สืบค้นงานวิจัย
การผลิตโพลิเมอร์ที่แสดงคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทสและการสร้างสายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะกับโลหะเพื่อประยุกต์ใช้ใ
Theeraphon Piacham - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การผลิตโพลิเมอร์ที่แสดงคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทสและการสร้างสายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะกับโลหะเพื่อประยุกต์ใช้ใ
ชื่อเรื่อง (EN): Metal-supporting polymer for superoxide dismutase mimics and construction of metal-binding tag for protein purification
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Theeraphon Piacham
บทคัดย่อ: Co2+ ดังนั้นโปรตีนลูกผสมระหว่าง hexahistidine กับโปรตีนเรืองแสงฟลูออเรสเซนต์สีเขียว(green fluorescent protein) ซึ่งถูกสร้างมาจากวิธีทางพันธุวิศวกรรมนั้นสามารถทำให้บริสุทธิ์ได้โดยใช้ Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) ที่มี Zn2+ เป็นโลหะตัวกลาง โดยโลหะนี้ถูกเลือกเป็นตัวจับกับโปรตีนลูกผสมเนื่องมาจาก สามารถใช้เป็นตัวยืนยันคุณสมบัติการจับจำเพาะกับโลหะที่เกิดจากสายเปปไทด์มิใช่เกิดจากส่วนอื่นๆในโครงสร้างโปรตีน จากผล การทดลองพบว่าระดับของความบริสุทธิ์ของโปรตีนลูกผสมเมื่อพิจารณาจากสัดส่วนความบริสุทธิ์ในแต่ละขั้นตอนนั้นยังให้ค่าที่ไม่ สูงนักแต่อย่างไรก็ตามความบริสุทธิ์ที่ได้นั้นเพียงพอต่อการนำไปใช้งานและยังสามารถทำให้บริสุทธิ์ได้ในขั้นตอนเดียว นอกจากนั้น โปรตีนลูกผสมดังกล่าวยังถูกออกแบบให้มีตำแหน่งตัดจำเพาะด้วยเอนไซม์เอนเทอโรไคเนสเพื่อตัดสาย hexahistidine ทิ้งภาย หลังขั้นตอนการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ ในกรณีที่สายเปปไปด์อาจมีผลรบกวนคุณสมบัติและการทำงานของโปรตีนนั้น แต่จากผลการ ทดลองพบว่า สายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติจับกับโลหะและตำแหน่งตัดจำเพาะนั้นไม่มีผลรบกวนต่อคุณสมบัติการเรืองแสงของ โปรตีนและคุณสมบัติการจับจำเพาะกับเอนไซม์โปรตีเอส ซึ่งจากผลการทดลองเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า สายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติจับ กับโลหะมีศักยภาพในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ด้วยวิธีการที่ง่ายในขั้นตอนเดียว นอกจากนั้นโปรตีนเรืองแสงลูกผสมที่ถูกสร้างขึ้น นั้นยังสามารถนำไปประยุกต์ใช้เป็นเครื่องมือในการตรวจติดตามที่มีประสิทธิภาพในอนาคต
บทคัดย่อ (EN): A Polymer-supported manganese catalyst possessing superoxide dismutase (SOD) activity was synthesized. Matrices consisting of either 4-vinylimidazole (4V) or 1- vinylimidazole (1V) in combination with methacrylic acid (MAA), which were expected to provide avidity to Mn (II) similar to that of the combination of histidine and aspartic acid residues at an active site of SOD, were selected as functional monomers to form a coordination sphere with template metal in a cross-linked polymer. All these matrices were prepared to form polymers through free radical polymerization, using excess amounts of the cross-linking monomer, ethyleneglycol dimethacrylate (EDMA). Mimicing the SOD activity of the polymers was assayed by measuring the inhibition of the photoreduction of nitro blue tetrazolium (NBT). It was anticipated that this catalytic activity would generate from the coordination between a metal center and a complex of three imidazole and one carboxyl groups as in the case of the native enzyme. Surprisingly, the polymer Mn-P1VMAA exhibited much higher activity than did the Mn-P4VMAA. Omitting one of the functional monomers (1V or MAA) resulted in a decrease in SOD activity. These findings strongly support a high potential for the application of the catalytic metal based-imprinted polymer for therapeutic use in the future. The metal-binding tag was applied as a powerful approach for protein purification. The tagger was inserted into the protein of interest at the gene level. Based on the concept that polyhistidine bind tightly with a number of transition metals including Cu2+, Ni2+, Zn2+ and Co2+, the hexahistidine-tagged GFPuv generated from the gene fusion technique here could be purified with Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) charged with zinc ions. Zinc ions rather than copper or nickel ions, were chosen as a linker on account of the very low adsorptivity of the native GFPuv. Although the purification fold of the H6GFP was not greater than that of the native GFPuv, the H6GFPuv was highly pure and the purified protein could easily be obtained in a one-step purification process. Furthermore, an enterokinase cleavage site (DDDDK) could also be inserted to allow for the removal of the hexahistidine sequence after purification in such a way that the fusion partner might interfere or disturb the properties of the native protein. However, neither the metal-binding region nor the enterokinase cleavage site affected either the fluorescent emission or the capacity to bind with the protease of the chimeric protease-binding GFPuv. These findings clearly indicate that the metal-binding tag could simply be fused to assist protein purification and the purified chimeric protease-binding GFPuv can directly be applied as a potential tool for protease detection in the future
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=2559&obj_id=1777
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Superoxide Dismutase
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: Co2+ ดังนั้นโปรตีนลูกผสมระหว่าง hexahistidine กับโปรตีนเรืองแสงฟลูออเรสเซนต์สีเขียว(green fluorescent protein) ซึ่งถูกสร้างมาจากวิธีทางพันธุวิศวกรรมนั้นสามารถทำให้บริสุทธิ์ได้โดยใช้ Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) ที่มี Zn2+ เป็นโลหะตัวกลาง โดยโลหะนี้ถูกเลือกเป็นตัวจับกับโปรตีนลูกผสมเนื่องมาจาก สามารถใช้เป็นตัวยืนยันคุณสมบัติการจับจำเพาะกับโลหะที่เกิดจากสายเปปไทด์มิใช่เกิดจากส่วนอื่นๆในโครงสร้างโปรตีน จากผล การทดลองพบว่าระดับของความบริสุทธิ์ของโปรตีนลูกผสมเมื่อพิจารณาจากสัดส่วนความบริสุทธิ์ในแต่ละขั้นตอนนั้นยังให้ค่าที่ไม่ สูงนักแต่อย่างไรก็ตามความบริสุทธิ์ที่ได้นั้นเพียงพอต่อการนำไปใช้งานและยังสามารถทำให้บริสุทธิ์ได้ในขั้นตอนเดียว นอกจากนั้น โปรตีนลูกผสมดังกล่าวยังถูกออกแบบให้มีตำแหน่งตัดจำเพาะด้วยเอนไซม์เอนเทอโรไคเนสเพื่อตัดสาย hexahistidine ทิ้งภาย หลังขั้นตอนการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ ในกรณีที่สายเปปไปด์อาจมีผลรบกวนคุณสมบัติและการทำงานของโปรตีนนั้น แต่จากผลการ ทดลองพบว่า สายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติจับกับโลหะและตำแหน่งตัดจำเพาะนั้นไม่มีผลรบกวนต่อคุณสมบัติการเรืองแสงของ โปรตีนและคุณสมบัติการจับจำเพาะกับเอนไซม์โปรตีเอส ซึ่งจากผลการทดลองเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า สายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติจับ กับโลหะมีศักยภาพในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ด้วยวิธีการที่ง่ายในขั้นตอนเดียว นอกจากนั้นโปรตีนเรืองแสงลูกผสมที่ถูกสร้างขึ้น นั้นยังสามารถนำไปประยุกต์ใช้เป็นเครื่องมือในการตรวจติดตามที่มีประสิทธิภาพในอนาคต
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Theeraphon Piacham. "การผลิตโพลิเมอร์ที่แสดงคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทสและการสร้างสายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะกับโลหะเพื่อประยุกต์ใช้ใMetal-supporting polymer for superoxide dismutase mimics and construction of metal-binding tag for protein purification". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2546

Theeraphon Piacham. "การผลิตโพลิเมอร์ที่แสดงคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทสและการสร้างสายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะกับโลหะเพื่อประยุกต์ใช้ใMetal-supporting polymer for superoxide dismutase mimics and construction of metal-binding tag for protein purification". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2546. Print.



TARR Wordcloud:
การผลิตโพลิเมอร์ที่แสดงคุณสมบัติเป็นซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทสและการสร้างสายเปปไทด์ที่มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะกับโลหะเพื่อประยุกต์ใช้ใ
Theeraphon Piacham
มหาวิทยาลัยมหิดล
2546
การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ไฟเทสจากเชื้อ Pseudomonas sp. ผลของรูปแบบการพยาบาลที่ประยุกต์ใช้ทฤ การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัลแอนติบอดีจำเพาะต่อสารก่อภูมิแพ้ไรฝุ่น การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัลแอนติบอดีจำเพาะต่อจุลชีพ L.interrogans และการนำไปประยุกต์ใช้ ความสัมพันธ์ระหว่างคุณสมบัติน้ำเสียอุตสาหกรรมกับระบบการผลิตก๊าซชีวภาพ การเพิ่มผลิตภาพในสายการผลิตแหวนและกำไลทองคำ การสร้างสายพันธุ์ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ที่ผลิตเอนไซม์ไคติเนสในระยะเซลล์สร้างสปอร์ ผลของความร้อนต่อคุณสมบัติกายภาพของทับทิมธรรมชาติ การศึกษาคุณสมบัติซีเมนต์ผสมขี้เถ้าแกลบ ผลของสภาพการเก็บรักษาต่อคุณสมบัติทางกายภาพและคุณสมบัติทางเคมีของเมล็ดพันธุ์งาขี้ม้อนที่ปลูกในภาคเหนือตอนบนของประเทศไทย
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair