สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาวิธีตรวจสภาพติดเชื้อ วัคซีน และยาเพื่อป้องกันและรักษาโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ Fasciola gigantica
ประเสริฐ โศภน - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาวิธีตรวจสภาพติดเชื้อ วัคซีน และยาเพื่อป้องกันและรักษาโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ Fasciola gigantica
ชื่อเรื่อง (EN): Developments of diagnosis, vaccine, and drugs for protection and therapeutics against fasciolosis by Fasciola gigantica
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ประเสริฐ โศภน
บทคัดย่อ: โครงการวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์โดยรวมคือ !)การพัฒนาวิธีตรวจสอบสภาพการติดเชื้อพยาธิ Fasciola gigantica โดยวิธี sandwich ELISA เพื่อพัฒนาเป็นชุดตรวจสอบ (inmunodiagnostic kit) โดยใช้ การตรวจหา circulating antigens (28.5 1D, Cathepsin B/L /D, LAPและ SAP) ด้วยโมโนโคลนัลแอนติบอดี และโพลีโคลนัลอนติบอดีที่จำเพะต่อแอนติเจนเหล่านี้ )ทดสอบศักยภาพการเป็นวัศซีนโดยการใช้ recombinant prote : ที่สังเคราะห์จาก DNA ของ Cath BLD, LAP และ SAP 3) ทดสอบในเบื้องต้น เกี่ยวกับการออกฤทธิ์ฆ่าพยาธิของสารจากสมุนไพร โดยเฉพาะสารสกัดจากต้นมะหาดในกลุ่ม 2, 4, 3, 5 tetrabhydroxystilbene (THS), สาร plunbagin (PBG) จากต้นเจตมูลเพลิงแดง และสาร atesiunate (ATS) จากต้นชิงเฮาคณะผู้วิจัยได้ทำการสังเคราะห์ยืน ((DNA) ของ CatiB, CathL, CathD, LAP และ SAP ได้สำเร็จ โดยการใช้วิธี screening cDNA 1ibraries ของพยาธิ F. giguntica ระยะตัวเต็มวัย (Adult, AD) ระยะ newly exccysted juvenile (NEJ) และระยะ netacercaria (MC) ด้วย probes และ primers ที่ออกแบบและสังเคราะห์ จากยีนที่คล้ายกันจากพยาธิ E. hepatica แล: Schitosoma 5pp. ที่คันได้จากฐานข้อมูล NCBI จากนั้นได้ทำ การสังเคราะห์ secombinant proteins โดยใช้ระบบแบคที่เรียหรือยีสต์ แล้วตรวจสอบการแสดงออกของยืน ด้วยวิธี in siti Lybridization และการกระจายของโปรตีนด้วยวิธี innunoperoxidase และ imnunofuorescence ปรากฎว่า CatiB มี 3 isotypes เรียกว่า CathB1, B2, B3 ซึ่ง CathB3 และ B2 มีการ แสดงออกมากใน NEJ และพยาธิวัยอ่อน ส่วน CatiB! มีการแสดงออกทุกระยะรวมทั้งระยะ AD สำหรับ Catil มีประมาณ 10 isotypes แต่ isotrpes ที่แสดงออกในระยะ NEJ คือ CathL1G และ LIH ยืน LAP มี การแสดงออกในทุกระยะของพยาธิ ส่วนยืน SAP มี 2 isotypes ซึ่ง SAP! แสดงออกใน NEJ และพยาธิวัย อ่อน ส่วน SAP2 แสดงออกในะยะ AD CatD ยืนมีการแสดงออกในระยะ AD เป็นส่วนใหญ่ ดังนั้นจึงได้ ทำการนำ recombinant protein: เหล่านี้มาทดสอบศักยภาพในการเป็นวัคซีนในหนู โดยการ inmuaize หนู ด้วย recmbinant proteins ผสมกับ Freuds adjuvnt เป็นเวลา 4 สัปดาห์ แล้วติดเชื้อพยาธิด้วยการ์ป้อน metacercaria 20 อันต่อหนูหนึ่งตัว เพื่อประเมิณค่า percent protectioa ซึ่งขณะนี้กำลังเก็บข้อมูลและทำการ ประเมิณผลในขั้นสุดท้ายอยู่เราได้ทำการผลิต monoclonal antibodies (Mo.Ab) และ polyclonal antibodies (PoAB) ต่อ แอนติเจนในผิวที่ M.W. 28.5 ID (TA 28.5 1D), CatiB3 และ LAP ได้สำเร็จ และได้นำ MoAb และ PoAb ต่อ TA 28.5 3D ไปพัฒนาวิธีตรวจสอบการติดเชื้อด้วยวิธี sadich ELISA ปรากฎว่าได้ผลดี จึงได้ขอยื่น จดสิทธิบัตรแล้ว ส่วน M.AB และ PoAb ต่อ Cat83 และ LAP จะมีการทดสอบในทำนองเดียวกันต่อไป เราได้ทดสอบการอกฤทธิ์ของสารสกัดหรือสารที่ได้จากสมุนไพรแล้วพบว่า THS มีการออกฤทธิ์ ในการทำลายพยาธิระยะตัวเต็มวัยและระย: NEJ ด้ดีที่สุดใกล้เคียงกับยา Triclabendazole ส่วน PBG มี การออกฤทธิ์รองลงมาและสามารถฆ่าพยาธิ S. manรoห: ได้อีกด้วย ส่วน ATS มีการออกฤทธิ์ต่ำสุด ดังนั้น จึงมีความเป็นไปได้ที่จะพัฒนาสาร THS และ PBG เป็นยาฆ่าพยาธิใบไม้ตับและพยาธิใบไม้เลือดต่อไปได้
บทคัดย่อ (EN): The three maid aims of this research are: 1) to test vaccine potentials of recombinant proteins from the parasites protease enzymes, including catbepsin B/L/D, leucine amino peptidase (LAP) and saposin (SAP) that tbe parasites use for penetration and migration in bost tissues, and for digestion; 2) to develop immunodiagnostic tests using monoclonal antibodies (Mo.Ab) and polyclonal antibodies (PoAb) against some of these proteins; and 3) to test the antibelminthic activities of extracts from medicinal plants, including Antrocarpus lagoocha (IHS), Plumbago indica (PEG) and artesuoate (ATS) from Qinghoa. We could fully syuthesize cDNA of CathB 1, B2, B3, CathL1G, L1H, CathD, LAP and SAP by screening tbe genes from cDNAs libraries from adult, NEJ, and metacercaria, and amplified the genes by RT-PCR. Using in situ bybridization and imnunolocalization CathB3, B2,CathL1G,L1H are expressed preferentially in NEJ and juvenile parasites. CathD is expressed preferentially in adult, LAP is expressed in all stages, while SAP is expressed in NEJ and juvenile, and SAP2 in adult only. Tberefore, it is thought that using recombinant proteins from these enzymes could block tbe migration (invasion) of NEJ as well as arrest or lill the juveniles as well as adult parasites. Recombinant proteins from CathB3, B2, D, LIG, L1H, LAP and SAP2 bave been su essfully synthesized in the bacterial or the yeast system. The vaccine potentials of these recombinant proteins are currently being tested in mice. We bave successfully produced monoclonal antibodies (Mo.Ab) and polyclonal antibodies (PoAb) against 28.5 1D tegument antigen (TA 28.5 1D), CathB3, LAP. MoAb and Po.Ab against T.A 28.5 1D bas The three maid aims of this research are: 1) to test vaccine potentials of recombinant proteins from the parasites protease enzymes, including catbepsin B/L/D, leucine amino peptidase (LAP) and saposin (SAP) that tbe parasites use for penetration and migration in bost tissues, and for digestion; 2) to develop immunodiagnostic tests using monoclonal antibodies (Mo.Ab) and polyclonal antibodies (PoAb) against some of these proteins; and 3) to test the antibelminthic activities of extracts from medicinal plants, including Antrocarpus lagoocha (IHS), Plumbago indica (PEG) and artesuoate (ATS) from Qinghoa. We could fully syuthesize cDNA of CathB 1, B2, B3, CathL1G, L1H, CathD, LAP and SAP by screening tbe genes from cDNAs libraries from adult, NEJ, and metacercaria, and amplified the genes by RT-PCR. Using in situ bybridization and imnunolocalization CathB3, B2,CathL1G,L1H are expressed preferentially in NEJ and juvenile parasites. CathD is expressed preferentially in adult, LAP is expressed in all stages, while SAP is expressed in NEJ and juvenile, and SAP2 in adult only. Tberefore, it is thought that using recombinant proteins from these enzymes could block tbe migration (invasion) of NEJ as well as arrest or lill the juveniles as well as adult parasites. Recombinant proteins from CathB3, B2, D, LIG, L1H, LAP and SAP2 bave been su essfully synthesized in the bacterial or the yeast system. The vaccine potentials of these recombinant proteins are currently being tested in mice. We bave successfully produced monoclonal antibodies (Mo.Ab) and polyclonal antibodies (PoAb) against 28.5 1D tegument antigen (TA 28.5 1D), CathB3, LAP. MoAb and Po.Ab against T.A 28.5 1D bas been developed into imnunodiagnostic test by sandwitch ELISA, and the patent has been filed. Attempts are now made to develop sandwitch ELISA tests using MoAb and PoAb against CathB3 and LAP, which are expected to yield better result because these antigens possess larger molecular weights than T.A 28.5 k:D, that could result in better capturing by their corresponding antibodies Extracts from 3 medicinal plants including Arthrocarpus lagoocha (IHS), Plumbago indica (PBG) and artesunate (ATS) from Qinghao bave been tested for tbeir autebelmintic activities (ATH). THS sbowed high ATH for both adult and NEJ almost as well as triclabendazole (ICZ), while PBG exbibited medium level ATH against F. gigantica, but also could readily killed Schistosoma mansoni. ATS sbowed lowest ATH activity. Thus with more detailed studies, THS and PBG could be developed into antebelminthic dougs.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ: ยาฆ่าพยาธิ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ประเสริฐ โศภน. "การพัฒนาวิธีตรวจสภาพติดเชื้อ วัคซีน และยาเพื่อป้องกันและรักษาโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ Fasciola giganticaDevelopments of diagnosis, vaccine, and drugs for protection and therapeutics against fasciolosis by Fasciola gigantica". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2553

ประเสริฐ โศภน. "การพัฒนาวิธีตรวจสภาพติดเชื้อ วัคซีน และยาเพื่อป้องกันและรักษาโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ Fasciola giganticaDevelopments of diagnosis, vaccine, and drugs for protection and therapeutics against fasciolosis by Fasciola gigantica". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2553. Print.



TARR Wordcloud:
การพัฒนาวิธีตรวจสภาพติดเชื้อ วัคซีน และยาเพื่อป้องกันและรักษาโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ Fasciola gigantica
ประเสริฐ โศภน
มหาวิทยาลัยมหิดล
30 กันยายน 2553
การพัฒนาและประยุกต์ใช้วิธีวินิจฉัยการติดเชื้อกับวัคซีนจากแอนติเจนในกลุ่มเอนไซม์ต่อต้านอนุมูลอิสระสำหรับโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ การพัฒนาวัคซีนต้านโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์โดยใช้เอ็นไซม์ที่ย่อยสลายโปรตีนจำเพาะในพยาธิตัวอ่อน การพัฒนาวัคซีนต้านโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์โดยใช้เอ็นไซม์ที่ย่อยสลายโปรตีนจำเพาะในพยาธิตัวอ่อน การพัฒนา recombinant 3ABC-based ELISA เพื่อวินิจฉัยสัตว์ที่ติดเชื้อไวรัสโรคปากและเท้าเปื่อยออกจากสัตว์ที่ได้รับวัคซีน การพัฒนา recombinant 3ABC-based ELISA เพื่อวินิจฉัยสัตว์ที่ติดเชื้อไวรัสโรคปากและเท้าเปื่อยออกจากสัตว์ที่ได้รับวัคซีน การประยุกต์ใช้อาหารพื้นบ้านปลอดพยาธิในการควบคุมการติดเชื้อพยาธิใบไม้ตับและการลดความเสี่ยงในการเป็นโรคมะเร็งตับและท่อทางเดินน้ำดีในชุมชนที่มีอัตราการติดเชื้อพยาธิสูง การคัดแยกเชื้อแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดโรคเหงือกในปลานิล (Flavobacterium columnarae) เพื่อพัฒนาเป็นวัคซีนป้องกันโรค การติดเชื้อตัวอ่อนพยาธิใบไม้ระยะเซอร์คาเรียของหอยน้ำจืดวงศ์ Thiaridae ในประเทศไทย บริบททางสังคมและวิถีชุมชนของชาวบ้านแถบลุ่มน้ำชีกับการป้องกันควบคุมโรคพยาธิใบไม้ตับ การพัฒนาชุดตรวจสอบดีเอ็นเอเพื่อตรวจวินิจฉัยพยาธิใบไม้ในกระเพาะวัว
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair