที่เกี่ยวข้องกับการรอดตายจากการติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวของกุ้งกุลาดำ การพัฒนาเทคโนโลยีการเก็บรักษาถุงน้ำเชื้อกุ้งกุลาดำที่อุณหภูมิต่ำเพื่อการเพาะเลี้ยงและการอนุรักษ์ การประเมินความคงทนและประสิทธิภาพของไข่แอนติบอดีในการควบคุมโรคเรืองแสงของกุ้งกุลาดำ ผลของการเพาะเลี้ยงกุ้งกุลาดำที่เพาะเลี้ยงด้วยลูกกุ้งที่ผ่านการพัฒนาสายพันธุ์ของ สวทช. ในบ่อเลี้ยงของเกษตรกร การจัดการดินในแปลงฟื้นฟูพื้นที่ที่ผ่านการเลี้ยงกุ้งกุลาดำเพื่อปลูกข้าวโพดหวานในจังหวัดสมุทรสาคร การพัฒนาอาหารสำเร็จรูปเพื่อกระตุ้นการเจริญพันธุ์ของกุ้งกุลาดำเพศผู้
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก